Растения тропиков и субтропиков на территории России.Эвкалипты

Качество сырья листья эвкалипта  прутовидного регламентирует 15 статья Государственной Фармакопеи XI издания, выпуск 2.

 

 

 

3.2. Характеристика подлинности  сырья по внешним признакам  и микроскопии.

Методы анализа.

Листья эвкалипта прутовидного – Folia Eucalupti viminalis.

Внешние признаки. Смесь двух типов листьев: листья старых ветвей - черешковые от узколанцентных до серповидно-изогнутых, остроконечные, плотные, длиной 4-27 см, шириной 0,5-5 см; листья молодых ветвей - сидячие с округлым основанием или с короткими черешками, удлиненно-яйцевидной формы, на верхушке заостренные, длиной 3,5-11 см, шириной 0,7-4 см. Встречаются листья, имеющие переходящую форму от удлиненно-яйцевидной до ланцетной. Листья голые с цельным, ровным или волнистым краем с многочисленными точками, просвечивающимися в проходящем ярком свете (вместилища с эфирным маслом). Цвет листьев от светло-зеленого до серовато-зеленого иногда с фиолетовым оттенком и слабым сизоватым налетом. Запах ароматный, усиливающийся при растирании. Вкус пряно-горький.

Микроскопия листа эвкалипта прутовидного (поперечный срез): 
1 – эпидермис; 2 – палисадная ткань; 3 – губчатая ткань; 4 – проводящий пучок; 5 – колленхима; 6 – устьице; 7 – эфирномасличное вместилище; 8 – пробковое пятно.

Под фармакогностическим анализом имеется в виду комплекс методов анализа сырья растительного и животного происхождения, позволяющих определить подлинность и доброкачественность. 
Подлинность — это соответствие исследуемого объекта наименованию, под которым он поступил на анализ. 
Доброкачественность — соответствие лекарственного сырья требованиям НД.

 

  Макроскопический анализ сырья - ставит своей целью определение подлинности лекарственного растительного сырья по внешним и морфологическим признакам (форма, размер, цвет, вкус, запах и т.д.).

Анализ листьев листьев эвкалипта:

Во время сушки эти листья не изменяют форму и размеры, поэтому  в сухом виде листья в количестве 5-10 штук раскладывают на листе чистой бумаги и проверяют:

обращают внимание на форму и  размеры листовой пластинки и черешка, отмечают опушение, характер края листа и жилкование, наличие эфирномасличных железок и других образований на поверхности листа или наличие вместилищ в мезофилле (лупа 10Х).Размеры — длину и ширину пластинки листа, длину и диаметр черешка — определяют с помощью измерительной линейки. Цвет листа определяют на сухом сырье с обеих сторон листа при дневном освещении, запах определяют при растирании листа. Вкус определяют, пробуя кусочек сухого сырья или его отвар (только у неядовитых объектов).

 

Микроскопический анализ – основывается на глубоком знании анатомической структуры растений и заключается в том, чтобы в общей картине анатомического строения различных органов и тканей отыскать характерные диагностические признаки, по которым изучаемый объект можно отличить от анатомических частей другого растения.

Из листьев эвкалипта готовят поперечный срез листа в растворе хлоралгидрата. Для окраски эфирного масла и кутикулы препарат готовят в Судане III. 
Кутикула и эфирное масло окрашиваются Суданом III в оранжево-розовый цвет. Так как лист эвкалипта очень плотный, то сухие листья размачивают в течение суток в глицерине с водой (в спирт не перекладывают — может раствориться эфирное масло) или кипятят в хлоралгидрате. Далее вырезают ножницами или скальпелем кусок листа (с краю или около средней жилки) размером 1 см, выравнивают его, чтобы срезы были правильно поперечные, а не косые. Вырезанный кусок листа складывают по жилке (пополам) и вставляют в пробку или в сердцевину бузины. Срезы из листа эвкалипта получаются широкие, их легко рассматривать при малом увеличении, и только часть эпидермы с кутикулой и вместилищем — при большом увеличении. На поперечном срезе хорошо заметны с обеих сторон листа кутикула и клетки эпидермы. У старых листьев слой кутикулы более толстый. У эвкалипта шарикового поверхность кутикулы ровная или слегка волнистая; у эвкалипта пепельного — бугорчатая, хорошо заметная у старых листьев. Лист имеет изолатеральное строение: палисадная ткань с обеих сторон листа расположена в 3—4 ряда у старых листьев, и в 1—2 ряда у молодых листьев. Губчатая ткань в центре листа, ее клетки овальной или продолговатой формы, лежат рыхло, их много в молодых листьях и значительно меньше в старых, они слабо заметны. В паренхиме мезофилла встречаются друзы оксалата кальция и одиночные кристаллы призматические. В молодых листьях друз мало, преимущественно встречаются сферокристаллы; в мякоти листа — вместилища с эфирным маслом, крупные, округлые или овальные, схизолизигенного происхождения. Эфирное масло накапливается в полости вместилища; иногда удается видеть в препаратах, как скопившееся масло разрывает стенки вместилища и вытекает наружу. Внутри вместилища заметно несколько слоев выделительных клеток. Расположены вместилища чаще под эпидермой вблизи поверхности листа. Жилка с кристаллоносной обкладкой из призматических кристаллов (диагностический признак). В молодых листьях они выражены слабо.

