Болезнь Тешена

План:

Введение.................................................................................3

 

Клинические признаки и патологоанатомические  изменения................3

 

Патогенез.................................................................................6

 

Характеристика возбудителя.........................................................6

 

Эпизоотические особенности........................................................9 

 

Диагностика..............................................................................10

 

Иммунитет и специфическая  профилактика.......................................11

 

Список используемой литературы...............................................11

 

 

 

 

БОЛЕЗНЬ ТЕШЕНА

 

Введение

 

Болезнь Тешена - вирусная болезнь  свиней, характеризующаяся развитием  негнойного энцефаломиелита и появлением параличей. Болезнь проявляется  клиническими признакам, поражения  центральной нервной системы (мышечный тремор, нистагм, опистотонус, тонико-клонические  судороги, "ходульная походка", параличи конечностей мышц шеи, глотки). Очень часто данную болезнь свиней описывали под различными самостоятельными названиями: полиомиелит лошадей, болезнь Талфана, энцефаломиелит поросят, болезнь Клобука и др. Болезнь Талфана была описана Хардингом (1958) в Англии как полиэнцефалит, поражающий молодых поросят.

 

Болезнь Тешена впервые диагностировал Трефни (1930, 1931) в Чехословакии, в  округе Тешен. Основательно её изучил Клобук (1931, 1933). Инфекция быстро распространилась в Чехословакии, проникла в Германию (1940), Австралию (1939), Югославию и Венгрию (1945). В настоящее время она  встречается в Польше, Болгарии, Франции Италии Обнаружение антител  к вирусам группы болезни Тешена - Талфана в сыворотках крови свиней свидетельствует о широком распространении  этих вирусов. В СНГ болезнь впервые  была установлена в хозяйствах Закарпатской области.

 

Клинические признаки и патологоанатомические изменения

 

Инкубационный пе­риод продолжается 1-4 нед. В продромальном периоде, редко превышающем 72 ч, отмечают невысокую  температуру, потерю аппетита, иногда рвоту, острый ринит, расстройство координации движения. Часто эти нарушения остаются незамеченными. Затем появляются клинические признаки поражения ЦНС. При энцефаломиелите наблюдают гиперстезию кожи, судорожные сокращения различных групп мышц, непроизвольные движения, регидность мышц конечностей, нистагм и т. п. Затем развиваются симптомы поражения спинного мозга - шатающаяся напряжённая походка, слабость конечностей, неполное их опирание на  землю, прогрессирующий паралич, постепенно захватывающий конечности, шею и голову. Из-за паралича глотки отмечают частичную или полную утрату голоса. В тяжёлых случаях болезнь обычно заканчивается комой и гибелью животных. При более лёгком течении отмечают затруднённую походку, развитие полупараличей и параличей без явлений возбуждения. Животные, в основном, заражаются алиментарно. Затем вирус репродуцируется в эпителиоцитах слизистой оболочки толстого кишечника, а оттуда проникает в лимфоузлы, кровяное русло и разносится по всему организму, в том числе попадает в ЦНС. Клинически бо­лезнь протекает с явлениями острого энцефаломиелита и менингита, наиболее выражена депрессия, повышенная кожная чувствительность, спастическое состояние губных, глазных и жевательных мышц, а также мышц конечностей, сопровождающееся плавательными дви­жениями; часто наблюдают рвоту, афонию, хрипоту-, косоглазие, скрежетание зубами, за­трудненное жесткое дыхание. После наступления стадии паралича температура тела снижа­ется до нормальной и перед смертью достигает 32-34 °С .

 

Существенные патологоанатомические  изменения находят только в ЦНС. Они характеризуются гиперемией мозговых оболочек и серозной инфильтрацией. На срезах мозга в раз­личных местах отмечают кровоизлияния, периваскулярную круглоклеточную инфильтрацию с образованием очагов нейронофагии, причём поражается лишь серое вещество мозга. В мозжечке изменения обнаруживают в клетках Пуркинье. Наиболее характерные изменения находят в ганглиозных клетках. Поражаются моторные центры вентральных рогов («разжижение» ядер клеток, образование вакуолей, наличие кариорексиса). Значительная нейронофагия преобладает в вентральных рогах поясничной области спинного мозга. Диагностическую ценность представляют гистологические изменения. Они наиболее выражены в средней и каудальной частях головного мозга (особенно на его основании - ножках мозга и четверохолмии), а также в шейной и поясничной частях спинного мозга.

