История трансплантации эмбрионов

ИСТОРИЯ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНОВ

Трансплантация эмбрионов впервые  была выполнена и описана Вальтером  Хипом в 1890 году. Он трансплантировал два эмбриона ангорских кроликов беременным крольчихам бельгийской  породы и получил смешанный помет  крольчат обоих пород. Опыты по пересадке  эмбрионов на крупных сельскохозяйственных животных начались в 1930-х годах на овцах и козах. Первые успешные пересадки  эмбрионов на крупном рогатом  скоте и свиньях были осуществлены в 1950-х годах Джимом Роусоном в Кембридже, Англия

Первые коммерческие пересадки  эмбрионов были проведены в начале 1970-х годов. Первоначально эмбрионы извлекались от доноров и подсаживались  реципиентам с использованием хирургического метода. Это продолжалось до конца 1970-х  годов, пока не был разработан не хирургический  метод и популярность трансплантации эмбрионов резко возросла.

Пересадку эмбрионов осуществляют двумя методами: хирургическим и  нехирургическим. Хирургический метод (чаще применяется за границей) включает лапаротомию по белой линии живота под общим наркозом или реже боковой разрез под местной анестезией с последующим обнажением полового тракта и введением эмбриона в полость матки через небольшой прокол в ее стенке. Непосредственно перед трансплантацией с помощью шприца для подкожных инъекций в пастеровскую пипетку, в кончике которой имеется небольшое количество среды для культивирования, засасывается подходящий эмбрион; все эти манипуляции тщательно контролируются под микроскопом. Проведение трансплантации хирургическим путем — трудоемкий процесс, для выполнения которого требуется опытная бригада ветврачей (как минимум 2 хирурга, анестезиолог), а также рабочий но уходу за животными; однако результаты, судя по стельности реципиентов после пересадки им эмбрионов, обычно бывают хорошими и варьируют в пределах от 52 до 90%.

У овец успешную трансплантацию хирургическим  способом осуществляли во все периоды  развития, вплоть до стадии 12—13-дневного удлиненного трофобласта, причем даже на поздних стадиях развития степень приживления эмбрионов была высокой (до 40% ). У свиней получен положительный результат только при пересадке 6—8-дневных блfстоцист, попытка пересадить удлиненный трофобласт на 9-й день развития оказалась безуспешной.

При нехирургическом методе пересадки животному делают низкую сакральную анестезию, вводят маточный релаксант.

Нехирургическую пересадку эмбрионов  проводят с помощью модифицированного  катетера Кассу, предназначенного для  искусственного осеменения.

Эмбрион засасывают шприцем в стерильную пайету в такой последовательности: среда, пузырек воздуха, среда с эмбрионом, пузырек воздуха, среда, пластиковая пробка.

Замороженные эмбрионы непосредственно  перед использованием оттаивают  быстрым методом, погружая в воду, нагретую до 37°С. Пайету, пробирку или ампулу быстро извлекают из канистры криобиологического сосуда, погружают в воду на 10-12 с. Оттаянные эмбрионы переносят из пробирки или ампулы на часовое стекло для морфологической оценки.

Подготовленный катетер Кассу  вводят во влагалище, затем под контролем  руки, находящейся в прямой кишке, продвигают через цервикальный канал  до середины рога на стороне яичника  с желтым телом. Убедившись в правильности расположения прибора, медленно выталкивают  содержимое пайеты в просвет рога матки.

Реципиентов после пересадки эмбрионов  обеспечивают полноценным кормлением, ежедневно предоставляют активный моцион. Через 50-60 дней после пересадки проводят ректальное исследование на стельность. При нехирургическом методе пересадки приживаемость эмбрионов составляет 40-50%.

Нехирургическая пересадка 8—16-клеточных  эмбрионов в матку свиней закапчивалась  супоросностью, хотя эффективность  в опытах была небольшой. Проведение канюли через длинный цервикальный канал свиньи остается трудной и  очень ответственной операцией  с постоянной опасностью прободения стенки полового тракта.