Лигулидозы

Патогенез и патолого-анатомические  изменения. Поселяясь в брюшной полости рыб, плероцеркоиды достигают больших размеров, тем самым сдавливая внутренние органы и нарушая их функции. Вследствие постоянного давления печень, селезенка, половые железы постепенно атрофируются, в связи с чем нарушаются или резко тормозятся обменные процессы в организме. Зараженная рыба хуже питается, отстает в развитии, сильно истощается, и вес ее снижается. Внутренние органы больных рыб выглядят недоразвитыми, а вес их бывает в 2-3 раза меньше, чем у незараженных рыб. Происходит атрофия половых желез, и рыба становится бесплодной. Все это снижает возможность воспроизводства стада и общую рыбопродуктивность водоема. Одновременно с механическим воздействием на внутренние органы гельминты вызывают интоксикацию организма хозяина продуктами своих выделений, в результате чего изменяются гематологические показатели: содержание гемоглобина снижается на 20-25% против нормы; изменяется лейкоцитарный профиль: в 2-3 раза увеличивается количество полиморфно-ядерных клеток и нейтрофилов, в 1,5-2 раза ускоряется РОЭ[6].

Диагноз устанавливают путем  вскрытия рыбы и обнаружения в  брюшной полости плероцеркоидов ремнецов. Затем определяют их видовую  принадлежность[6].

Меры борьбы и  профилактика. Для борьбы с лигулидозами проводят комплекс мероприятий, основанный на особенностях биологии паразита, эпизоотологических закономерностях заболевания и специфике рыборазведения, принятой для прудового хозяйства или естественного водоема. Профилактика лигулидозов в прудовых хозяйствах сводится к отпугиванию рыбоядных птиц на территории хозяйства: нужно следить, чтобы вблизи рыбоводных прудов не было гнездований рыбоядных птиц. Если в прудах обнаружено заболевание, то всю рыбу вылавливают и спускают воду. Вместе с рыбой удаляется гельминт в стадии плероцеркоида, а с водой уносятся инвазированные промежуточные хозяева. Для полного уничтожения инвазированных рачков в зимнее время пруды содержат без воды. Все увлажненные места, ямы, русло реки, бочаги подвергают дезинфекции негашеной известью из расчета 25 ц на гектар. Ложе прудов весной просушивают и подвергают перепашке. Борьба с лигулидозами в крупных водоемах, озерах, лиманах и водохранилищах довольно сложна. Однако, осуществляя последовательно целый ряд мероприятий, можно добиться значительного снижения зараженности рыб. Суть этих мероприятий сводится к следующему. Чтобы не допускать большой численности колоний рыбоядных птиц, их отпугивают холостыми выстрелами; чтобы птицы не гнездились на водоемах, производят выкашивание жесткой надводной растительности. Организуют отлов пораженной рыбы в местах ее скопления. С учетом заражаемости разных видов рыб ремнецами заселяют водоем видами рыб, невосприимчивыми к этой инвазии: сазаном, судаком, щукой, сиговыми. Ихтиологи Урала и Башкирии целенаправленно изменяют видовой состав ихтиофауны озер и водохранилищ, в течение ряда лет успешно разводя сиговых рыб, которые, как известно, не болеют лигулезом. В водоемах этой зоны за последние годы значительно сократилась заболеваемость рыб лигулидозами. Проводится усиленный отлов малоценных рыб как наиболее восприимчивых к заболеванию лигулидозами и являющихся источником массового заражения рыбоядных птиц. Численность мирных и хищных рыб в водоеме должна строго регулироваться путем отлова, благодаря чему снижается степень зараженности рыб. Уменьшение численности зараженных рыб достигается также применением электролова. Одним из важнейших звеньев комплексной системы мер борьбы с лигулидозами в естественных водоемах является проведение систематических исследований рыб с целью установления степени зараженности разных видов рыб различных возрастных групп по сезонам года. С учетом этих данных и осуществляются мероприятия по отлову больных рыб и направленному изменению ихтиофауны[7].

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

4. Диграммоз

Возбудителем этого заболевания рыб, аналогичного лигулезу, является другой вид ремнецов из рода Digramma - D. interrupta. По своим морфологическим признакам диграмма несколько отличается от Ligula intestinalis: на вентральной стороне поверхности стробилы имеются две продольные бороздки (места расположения отверстий половых комплексов). У половозрелых червей ложная членистость переднего конца тела выражена нечетко, а число ложных члеников может достигать 25-40.