 

При патологоанатомическом  исследовании наблюдают гиперемию  мягких оболочек, явления отека серого вещества (преимущественно ромбовидного и среднего мозга), шейного и поясничного  утолщений спинного мозга, катаральный  ринит, бронхит и отек легких, точечные и пятнистые кровоизлияния под эпи- и эндокардом. Желудок обычно наполнен кормовыми массами, слизистые его и толстого отдела кишечника складчатые, очагово гиперемированы и покрыты густой прозрачной слизью. Мочевой пузырь всегда переполнен.

 

При микроскопическом исследовании ЦНС всегда определяют негнойный, лимфоцитарного типа полиэнцефаломиелит и менингит. При исследовании животных, павших в первые дни болезни, в сером  веществе головного и спинного мозга наблюдают разные по величине очаговые и диффузные клеточные инфильтраты из глиальных элементов, гистиоцитов и лимфоцитов. Среди клеток инфильтрата иногда обнаруживают небольшие скопления эритроцитов. Полиморфноядерные и нейтрофильные лейкоциты встречаются редко и только у животных, павших (или убитых) в первые часы и дни клинического проявления болезни. Многие клетки инфильтрата находятся в состоянии пикноза и рексиса. В очагах поражения часто регистрируют дезинтеграцию нервной ткани, дистрофические и некробиотические изменения нервных элементов, распад и исчезновение фосфолипидов. По периферии диффузных и крупнофокусных поражений паренхимы отмечают активизацию микроглии, местами - мелкоочаговые скопления мононуклеарных клеток.

 

Электронно-микроскопическим исследованием в клетках инфильтрата установили набухание и дезинтеграцию канальцев гладкой эндоплазматической сети, образование большого количества пузырьков и вакуолей, набухание митохондрий с разным числом фрагментированных крист. При более длительном течении болезни в инфильтратах появляются плазматические клетки, зернистые шары, идет разрастание астроцитарной глии. Для сосудистых нарушений в начале болезни характерно расширение и переполнение капилляров, мелких вен и артерий (эндотелий их набухший с признаками пролиферации). Вокруг сосудов воз­никают клеточные муфты из лимфо- и гистиоцитов, единичных нейтрофильных лейкоцитов а при более продолжительном течении болезни появляются плазматические клетки, и периваскулярные инфильтраты уже приобретают вид обширных муфт. В очагах поражения и вокруг них почти всегда выявляют в той или иной степени выраженные, изменения нервных клеток и волокон. Чаще наблюдают хроматолиз, острое набухание и вакуолизацию нервных клеток, «тяжелое заболевание по Нисслю», кариоцитолиз с явлениями частичного или полного нейрофибролиза и нейронофагии. В ганглиозных клетках с выраженными дистрофическими изменениями в начале болезни отмечают усиление реакции на кислую фосфатазу, тогда как на 5-7-12-е сутки активность последней постепенно падала, одновременно в клетках повышалась интенсивность реакции на щелочную фосфатазу. Содержание гликогена в нейронах было понижено, отмечали также уменьшение или полное исчезновение пиронинофилии в нейроплазме и ядрышке.

 

Установили изменения  в эндоплазматической сети, митохондриях и других ультраструктурах. В некоторых нервных клетках набухание митохондрий и фрагментация их крист были настолько выражены, что они принимали вид крупных прозрачных вакуолей. В от­дельных нейронах, кроме того, часто наблюдали значительный рост числа первичных и вторичных лизосом. Нарушение внутриклеточных мембранных систем коррелировало с на­личием в цитоплазме клеток большого количества вирусных частиц: единичные вирионы (или их небольшие скопления) обнаруживали в перинуклеарном пространстве или в местах его перехода в канальцы гладкой эндоплазматической сети (отдельные вирусные частицы находились внутри пузырьков и вакуолей). В части нейронов отмечали гипертрофию и гиперплазию комплекса Гольджи с вакуолизацией цистерн. В нервных волокнах выявляли набухание, аргентофилию и варикозные утолщения аксонов, местами - фрагментацию и глыбчатый распад. На 5-7 сутки болезни часто встречали дезинтеграцию миелиновых волокон с явлениями демиелинизации.

 

При выздоровлении животных в очагах поражения ЦНС были выражены восстанови­тельные процессы, менялся  состав инфильтрата, количество клеток в нем постепенно уменьшалось, появлялись макрофаги и зернистые шары. Вокруг сосудов скапливалось много плазматических клеток, в последующем и фибробластов. В мягких мозговых оболочках изменения проявлялись циркуляторными нарушениями, разрыхлением и инфильтрацией оболочек круглоклеточными элементами (лимфо- и гистиоцитами, в последующем - плазма­тическими клетками и фибробластами).