 

 

 

 

3.3 Характеристика норм  качества (числовые показатели, методики  их определения).

 

Числовой показатель	Характерис- тика	Методика определения
Эфирного масла	Не менее 1%	Перегонка с водяным паром из растительного сырья с последующим  измерением объема (1 или2 метод)
Влажность	Не более 14%	В ГФ XI (вып. 1, с. 285) для определения  влажности в лекарственном растительном сырье принят метод высушивания до постоянной массы при температуре 100-105 °С. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц около 10 мм, перемешивают и берут две навески массой 3-5 г, взвешенные с погрешностью ±0,01 г. Каждую навеску помещают в предварительно высушенный и взвешенный вместе с крышкой бюкс и ставят в нагретый до 100-105 °С сушильный шкаф. Время высушивания отсчитывают с того момента, когда температура в сушильном шкафу вновь достигнет 100-105 °С. Первое взвешивание листьев, трав и цветков проводят через 2 ч, корней, корневищ, коры, плодов, семян и других видов сырья — через 3 ч.  Высушивание проводят до постоянной массы. Постоянная масса считается достигнутой, если разница между двумя последующими взвешиваниями после 30 мин высушивания и 30 мин охлаждения в эксикаторе не превышает 0,01 г.  Определение потери в массе при высушивании для пересчёта количества действующих веществ и золы на абсолютно сухое сырьё («абсолютная влажность») проводят в навесках 1-2 г (точная навеска), взятых из аналитической пробы, предназначенной для определения золы и действующих веществ, вышеописанным методом, но при разнице между взвешиваниями, не превышающей 0,0005 г.  Влажность сырья (X) в процентах вычисляют по формуле:      где m — масса сырья до высушивания, г; m1 — масса сырья после высушивания, г.  За окончательный результат определения принимают среднее арифметическое двух параллельных определений, вычисленных до десятых долей процентов. Допускаемое расхождение между результатами двух параллельных определений не должно превышать 0,5 %.
Золы общей	Не более 5%	Около 3-5 г измельчённого лекарственного растительного сырья (точная навеска) помещают в предварительно прокалённый и точно взвешенный фарфоровый, кварцевый или платиновый тигель, равномерно распределяя сырьё по дну тигля. Затем тигель осторожно нагревают, давая сначала сырью сгореть при возможно более низкой температуре. Сжигание оставшихся частиц угля надо тоже вести при возможно более низкой температуре; после того как уголь сгорит почти полностью, увеличивают пламя.  При неполном сгорании частиц угля остаток охлаждают, смачивают водой или насыщенным раствором аммония нитрата, выпаривают на водяной бане и остаток прокаливают. В случае необходимости такую операцию повторяют несколько раз.  Прокаливание ведут при слабом красном калении (около 500 °С) до постоянной массы, избегая сплавления золы и спекания её со стенками тигля. По окончании прокаливания тигель охлаждают в эксикаторе и взвешивают
Почерневших и побуревших листьев	Не более 3%	Оставшуюся часть аналитической  пробы после отсева измельчённых частиц (для цельного сырья) или сход с верхнего сита (для измельчённого, дробленого сырья) помещают на чистую гладкую поверхность и лопаточкой или пинцетом выделяют примеси, указанные в НД на лекарственное растительное сырьё. Обычно к примесям относят:  -части сырья, утратившие окраску, присущую данному виду (побуревшие, почерневшие, выцветшие и т.д.);  -другие части этого растения, не соответствующие описанию сырья;  -органическую примесь (части других неядовитых растений);  -минеральную примесь (земля, песок, камешки).  Одновременно обращают внимание на наличие амбарных вредителей.  Каждый вид примеси взвешивают отдельно с той же погрешностью, как и при определении измельчённости. Содержание каждого вида примеси (X) в процентах вычисляют по формуле:    где m1 — масса примеси, г; m2 — масса аналитической пробы сырья, г.
Других частей эвкалипта (веточек, бутонов, плодов)	Не более 2%
Органической примеси	Не более 0,5%
Минеральной примеси	Не более 0,5%

 

Сердцевидных или яйцевидных молодых листьев не должно быть.

