Дисбактериоз полости рта

В такой ситуации он просто маскирует запах на какое-то время, а если в его состав входит алкоголь, то он еще и вызывает через время сухость. Исследования показывают, что в лучшем случает, эликсиры могут устранить до 30% бактерий, а остальные 70% будут продолжать свою активную разрушающую деятельность. Поэтому неприятный запах вновь появится через некоторое время.

Остается лишь сделать вывод, что нужно заботиться о предотвращении дурного запаха, для того, чтобы потом не пришлось с ним бороться.

Поэтому нужно помнить о причинах неприятного запаха изо рта и по возможности избегать их и не позволять оказывать разрушительное действие как на полость рта в частности, так и на весь организм, в общем.

Для этого рекомендуется должным образом ухаживать за полостью рта, не жалеть для этого времени, сил и средств для того чтобы всегда чувствовать себя уверенно и не переживать о том, не исходит ли от вас неприятный запах, который отталкивает других и препятствует общению между людьми.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Схема бактериологической диагностики при дисбактериозе ротовой полости.

Способ экспресс-диагностики дисбактериоза полости рта заключается в том, что по отношению интегральных оценок спектров поглощения газовыделений мазка с миндалин и выдыхаемого воздуха в диапазоне длин волн 933-954 см-1 судят о наличии дисбактериоза в ротовой полости, а именно при значении соотношения интегральных оценок поглощения газовыделений мазка с миндалин и выдыхаемого воздуха, в интервале 1,0±0,015 диагностируют норму, при отклонении от этих значений диагностируют дисбактериоз. Использование заявленного способа позволяет упростить и сократить время диагностики дисбактериоза полости рта. 4 табл.

Изобретение относится к области медицины, в частности микробиологии и гастроэнтерологии, и может найти применение в медицинской практике для экспресс-диагностики дисбактериоза полости рта.

В настоящее время основным методом оценки состояния микрофлоры различных биотопов является бактериологический анализ и заключается в заборе пробы биологического материала - слюны со слизистых рта, посеве на питательную среду и последующем учете микроорганизмов, который проводится согласно методическим рекомендациям МЗ СССР (Приказ №535, 1985). Данный метод является достоверным и адекватным, однако, отличается достаточно сложной, громоздкой технологией исследования и требует длительного времени для получения результата (5-6 сут).

Известен способ оценки дисбактериоза полости рта, основанный на определении отношения уреазы и лизоцима. Если это отношение превышает единицу, это свидетельствует о наличии дисбактериоза, степень которого коррелирует с величиной отношения [1]. Однако известный метод можно назвать малодоступным, т.к. требует наличия эталонного кристаллического белка - лизоцима и косвенным, потому что позволяет оценить, в большей мере, состояние местного иммунитета, а не микрофлоры.

Известен способ экспресс-диагностики дисбактериоза полости рта, выбранный в качестве прототипа, путем получения мазка-отпечатка со слизистой оболочки полости рта, окрашенного по методу Грамма. При этом подсчитывают количество грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, а степень дисбактериоза устанавливают по их соотношению [2]. Этот метод можно считать слишком упрощенным и вызывающим сомнения в достоверности его результатов.

Новая техническая задача - упрощение способа и сокращение времени.

Для решения поставленной задачи в способе экспресс-диагностики дисбактериоза полости рта, включающем забор пробы биологического материала из полости рта с последующим подсчетом в ней микроорганизмов, одновременно дополнительно осуществляют забор выдыхаемого воздуха.

В основу предлагаемого способа экспресс-диагностики дисбактериоза полости рта положена специфичность газовыделений различных микроорганизмов. Будучи живыми существами, микроорганизмы обладают обменом веществ (метаболизмом). Для получения энергии многие из них пользуются брожением. В результате бродильных процессов выделяются различные продукты, в том числе и газы. Например, стафилококк выделяет NH3, N2, NO2, H2S, кишечная палочка - СО2 (при наличии в среде глюкозы), индол, NO2, синегнойная палочка - NO2, N2 [3, 4].

Изменение состояния биосистемы, как правило, сопровождается разнонаправленной динамикой различных показателей, причем ряд из них может незначительно меняться по сравнению с нормой. С учетом этого для оценки изменения спектра поглощения газовыделений бактерий использовался интеллектуальный анализ данных, основанный на интегральной оценке состояния.

Предлагаемые критерии для диагностики дисбактериоза подобраны на основании анализа клинических наблюдений. Микробиологические исследования проводились на базе кафедры микробиологии и вирусологии Сибирского государственного медицинского университета и отделения химиотерапии ГУ НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН.