 

Патогенез

 

Первичная репродукция вируса отмечается в заглоточных лимфоузлах и кишечнике. Во время болезни  отмечают лейкоцитоз, резко меняется количество клеток в ликворе; уже  на 2-е сутки оно возрастает до 44 (при норме 10-12); на 3-и до 247-395 в 109/л (p<0/001); причем преобладают полиморфные ядерные нейтрофильные лейкоциты и лимфоциты. В 3-4 раза возрастает содержание общего белка спинномозговой жидкости, органического фосфора - в 2-3 раза, что свидетельствует об интенсивной воспалительной реакции в мозговом веществе и оболочках.

 

Характеристика  возбудителя

 

Впервые вирус болезни  Тешена выделил Трефни (1930) в Чехословакии в округе Тешен.

 

Морфология и химический состав. Вирионы сферической формы, диаметр их 25-30 нм. Вирионы безоболочечные, с плавучей плотностью в CsCl 1,34 г/ см3, содержат ядро из 1-нитчатой РНК, окруженное кубическим капсидом. Липопротеины отсутству­ют и вирус устойчив к жирорастворителям.

 

Устойчивость. Вирус устойчив к эфиру, хлороформу и трипсину, не изменяется в ши­роком диапазоне  рН (2,8-9,5). При рН 11,8 инфекционность его  быстро снижается на 50%. Трипсин в  концентрации 125-1250 мкг/мл повышает вирулентность  вируса болезни Тешена в 10 раз и  способствует его реактивации после  тепловой (при 37 и 56°С) обработки. Вирус  выдерживает нагревание при 60°С в  течение 15 мин, но инактивируется за 20 мин. При на­гревании до 70°С теряет активность через 10 минут. После частичной  очистки протамин-сульфатом инактивируется при 50°С за 20 мин. При 37°С вирус может  переживать до 17 дней, но быстро гибнет при развитии гнилостных процессов. Поэтому вируссодержащие ма­териалы следует сразу же консервировать глицерином или р-ром Хенкса с  антибиотиками и ставить в  термос со льдом. Вирус сохраняется  при 4°С и при - 79°С, а также в 50%-ном  глицерине при 0°С до 20 месяцев, в  замороженном виде - годами. Выдерживает  высушива­ние на солнце до 3 нед. В соленых  и копченых продуктах он сохраняется  активным более 3 нед. Вирус нечувствителен к действию пенициллина, стрептомицина, нистатина и быстро инактивируется 0,15%-ным формальдегидом. Размножение  и ЦПД его частично ингибируется 2- (α-гидрокси-бензил) - бензимидозалоном. Из 10 изученных дезинфектантов только гипохлорид натрия и 70%-ный этанол полностью инактивируют вирус Тальфана. Вирус бо­лезни Тешена выживает при 15°С более 168 дней. Оба вируса сохраняются длительный пери­од в жидких материалах, в которых быстрее инактивируются при активной аэрации; инактивация вирусов также быстро происходит под воздействием ионизирующей радиации и в процессе пищеварения.

 

Антигенная активность. В  крови больных и переболевших животных появляются спе­цифические ВНА  и КСА.

 

Антигенная вариабельность и родство. В РН и РСК показано антигенное родство между вирусами болезни Тешена и болезни Талфана. В иммунологическом отношении вирусы болезни Тешена являются единым типом, внутри которого различают два подтипа, в первый входят штаммы Bozen, Konratice, Repo-ryie, во второй - штаммы Tyrol, Sweden Ug, Talfan.

 

Локализация вируса, вирусоносительство и вирусовыделение. В крови и  в органах вирус обнаруживается кратковременно и в небольшом  количестве. Виремию в течение 48 ч отмечают между 4-6 днями после  заражения, титры вируса в крови обычно бывают невысокими. В организме свиней вирус локализуется и размножается в тканях ЖКТ, в которых он появляется через 24-72 ч после заражения и обнаруживается в течение 5-7 недель. Наивысшие титры вируса (106 ТЦД50/г) в пробах фекалий обнаруживают через 9 дней после заражения. В миндалинах, мезентериальных и брыжеечных лимфоузлах вирус появляется через 48 ч после заражения и выявляется в течение 6-8 дней. В головном и спинном мозге он выявляется после виремии. В максимальных титрах ( 1О5,5 - 10 6,6 ТЦД50/г) он содержится там еще до проявления признаков болезни и в течение первых дней паралитической стадии. В наиболее высоких концентрациях вирус содержится в шейном и грудном отделах спинного мозга и в мозжечке, что делает эти ткани наиболее пригодным материалом для выделения вируса. К 5-му дню после появления симптомов болезни содержание вируса в тканях ЦНС снижается, и к моменту гибели животного можно наблюдать так называемую аутостерилизацию. Менее регулярно вирус обнаруживают в секретах и экскретах (носовые истечения), иногда - в кале. 