 

 

 

 

4.Характеристика химического  состава сырья.

4.1. Группа БАВ + формулы  основных действующих веществ.

Листья эвкалипта содержат до 2% эфирного масла, большое количество макро- и микроэлементов (кальций, калий, магний, железо, марганец, медь, кобальт, кремний, никель, бор и др.). Эфирное масло эвкалипта содержит до 80% цинеола(основной компонет,относится к моноциклическим монотерпенам), эвкалиптол, пинен, смолы, горечи, дубильные вещества, альдегиды, кетоны, терпеновые соединения, карбониловые соединения и спирты.

   1,8-цинеол                    

 

4.2. Характеристика существующих  методов качественного анализа.

 

1.С реактивом Судан III – оранжево-красное окрашивание.

 

2.ТСХ

На пластинку «Silufol» 5х15, на стартовую линию, находящуюся на расстоянии 1,5 см от нижнего края, наносят микропипеткой 0,04 мл раствора эфирного масла эвкалипта и спиртовой раствор циенола, как свидетель. Расстояние от бокового края 1,5см. Диаметр пятен не должен превышать 5мм. После высушивания пластинку помещают в хроматографическую камеру, в которую предварительно (за 30 мин) налита система гексан-эфир (8:2). Хроматографируют восходящим способом: время экспозиции – 30 мин. После тщательного высушивания, хроматограмму обрабатывают (опрыскивают из пульверизатора) 1% раствором n-диметиламинобензальдегида в 75% серной кислоте. На хроматограмме должно проявляться не менее 4 пятен. Зоны адсорбции розового, коричневого и коричневого с серым цвета.

 

 

 

3.ГЖХ

Для анализа использовали газовый хроматограф «Хром-5» с пламенно-ионизационым детектором.

Колонка стеклянная 3м х 0,3см, наполненная  интертоном-супер с размером частиц 0,125-0,160 мм с 3% SE-30.

Температура испарителя и детектора  – 250 С.

Температура колонки программировалась  линейно 75-220 С со скоростью 4град/мин.

Расход газа – носителя(гелия) 30мл/мин.

Расход воздуха 300 мл/мин, расход водорода – 30 мл/мин.

Чувствительность усилителя 3,84 * 10 в -9.

 

 

4.3 Характеристика методов  количественного анализа.

Определение количественного содержания эфирного масла в сырье определяют при приемке сырья и в процессе его хранения.

По ГФ-Х1, вып.1, стр.290-294 определение  содержания эфирного масла проводят путем его перегонки (гидродистилляции) с водяным паром из лекарственного сырья. Содержание масла выражают в объемно-весовых процентах в пересчете на абсолютно сухое сырье.

Массу навески, время перегонки  и процентное содержание масла в  сырье регламентирует частная нормативная  документация на конкретные виды сырья.

Метод количественного определения содержания эфирного масла в растительном сырье основан на:

- физических свойствах эфирного  масла - летучести и практической  нерастворимости в воде;

- на отсутствии  химического  взаимодействия эфирного масла  и воды;

- на законе Дальтона о парциальных  давлениях. Согласно закону, смесь жидкостей закипает тогда, когда сумма их парциальных давлений достигает атмосферного давления. Следовательно, давление паров смеси жидкостей (вода + эфирное масло) достигнет атмосферного давления еще до кипения воды.