Цикл развития протекает как и у лигулы. Взрослые стадии гельминта развиваются в кишечнике рыбоядных птиц, преимущественно чайковых: плероцеркоиды - в брюшной полости леща, карася, гольяна, язя, пестрого толстолобика и белого амура. Процеркоиды развиваются в полости тела веслоногих рачков: Cyclops strvnuus, Acanthocyclops viridis, Eucyclops serrulatus, Diaptomus gracilis.

Эпизоотология. Заболевание чаще отмечается в водоемах средней и южной части России, где пораженность леща иногда достигает 37-48%. Цимлянское водохранилище особенно неблагополучно по диграммозу леща. Весной, в преднерестовый период, отмечаются большие скопления инвазированного леща у прибрежных зон, на мелководье. Пораженные рыбы чаще выявляются в трех- и четырехлетнем возрасте. Среди лещей старших возрастных групп процент больных рыб бывает незначительным. Белый амур и пестрый толстолобик могут поражаться одновременно D. interrupta и L. intestinalis. Заражение преимущественно происходит в весенне-летний период.

 

Пути и источники  распространения заболевания, клинические признаки и течение, патогенез и патологоанатомические изменения у рыб такие же, как и при лигулезе.

Диагноз заболевания устанавливают по клиническим признакам и путем вскрытия инвазированных рыб и установления видовой принадлежности возбудителя. Меры борьбы как и при лигулезе[8].

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

5. Шистоцефалез

Возбудителем этого заболевания, аналогичного лигулезу, является ремнец Schistocephalus solidus из рода Schistocephalus, поражающий преимущественно трехиглых колюшек. 
Возбудитель. Ремнец белого или слегка желтоватого цвета длиной 20-45 мм, шириной 6-9 мм. Стробила удлиненно-овальная, несколько суживающаяся к заднему концу. Выражено наружное расчленение. Половые комплексы располагаются в один продольный ряд (см.рис.19): половые отверстия находятся на вентральной поверхности членика и имеется одна бороздка. Из этого рода у рыб встречаются ремнецы других видов. Так, у девятииглой колюшки паразитирует Sch. pungitii, а у гольцов - Sch. nemachili. По своим морфологическим признакам последние два вида имеют сходство с первым. 
Цикл развития. Шистоцефалюсы достигают половой зрелости, как и лигулы, в кишечнике рыбоядных птиц (окончательных хозяев). Яйца гельминта попадают в воду, где из них выходят корацидии. Этих личинок поедают циклопы (первый промежуточный хозяин), и в полости их тела развивается первая личиночная стадия гельминта - процеркоид. Инвазированных циклопов поедают трехиглые колюшки. Процеркоид, попав в кишечник рыбы, пробуравливает кишечную стенку и поселяется в полости тела, где растет до второй личиночной стадии - плероцеркоида. Колюшка является вторым промежуточным хозяином для этого гельминта (дополнительным). Рыбоядные птицы, поедая колюшек, инвазируются, и в их кишечнике процеркоид лигулиды превращается в половозрелую стадию. 
Клиника и патогенез. Отмечается вздутие брюшка, плавание особей колюшки в поверхностном слое воды. При вскрытии полости тела видны плероцеркоиды, занимающие всю брюшную полость. Внутренние органы сильно сжаты, особенно печень и почки, сдавливается также плавательный пузырь, что влияет на способность нормального перемещения рыбы в воде. Отмечается срастание органов с брюшиной. Мероприятия по борьбе с шистоцефалезом проводятся путем снижения численности рыбоядных птиц на водоемах, а также путем отлова инвазированных рыб, благодаря чему снижается возможность заражения рыбоядных птиц. Ведется массовый отлов колюшки как сорной рыбы[9].

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

6. Собственные исследования

ОАО "Печенежское рыбоводное хозяйство", занимается уловом товарной рыбы из Печенежского водохранилища, выращиванием товарной рыбы в нагульных прудах и промышленной переработкой рыбопродукции[12].

