Сибирская язва

У жвачных животных и лошадей болезнь чаще проявляется в септической форме, протекает молниеносно и остро с поражением кишечника и явлениями септицемии. Однако возможно и атипичное проявление болезни. У свиней чаще обнаруживают местные поражения, болезнь протекает подостро, иногда остро, нередко хронически.

При молниеносном течении животное может погибнуть внезапно, без каких-либо клинических признаков. Если болезнь несколько затягивается, то появляются некоторые клинические признаки. Наблюдают сильное возбуждение, температура тела повышена, пульс учащен, дыхание глубокое, видимые слизистые цианотичны. Обычно животные гибнут через несколько минут после появления первых симптомов болезни во время сильного конвульсивного припадка.

Острое течение характеризуется  высокой температурой тела (41-42⁰ С). Лихорадке сопутствует мышечная дрожь. Пульс 80-100 ударов в минуту, сердечные толчки стучащие, дыхание ускоренное и прерывистое. Животное отказывается от корма, усиливается жажда. Видимые слизистые оболочки цианотичные. Животное угнетено, взгляд неподвижный, растерянный. Рот открыт, язык свисает изо рта, ноздри расширенны.

Подострое течение проявляется теми же клиническими признаками, что и острое. Различие заключается в том, что при подостром течении симптомы болезни нарастают медленно и временами могут ослабевать. В этот период животные кажутся здоровыми: они поедают корм. Однако через несколько часов состояние их резко ухудшается. Приступы болезни могут повториться 2-3 раза, на последней стадии вид испуганный, пучеглазие, застывший взгляд, зажатый корм в ротовой полости. У овец, коз и у крупного рогатого скота иногда появляются отеки и гиперемия кожи на внутренней стороне тазовых конечностей. У свиней отмечают сонливость, они заметно избегают воды.

Хроническое течение длится более 2 месяцев и характеризуется у жвачных и лошадей обычно слабым подъемом температуры тела, прогрессирующим истощением и профузным поносом. У свиней могут поражаться лимфатические узлы в области шеи. Однако очаги поражения в организме выявляют лишь при послеубойном осмотре.

Атипичное течение наблюдается очень часто, но из-за незначительных и нетипичных признаков при нем нередко ставят неправильный диагноз и лишь при лабораторном исследовании мяса и субпродуктов выявляют возбудителя сибирской язвы.

Карбункулезная форма может быть самостоятельной или сопутствовать септицемии, острому и подострому течению болезни. Карбункулы могут возникать на различных частях тела и достигать иногда больших размеров. В центре карбункула ткани некротизируются, отпадают, в результате образуется язва. Температура тела повышается незначительно.

Ангинозная форма как правило характеризуется длительным течением. Температура тела повышена незначительно. Обычно поражаются подчелюстные, заглоточные и шейные лимфатические узлы. Болезнь начинается в виде ангины. В области шеи образуется припухлость. Кожа в области шеи приобретает синевато-красный оттенок. Обнаруживают отеки языка и твердого неба.

Кишечная форма сопровождается расстройством органов пищеварения. Вначале отмечают запор, который сменяется диареей. Температура тела высокая и удерживается до 10 дней.[2, 13, 15, 18, 19]

Несмотря на  наличие определенных клинических признаков у животных, диагноз на сибирскую язву только по клиническим симптомам установить трудно, так как при молниеносном течении они обычно не выражены, а при остром и подостром течениях похожи на признаки других болезней. Наиболее обоснованное подозрение на сибирскую язву бывает лишь при карбункулезной форме или при наличии отеков в подчелюстной форме. Особенно сложны случаи, когда сибирская язва протекает у животных атипично. Игнорирование лабораторных методов исследования  может привести к ошибке при постановке окончательного диагноза.