 

Метод 1. 
Для определения эфирного масла используют прибор, изображенный на рисунке. Навеску измельченного сырья помещают в широкогорлую круглодонную или плоскодонную колбу а вместимостью 1000 мл, приливают 300 мл воды и закрывают резиновой пробкой б с обратным шариковым холодильником в. В пробке снизу укрепляют металлические крючки, на которые при помощи тонкой проволоки подвешивают градуированный приемник г так, чтобы конец холодильника находился над воронкообразным расширением приемника, не касаясь его. Приемник должен свободно помещаться в горле колбы, не касаясь стенок, и отстоять от уровня воды не менее чем на 50 мм. Цена деления градуированной части приемника 0,025 мл. 
Колбу с содержимым нагревают и кипятят в течение времени, указанного в соответствующей нормативно-технической документации на лекарственное растительное сырье. 
Объем масла в градуированной части приемника замеряют после окончания перегонки и охлаждения прибора до комнатной температуры. 
 

После 6—8 определений холодильник  и градуированный приемник необходимо промыть последовательно ацетоном и водой. 
Содержание эфирного масла вычисляют в объемно-весовых процентах в пересчете на абсолютно сухое сырье 
 
 
 
 
Прибор для определения содержания эфирного масла методом 1. 
 
а — широкогорлая круглодонная или плоскодонная колба;

б — резиновая пробка;

в — обратный шариковый холодильник;

 г — градуированный приемник. 
 

Метод 2. Для определения эфирного масла используют прибор, изображенный на рисунке 
 
 
 
 
Прибор для определения содержания эфирного масла методами 2 и 3. 
 
а — круглодонная колба; б — паропроводная изогнутая трубка: в — холодильник; 
 
г — градуированная трубка приемника; 
 
д — спускной кран; е — сливная трубка; 
 
ж — расширение; з — боковая трубка; и — резиновая трубка;к — воронка.

 

 

 
 
Прибор для определения эфирного масла состоит из круглодонной колбы а вместимостью 1000 мл, паропроводной изогнутой трубки б, холодильника в,' градуированной трубки приемника г, оканчивающейся внизу спускным краном д и сливной трубкой е.

В верхней части приемника имеется  расширение ж с боковой трубкой з, которая служит для внесения растворителя эфирного масла в дистиллят и сообщения внутренней части прибора с атмосферой. Колба и паропроводная трубка соединяются через нормальный шлиф. Градуированная трубка имеет цену деления 0,02 мл. Для заполнения прибора водой используется резиновая трубка и с внутренним диаметром 4,5—5 мм, длиной 450 мм и воронка к диаметром .30—40 мм. 
Перед каждым определением через прибор пропускают пар в течение 15—20 мин. После 6—8 определений прибор необходимо промыть последовательно ацетоном и водой. 
Примечание. Допускается применение такого же разборного прибора, у которого паропроводная трубка б сочленена с холодильником через нормальный шлиф, а сливная трубка е заменена каучуковой. 
Навеску измельченного сырья помещают в колбу, приливают 300 мл воды, колбу соединяют с паропроводной трубкой и заполняют водой градуированную и сливную трубки через кран при помощи резиновой трубки, оканчивающейся воронкой. Колбу с содержимым нагревают и кипятят с интенсивностью, при которой скорость отекания дистиллята составляет 60—65 капель в 1 мин в течение времени, указанного в соответствующей нормативно-технической документации на лекарственное растительное сырье. 
Через 5 мин после окончания перегонки открывают кран, постепенно спуская дистиллят так, чтобы эфирное масло заняло градуированную часть трубки приемника, и еще через 5 мин замеряют объем эфирного масла. 
Содержание эфирного масла в объемно-весовых процентах в пересчете на абсолютно сухое сырье.

 

 

5.Применение в медицине  сырья и препаратов. Фармакологическая  группа. Лекарственные формы и  препараты. 

 

Эвкалипта прутовидного листья

Настой листьев эвкалипта прутовидного оказывает противомикробное, противовоспалительное действие.

Фармакологическая группа: антисептическое средство растительного происхождения..

Показания к применению: В составе комплексной терапии инфекционно-воспалительных заболеваний глотки и верхних дыхательных путей (фарингит, ларингит, трахеит).

 

Листья эвкалипа прутовидного входят в состав сбора «Элекасол»

Отвар сбора обладает антимикробной  активностью в отношении стафилококка, кишечной палочки, синегнойной палочки, протея и некоторых других микроорганизмов; оказывает противовоспалительное действие и стимулирует репаративные процессы.

Фармакотерапевтическая  группа: Противомикробное средство растительного происхождения.

 

 

 

 

 

Показания к применению: В составе комплексной терапии:

-заболеваний дыхательных путей и ЛОР-органов (хронический тонзиллит, острый ларингофарингит, острый и хронический фарингит, трахеит, бронхит);