Для анализа использовали не менее 50 экземпляров рыб каждого  вида по отлову. Исследование рыб проводили  методом неполного Гельминтологического сечения, разработанным Скрябиным К.И.  и модифицированным Догелем В.А.  и Маркевичем А.П.  Особенности течения эпизоотического процесса при лигулидозах рыб в водоемах с различными гидробиологическим режимами оценивали по показателям экстенсивности и интенсивности инвазии, видом, возрастом, линейным размерам, коэффициентам упитанности больной и здоровой рыбы. Возраст рыб определяли путем подсчета годовых колец на чешуе. Линейный размер измеряли от вершины рыла до конца чешуйчатого покрова. Жирность устанавливали по шкале, разработанной Прозоровским Н. Л. Коэффициент упитанности определяли по формуле Кларка. Исследование факторов передачи лигулидозных инвазий у рыб проводили на Печенежском водохранилище. Исследование птиц осуществляли методом неполного Гельминтологического сечения по Скрябину К. И. При этом, определяли вид птицы, Е И и И И возбудителями лигулидозов. Всего было исследовано 27 птиц четырех видов. Отбор образцов зоопланктона проводили по общепринятым методикам с использованием стандартной сетки Джеди. Для оценки численности зоопланктона пользовались счетно-весовым методом, при этом в камере Богорова подсчитывали особей каждого вида. Влияние лигулидозных инвазий на гематологические и биохимические показатели крови рыб изучали путем отбора проб крови от спонтанно инвазированных и свободных от инвазии рыб из одного вылова. Кровь забирали пастеровской пипеткой из хвостовой артерии рыб. Определение содержания общего гемоглобина и его форм проводили гемоглобин-цианидный методом. Эритроциты подсчитывали путем исследования крови по фотоэлектроколориметричним методом с использованием калиброванных графиков. Лейкоциты подсчитывали по унифицированным методам в камере Горяева; лейкограмму выводили по унифицированным методам морфологического исследования форменных элементов крови с дифференциальным подсчетом лейкоцитов. Белок общий определяли биуретовой реакцией, белковые фракции (альбумины и α-, β-, γ-глобулины) Нефелометрическим методом, серомукоиды - по методике Веймера и Мошина  циркулируя иммунные комплексы (ЦИК) - методом Гриневича и Алферовой. Для определения влияния абиотических и биотических факторов, обусловливающих изменение поведения инвазированных возбудителями лигулидозов рыб, ежемесячно, в течение года, на Печенежском водохранилище определяли температуру воды и распределение содержания кислорода по вертикали (в разных слоях воды) с помощью портативного оксиметра. У инвазированных лигулидами рыб устанавливали показатель паразитического индекса, который был предложен R. J. Wyatt и C. R. Kennedy . 
          С целью изучения биологических особенностей развития лигулид было проведено пять опытов по воспроизводству жизненного цикла возбудителей лигулидозов. Отработку лабораторной модели проводили на утках серой украинской породы, веслоногих ракообразных Acanthocyclops americanus, белых амурах[11].

Для изучения динамики выделения яиц зрелыми гельминтами D. interrupta и L. intestinalis, проводили экспериментальное заражение уток  плероцеркоидами лигулид различной массы: 22-25 г, 8-10 г, 3 г. Кал от уток отбирали каждые 4 часа, начиная с 46 часов после заражения. Копроовоскопические исследования проводили по специально разработанным способом  путем седиментации при центрифугировании с последующей Микроскопией осадка. 
Для изучения сроков эмбрионального созревания яиц гельминтов D. interrupta и L. иntestinalis, культуру яиц гельминтов выдерживали при различных температурных режимах: 4-6 ° С, 9-11 ° С, 14-16 ° С, 19-21 ° С, 14-26 ° С, 29-31 ° С, 34-36 ° С. Стадии развития яиц и продолжительность жизни корацидий контролировали при микроскопических исследованиях.

Развитие и созревание плероцеркоид лигулид в дополнительных хозяевах изучали при экспериментальном заражении 36 экземпляров сеголеток белого амура и пестрого толстолобика возбудителями лигулидозов путем задания инвазированных ракообразных Acanthocyclops americanus (Monch.). Рыб содержали в аквариумах объемом 200 дм3 при температуре 18-22 ° С. Циклопов вводили per os, индивидуально, с помощью пластикового катетера в количестве 10-15 экземпляров на особь рыб. Рыбам контрольной группы вводили неинвазованих циклопов.

Паразитологическое сечение экспериментально инвазированных рыб проводили через семь, пятнадцать и тридцать суток с момента заражения. 
Установка сроков достижения плероцеркоидами лигулид инвазионной стадии в организме рыб проводили на утках, экспериментально зараженных ремешками L. intestinalis, полученных при паразитологическом вскрытии белых амуров пятимесячного возраста. Полученные плероцеркоиды L. иntestinalis относились к генерации возбудителей возрастом не более четырех месяцев.

