Споры, окрашенные синькой Леффлера,
имеют голубой цвет, вегетативные
тела бактерий – красный цвет.
Окраска по методу Ожешко для
выявления спор
- На высушенный нефиксированный препарат (мазок готовится толстым и на краю стекла) наливают несколько капель 0,5%-ного раствора соляной кислоты и подогревают 1 – 2 мин. над пламенем
горелки до закипания, после чего остатки
кислоты сливают.
- Остывший препарат промывают водой, подсушивают на воздухе и фиксируют на пламени горелки.
- Окрашивают карболовым фуксином Циля (фуксин наливают на фильтровальную бумажку) с подогреванием до появления
паров.
- Обесцвечивают 5%-ным раствором серной кислоты в течение нескольких секунд.
- Промывают водой.
- Докрашивают синькой Леффлера или 1%-ным водным раствором малахитовой зелени в течение 3 – 5 мин.
Споры, окрашенные фуксином, имеют
рубиново-красный цвет, вегетативные тела
микробных клеток при докрашивании синькой
Леффлера – синий цвет, при применении
малахитовой зелени – зеленый цвет.
Окраска по методу Гинса для
выявления капсул
- Приготавливают негативно окрашенный по методу Бурри препарат.
- Фиксируют любым химическим способом: метиловым спиртом, смесью Никифорова или другими смесями.
- Промывают водой.
- Окрашивают карболовым фуксином Циля, разведенным 1:3, в течение 3 – 5 мин.
- Препарат промывают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсионной системой.
При микроскопировании на темном фоне
препарата контрастно выделяются
неокрашенные капсулы, внутри которых
находятся бактерии ярко-малинового цвета.
Окраска по методу Бурри для
выявления капсул
На узкий конец предметного
стекла наносят каплю туши в петлю
исследуемого материала. Смесь перемешивают
тщательно петлей, делают мазок, как
мазок из крови, высушивают на воздухе
и, не фиксируя, микроскопируют с иммерсионной
системой. Фон препарата окрашен в темно-дымчатый
цвет, микробные тела и их капсулы не окрашиваются
тушью и остаются бесцветными, вследствие
чего этот способ получил название негативного.
Окраска бактерий
в гистологических срезах по Граму-Вейгерту
- Депарафинированные срезы доводят до воды.
- Окрашивают 20 мин в 1 % растворе парарозанилина или основного фуксина в 1 % уксусной кислоте (раствор красителя нагревают до кипения, охлаждают и фильтруют).
- Промывают в 3 сменах дистиллированной воды.
- Окрашивают 5 мин в 1 % кристаллического фиолетового в дистиллированной воде.
- Быстро ополаскивают в 1 % растворе хлорида натрия.
- Обрабатывают 30 с в смеси: 1 часть йода + 2 части йодида калия + 100 частей дистиллированной воды.
- Промокают фильтровальной бумагой.
- Дифференцируют, нанося на срез смесь равных объемов анилина и ксилола (1 — 2 мл); растворы сливают до тех пор, пока облачка красителя не перестанут отходить от среза.
- Проводят через 3 смены ксилола.
- Заключают в бальзам или любую смолу, растворенную в ксилоле.
Результат: грамположительные бактерии
сине-черные, фибрин фиолетовый, ядра красные.