Материалом для исследования явились мазки со слизистой оболочки полости рта. Использовались бактериологический анализ и микроскопический метод. Материал из ротовой полости брали натощак стерильным ватным тампоном. Посев производили стеклянным стерильным шпателем равномерно по поверхности питательной среды в чашке Петри. Учет колоний проводили спустя 24 ч инкубации при 37°С, для грибов - через 5 сут при комнатной температуре. Дифференцировку микроорганизмов проводили до родов по морфологическим, тинкториальным и биохимическим свойствам. При изучении биологических свойств кокковой флоры определяли гемолитическую активность, плазмокоагулазу, лецитиназу. Оценку плазмокогулазы проводили с плазмой кролика по общепринятой методике, лецитиназу изучали на желточно-солевом агаре, гемолитическую активность исследовали путем посева односуточной культуры на агар с 5% дефибринированной кровью.

Обследовали 90 женщин в возрасте 47-60 лет. В группу больных включены 60 женщин с морфологически подтвержденным диагнозом: рак молочной железы (РМЖ) III и IV стадии и получивших специальную противоопухолевую терапию. Группу сравнения составили 30 женщин с терапевтической патологией.

Результаты исследования показали [6-9], что микрофлора ротовой полости больных РМЖ значительно отличалась по качественному составу от микрофлоры пациентов группы сравнения (таблица 1). Так, из ротовой полости женщин, не имеющих онкологической патологии, высевались стафилококки (21%), стрептококки (52%), энтеробактерии (17%), нейссерии (2%), грибы рода Кандида (6%).          У больных РМЖ большинство микроорганизмов составляли стафилококки (55%), увеличена высеваемость грибка Кандида (12%).

Выделенные из ротовой полости стафилококки и стрептококки мы подвергали оценке их биологических свойств с целью определения степени патогенности (вирулентности). Для этого было проведено исследование ферментов патогенности у данных бактерий: лецитиназы, плазмокоагулазы и гемолитических свойств. Результаты показали, что в группе сравнения выделенные из ротовой полости кокки гемолитической и лецитиназной активностью не обладали. Свертывание плазмы кролика они осуществляли более чем за 6 ч. У больных РМЖ обнаруживали кокки, обладающие достаточно высокой степенью патогенности: зона гемолиза на кровяном агаре у стафилококков была 15,42±0,21 мм, у стрептококков - 16,33±0,13 мм, лецитиназная активность (фосфолипаза) у стафилококков -7,44±0,52 мм, у стрептококков - 4,44±0,28 мм, стафилококки свертывали плазму в течение 2,51±0,18 ч, стрептококки - 2,34±0,17 ч (таблица 2). Таблица 2 - Биологические свойства кокковой флоры, выделенной из ротовой полости больных РМЖ (Х±m). Примечание к табл.2: р - уровень достоверности результатов между группой сравнения и больными раком молочной железы

Таким образом, у больных РМЖ после химиотерапевтического лечения отмечен дисбаланс ротовой микрофлоры: увеличивается высеваемость стафилококка и кандида, кокковая флора обладает высоким содержанием ферментов патогенности (лецитиназы, плазмокоагулазы, гемолитических свойств).

Проведены исследования качественного состава микрофлоры ротовой полости у больных раком легкого до начала лечения и в условиях противоопухолевой химиотерапии. Всего обследовано 15 мужчин и 5 женщин в возрасте 46-65 лет. В группы больных включены 20 мужчин и 3 женщины с морфологически подтвержденным диагнозом рак легкого (РЛ) 2-4 стадии, находившиеся на обследовании и лечении в отделении химиотерапии [6, 10]. Группу сравнения составили 18 здоровых мужчин и 2 здоровые женщины.

При исследовании было установлено, что микрофлора ротовой полости группы сравнения значительно отличалась по качественному составу от микрофлоры ротовой полости больных РЛ еще до проведения химиотерапии. Микрофлора ротовой полости группы сравнения была представлена, в основном, кокковой флорой: Staphylococcus, Streptococcus. Кроме того, обнаруживались Enterobacteria, грибы рода Candida. Наиболее часто высевались представители рода Streptococcus, в процентном соотношении их количество составляло 57% (таблица 3) от всех высеваемых в этом биотопе микроорганизмов. Представители рода Staphylococcus занимали 22%, на долю Enterobacteria приходилось до 15%, около 4% занимали грибы рода Candida и 2% Neisseria.

При этом было отмечено, что высеваемые стафилококки не имели признаков патогенности. У высеваемых стрептококков отсутствовала гемолитическая активность.

В группе больных РЛ до начала химиотерапии микрофлора ротовой полости также была представлена кокковой флорой: Staphylococcus, Streptococcus, высевались Enterobacteria, грибы рода Candida. На долю Staphylococcus, Streptococcus приходилось по 35%, Enterobacteria составляло 20%, остальные 10% представлены грибами рода Candida. Высеваемые Staphylococcus не имели признаков патогенности и Streptococcus с умеренной гемолитической активностью.

В таблице 3 приведены данные по высеваемости микроорганизмов ротовой полости здоровых людей и больных раком легкого в условиях противоопухолевой химиотерапии (%).