 

Вирус выделяется во внешнюю  среду, главным образом, в продромальной  стадии и в пер­вые 2 дня болезни.

 

Экспериментальная инфекция. К экспериментальному заражению  восприимчивы по­росята до 1-2 мес  возраста. Поросята 2-нед возраста, не получающие молозиво, переболевают тяжелее, чем поросята 3-нед возраста. Иногда болезнь удается воспроизвести  только у поросят-сосунов 3-5-дневного возраста, не получающих молозива. Экспериментальная  инфекция легче удается при интрацеребральном  или субдуральном введении вируссодержащего мате­риала. Менее эффективно интраназальное или оральное заражение. Иногда практикуют интрацеребральное и интраназальное заражение. Лабораторные животные к  вирусу болезни Тешена - Талфана  и возбудителям других полиэнцефаломиелитов свиней нечувствительны. У экспериментально инфицированных беременных морских  свинок отмечались поражения плаценты. Предполагается, что в беременную матку вирус также проникает  при виремии, поскольку показано инфицирование эмбрионов после  орального или интраназального  инфицирования свиноматок. Даже при  парентеральном инфицировании поросят энтеровирусом он очень быстро обнаруживается в кишечнике. При этом заболевание быстро проходит, тогда как вирус персистирует в толстом кишечнике несколько недель.

 

Культивирование. Вирус размножается в культурах клеток почек, легкого, сердца, семенников, яичников и др. поросят 3-8 недельного возраста и эмбрионов свиньи. Размножение сопровождается образованием бляшек. ЦПИ, не отличаются от изменений, вызываемых другими энтеровирусами свиней. Они характеризуются скоплением округлившихся клеток с повышенной рефрактильностью, которые становятся заметными на 3-5-й день после заражения. При использовании адаптированных "культуральных" штаммов вируса первые признаки ЦПД появляются значительно раньше (иногда уже через 2-16 ч). Пораженные клетки отделяются от поверхности стекла; помимо очагов дегенерации, появляются участки, лишенные клеток. При исследовании окрашенных препаратов инфицированной культуры обнаруживают зернистость и ацидофилию протоплазмы, конденсацию хроматина и эксцентричное положение ядра. Развитие ЦПИ соответствует нарастанию титра вируса. При работе с адаптированными штаммами вновь образованный вирус появляется в культуре между 9 и 12 ч после инокуляции. Максимальные титры его (10 7,5-10 8 ТЦД 50/мл) обычно бывают при дегенерации монослоя на 75% (+++), что чаще всего происходит в период между 18 и 24 ч после заражения. К моменту полного разрушения монослоя титр вируса начинает снижаться. На КЭ вирус болезни Тешена и возбудители тешеноподобных заболеваний не размножаются.

 

Размножение энтеровирусов  свиней (вируса болезни Тешена - Тальфана) удается в перевиваемый диниях клеток почек (IBRS-2) и других органов (SST). Некоторые штаммы репродуцируются в клетках HeLa, BHK-21 Различные штаммы вызывают 1 из 3 видов ЦПД в культуре клеток почек поросят и по характеристике ЦПД в клетках BHK-21, HeLa и Vero

штаммы относят к одной из 4-х групп.

 

 

Эпизоотические  особенности

 

Источники и пути передачи инфекции. Источником инфекции служат больные животные. Чаще заражение  происходит при потреблении корма, воды, мясныхотходов или боенских отбросов, загрязненных выделениями  больных животных, а также помоев. Возможно и контактное заражение. Инфекцию могут распространить свиньи-реконвалесценты или

животные, переболевающие бессимптомно. Воротами инфекции служит, по-видимому, обонятельная область слизистой  оболочки носовой полости.

 

Спектр патогенности в естественных условиях. Восприимчивы только свиньи. Болезнь встречается также в Европе у диких свиней, на Мадагаскаре у водяных свиней. Наиболее восприимчивы поросята-отъемыши и подсвинки.

 

Диагностика

 

Для выделения вируса из ЦНС необходимо отбирать пробы тканей от свиней с нервным синдромом  на ранней стадии его проявления. У  животных с признаками параличей  уже через несколько дней вирус  не обнаруживается в ЦНС. Вирус может  быть выделен в культурах клеток из спинного мозга, коры головного мозга  или мозжечка. Идентификацию ви­руса  проводят на основе физико-химических характеристик, ИФ или ИФА. Для выяв­ления AT широко используется ELISA.