Менингит - серьезное клиническое  осложнение, которое может развиться  после любой из трех форм сибирской  язвы. Смертность при этом составляет почти 100%, после клинических симптомов  менингита с интенсивным воспалением meninges, значительным увеличением CSF давления и появлением крови в CSF (сибиреязвенный менингит - геморрагический менингит) быстро наступает потеря сознания и  смерть.(Levy et al., 1981; Koshi et al., 1981; Lalitha et al., 1990; George et al., 1994; Lalitha et al., 1996). Зарегистрированы только несколько случаев выживания в результате раннего определения менингита и неотложного лечения. (Khanne et al., 1989; Lalitha et al., 1996).

Паталогоанатомические изменения зависят от формы проявления и остроты течения болезни. Тем ярче они выражены, чем медленнее протекает болезнь, за исключением атипичного и хронического течения. Особенно характерные патологические изменения бывают при остром и подостром течениях болезни.

Труп сильно вздут, окоченение отсутствует или выражено очень слабо. Из естественных отверстий выделяется пенистая  кровянистая жидкость, а иногда и кровь. Очень быстро, особенно в летнее время, наступает разложение трупа.

Подкожная клетчатка пронизана точечными геморрагиями и пропитана серозно-гемморагическим инфильтратом желтоватого цвета.

Мышцы кирпично-красного цвета, дряблой консистенции. В брюшной и грудной полостях, в сердечной сумке содержится большое количество мутной красноватой жидкости. На сердце под эпикардом имеются кровоизлияния. Лимфатические узлы увеличены, сочные, на разрезе кирпично-красные. Селезенка сильно увеличена (иногда в норме), полнокровная. Печень и почки увеличены незначительно. Они кирпично-красного или вишневого цвета.  Мочевой пузырь гиперемирован, множественные точечные кровоизлияния на слизистой оболочке. Тонкий отдел кишечника припухший, слизистая оболочка гиперемирована. Толстый отдел кишечника поражается редко. Легкие полнокровные, отечные. Слизистая оболочка дыхательных путей гиперемирована, отечна, усеяна экхимозами. Головной и спинной мозг гиперемированы с кровоизлияниями в вещество мозга и его оболочки.

Ветеринарно-санитарная экспертиза при сибирской язве

Сибирская язва (Anthrax). Антропозоонозная болезнь всех видов сельскохозяйственных и многих видов диких животных, восприимчив и человек. На предприятиях мясной промышленности сибирскую язву обнаруживают довольно редко, однако большая опасность для человека, сложность и дороговизна ветеринарно-санитарных мероприятий, проведение которых необходимо при обнаружении этой болезни, обязывают проявлять бдительность. Послеубойная диагностика. У крупного рогатого скота важнейший патологоанатомический признак — образование в подкожной клетчатке кровянисто-студенистых инфильтратов различных размеров. Инфильтраты чаще всего локализуются в области живота, лопаток, грудной части, на вымени, иногда в области средостения между листками плевры, в брыжейке, кишечнике, на слизистой оболочке полости рта, вокруг лимфоузлов, в подчелюстном пространстве. В толще мышц шеи и подгрудка отмечают кровоизлияния. В местах отека в процесс вовлекаются регионарные лимфатические узлы. Они увеличены, отечны, гиперемированы, на разрезе кирпично-красного или темно-красного цвета, с наличием точечных или полосчатых кровоизлияний. Ткань вокруг пораженного лимфатического узла инфильтрирована. Селезенка сильно увеличена, ее пульпа размягчена, соскоб с поверхности обильный, дегтеобразный. Печень дряблая, почки с многочисленными кровоизлияниями. При кишечной форме сибирской язвы у свиней чаще всего поражаются двенадцатиперстная и тощая кишки. Слизистая оболочка гиперемирована, на фоне чего отмечаются округлые или продолговатые фокусы темно-красного цвета с пленками фибрина. В центре фокуса иногда обнаруживаются некротические очаги. Серозная оболочка кишечника с очагами кровоизлияний. Лимфатические узлы брыжейки имеют вид шнуров желтого или темно-коричневого цвета.