Изучение эффективности  ранней дегельминтизации рыб, экспериментально зараженных лигулами, проводили в лабораторных условиях на белых амурах. Заражение рыб осуществляли по вышеприведенной методике. Были сформированы пять групп амуров по десять особей в каждой. Первая группа - контрольная. Рыбам исследовательских групп задавали альбендазол (100% ДР): второй и третьей группе в дозе 30,0 мг / кг массы тела рыб, четвертой и пятой - 50,0 мг / кг. Препарат вводили в составе 2%-ного крахмального клейстера, per os, индивидуально, с помощью пластикового катетера через 15 суток после заражения рыбам второй и четвертой опытных групп, через 30 суток - рыбам третьей и пятой групп. Амурам контрольной группы задавали 2%-ный крахмальный клейстер без препарата. Контрольно диагностическое вскрытие рыб проводили через 45 суток после заражения. 
Опыт по испытанию терапевтической эффективности альбендазола при лигулидозах рыб в производственных условиях проводили в двух изолированных нерестово-мальковых прудах Печенежского рыбхоза. Рыбам исследовательской ставки трижды с интервалом в один месяц скармливали комбикорм, содержащий 0,1% ДР альбендазола, из расчета 50,0 мг ОР на кг массы рыб. Рыбам контрольной ставки давали обычный комбикорм. Через месяц после последней дачи препарата были проведены паразитологические исследования рыб исследовательского и контрольного прудов. 
Математически-статистическую обработку результатов проводили на ПЭВМ IBM PS с помощью программы "Statistica" для Windows. Оценку достоверности определяли по показателям Т-критериев Стьюдента.

 

 

 

 

7. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 
   

В своей области Печенежское водохранилище является стационарным эпизоотическим центром лигулидозных инвазий для других водоемов области. 
В настоящее время течение эпизоотии лигулидозов рыб на Печенежском водохранилище находится на стадии развития. Плероцеркоид L. intestinalis проявляли у леща, густеры, плотвы и уклейки, а D. interrupta - только у леща. Экстенсивность инвазии рыб осенью колебалась от 61,0% до 75,0%. Возбудители лигулидозов были зарегистрированы у рыб прудового хозяйства ОАО "Печенежский рыбхоз": у белого амура - L. intestinalis (Е И - 26,1%), у пестрого толстолобика - L. intestinalis и D. interrupta (Е И - 18,2%)[10].

Течению эпизоотического процесса при лигулидозах были свойственны сезонные изменения экстенсивности и интенсивности инвазии рыб на исследуемых водоемах. Так, на Печенежском водохранилище летом Е И леща лигулидами составляла 21,4%, осенью этот показатель резко увеличивался до 71,4%. В течение зимнего периода Е И рыб уменьшалась до 45,9%, и приобретала наименьшего значения весной - 25,8%.

При изучении сроков инвазирования рыб возбудителями лигулидозов было установлено, что на Печенежском водохранилище заражения рыб происходило с июля по октябрь. На Печенежском водохранилище заражались лещи от двухлетнего до пятилетнего возраста. Чаще наблюдали инвазирование рыб трехлетнего и четырехлетнего возраста (Е И - 10,1% и 4,2%). В лещей от трехлетнего до пятилетнего возраста, уже были инвазированны плероцеркоиды лигулид в прошлых годах, регистрировали повторное заражение лигулидамы. Рыбы шестилетнего возраста ремешками не заражались, а были инвазированны только старшими поколениями ремешков в результате заражения в прошлые годы.

Решающую роль в поддержании очагов лигулидозных инвазий играли дефинитивные и первые промежуточные хозяева. На Печенежском водохранилище численные колонии обычных и серебристых чаек, речных крачков располагались на территории ОАО "Печенежского рыбоводческого хозяйства". Осенью, Е И обычных и серебристых чаек ремешками L. intestinalis и D. иnterrupta составила 80,0% и 60,0%, соответственно, при I и до семи гельминтов на птицу. Е И речного крачка ремешками L. intestinalis составила 40,0%, при I И двух гельминтов. При изучении видового состава зоопланктона на Печенежском водохранилище было обнаружено девять видов ракообразных ряда Copepoda, шесть из которых могут быть потенциальными первыми промежуточными хозяевами в цикле развития лигулид: Acanthocyclops americanus, A. vernalis, Mesocyclops leuckarti, Thermocyclops oithonoides, Eudiaptomus gracilis, E. graciloides. Осенью процент биомассы этих видов копепод от общей биомассы ракообразных ряда Copepoda составлял до 77,7%, а от общей биомассы всех ракообразных (Crustacea) - 30,9%.