Примечание: процентное содержание микроорганизмов рассчитано на группу обследуемых.

После первого курса химиотерапии в группе больных РЛ на долю Staphylococcus приходится 40%, на долю Streptococcus 29%, Enterobacteria 19% и грибы рода Candida -12%.

После второго курса химиотерапии доминирующее положение в микробиоценозе ротовой полости занимают Staphylococcus без признаков патогенности. Количество их в процентном соотношении достигало 54%, реже высевались Streptococcus с умеренной гемолитической активностью - 8%, Enterobacteria - 14%. Высеваемость грибов рода Candida увеличилась до 24%.

Таким образом, в составе микрофлоры ротовой полости больных РЛ чаще обнаруживаются представители рода Staphylococcus и Streptococcus. После проведения каждого курса противоопухолевой химиотерапии увеличивается количество Staphylococcus, грибы рода Candida и снижается количество Streptococcus.

В результате проведенных исследований нами обнаружен дисбаланс нормальной микрофлоры в полости рта у больных раком молочной железы и раком легкого, выявляемый до и после проведенной химиотерапии. При этом отмечается замещение представителей нормальной, индигенной микрофлоры дрожжеподобными грибами рода Candida и кокковой группы, несущей признаки патогенности и вирулентности, что указывает на дисбактериоз.

Результаты спектроскопических исследований

Критерии включения пациентов в исследование.

1. Пациенты, имеющие верифицированый  диагноз рака молочной железы, выявленный впервые, не получавшие  ранее лечение цитостатиками.

2. Пациенты, имеющие верифицированный  диагноз немелкоклеточного, либо  мелкоклеточного рака легкого, не  получавшие ранее цитостатического  лечения.

Критерии исключения пациентов из исследования.

1. Пациенты, получающие в течение 12 месяцев до включения в исследование массивную антибактериальную терапию.

Алгоритм обследования и лечения больного.

Проведение исследования проводилось до и после курса химиотерапии в условиях отделения химиотерапии ГУ НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН. Исследуемым материалом являлся зубной налет, мазки со слизистой поверхности щек и миндалин, пробы выдыхаемого воздуха.

Этапы обследования.

Исследование включало мазок со слизистой щек, миндалин, забор зубного налета и выдыхаемого воздуха, непосредственно перед началом курса химиотерапии и на 7-10 сутки после его окончания. Для лечения рака молочной железы пациенты получают стандартные схемы химиотерапии FAC или AT.

Исследование состояния микрофлоры пациентов проводилось в следующем режиме: производился забор налета зубов, мазков с миндалин и щек, а также выдыхаемого воздуха. Забор производился до введения химиопрепарата и после завершения курса терапии. Производилось порядка 20 измерений каждой пробы. Соответственно суммарно на каждого пациента проводилось 80 измерений до курса химиотерапии и 80 измерений - после.

В качестве референтного состояния использовались данные по спектру поглощения выдыхаемого воздуха здоровых людей. Референтное состояние сформировано по результатам измерения спектра поглощения выдыхаемого воздуха у 31 человека, возраста 18-20 лет, некурящих, без хронических заболеваний.

В таблице 4 представлены величины результатов интегральной оценки этих данных состояния микрофлоры в различных диапазонах спектра поглощения

На чертеже представлены результаты интегральной оценки спектра поглощения микрофлоры у онкобольных до и после курса химиотерапии при различных способах забора пробы. Количественная оценка специфичности спектра поглощения газовыделений исследуемого объекта определялась по отношению к спектру, характеризующему эталонное состояние. Весь спектр генерации СО2 лазера разбивался на два поддиапазона (933-954 с-1 и 967-982 см-1), состояние характеризовалось двумя признаками: интегральной оценкой суммарного поглощения в каждом из этих диапазонов. Таким образом, виртуальное пространство признаков представляло собой плоскость. Результаты представлены на чертеже - интегральная оценка спектра поглощения у онкобольных до и после химиотерапии при различных способах забора пробы. В качестве референтного использовался спектр поглощения выдыхаемого воздуха здоровых людей.

Из представленных данных видно, что после химиотерапии наиболее сильно меняются газовыделения мазка с миндалин и со щек, наименьшие изменения наблюдаются для зубного налета. Это говорит о существенном дисбалансе микрофлоры преимущественно на слизистой оболочке в ротовой полости, что также согласуется с данными микробиологического анализа.

Кроме этого видно, что отношение интегральных оценок газовыделений мазка с миндалин и выдыхаемого воздуха наиболее сильно меняется до и после химиотерапии для диапазона 933-954 см-1. В соответствии с результатами микробиологического анализа этот показатель коррелирует с наличием дисбактериоза.

Предлагаемый способ может успешно применяться для диагностики дисбактериоза с целью назначения своевременной коррекции микрофлоры у пациентов после проведения лечения.