Атипичные формы сибирской  язвы у крупного рогатого скота и, особенно у свиней встречаются часто  и затрудняют диагностику, поэтому  во всех сомнительных случаях необходимо проводить бактериологическое исследование. У овец, коз и лошадей патологоанатомические изменения при сибирской язве обычные, однако необходимо помнить, что у лошадей и овец сибирская язва протекает более остро, чем у других животных.

У свиней сибирская язва чаще протекает хронически. Однако бывают случаи, когда заболевание  протекает в острой септической  форме. При остром течении болезни  в заглоточной области наблюдается  инфильтрация рыхлой соединительной и  жировой тканей красновато-желтоватым студенистым экссудатом. Слизистая  оболочка глотки и гортани покрасневшая или красная, отечная, иногда покрыта  фибринозными пленками. Особенно сильно отечны и красны небные миндалины. Как  на слизистой оболочке глотки и корня  языка, так и на слизистой гортани  ясно выражены очаги слущивания (десквамации) эпителия. Лимфатические узлы головы и шеи увеличены, на разрезе сочные, красного или темно-красного цвета. В них часто наблюдаются точечные кровоизлияния. Соединительная и жировая  ткани, окружающие лимфатический узел, инфильтрированы кровянисто-желтоватым экссудатом. Печень наполнена кровью, в ней видны грязно-желто-красные  некротические очаги. В кишечнике  находят точечные или пятнистые  кровоизлияния. В брыжеечных узлах  обнаруживают кирпично- или темно-красные  островки, отмечается диффузное покраснение  отдельных узлов; жировая ткань  вокруг них пропитана желтовато-кровянистым  экссудатом.

В хронических случаях  в лимфатических узлах наблюдаются  кирпично-красные или желтовато-красные  некротические очаги в виде сухой  творожистой массы или же некроз отдельных узелков. Селезенка не всегда бывает увеличена. В лимфатических  узлах нередко находят некротические  очаги грязно-красного цвета с  творожистым распадом.

Дифференциальный диагноз. У крупного рогатого скота сибирскую  язву чаще всего приходится дифференцировать от пироплазмоза, геморрагической септицемии и эмфизематозного карбункула.

При пироплазмозе в отличие  от сибирской язвы увеличенная селезенка  окрашена светлее, пульпа ее слабо размягчена, не стекает с поверхности разреза. Студенистые инфильтраты в подкожной  клетчатке туши не имеют геморрагии; ткани обычно желтушно окрашены, чего почти никогда не наблюдается  при сибирской язве.

При геморрагической септицемии селезенка не увеличена, кровянисто-студенистые  инфильтраты локализуются в области  головы и верхней трети шеи; в  затяжных случаях болезни обнаруживается серозно-фибринозная плевропневмония («мраморность» легких на разрезе).

При эмфизематозном карбункуле наблюдаются крипитирующие припухлости  с характерным содержимым специфического неприятного запаха, отсутствуют  резкие изменения в селезенке.

У свиней сибирскую язву чаще всего приходится дифференцировать от рожи, чумы и геморрагической  септицемии.[2, 13, 17]

5. МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНОГО ДИАГНОЗА

Отбор патологического  материала. С целью личной безопасности отбор проб патологического материала выполняется в спецодежде и резиновых перчатках. При подозрении сибирской язвы для постановки прижизненного диагноза у больного животного (кроме свиней) берут кровь из уха. Для этого участок кожи с хорошо выраженным сосудом тщательно дезинфицируют и, надрезав сосуд, наносят капли крови на обезжиренные предметные стёкла. Место надреза сосуда тщательно дезинфицируют. Затем, после подсушивания мазка, стёкла прокладывают спичками, плотно обёртывают пергаментной бумагой, перевязывают и помещают в герметичный полиэтиленовый пакет. Пакет помещают в термос. К данному материалу прилагают сопроводительный документ с указанием хозяйства, вида животного, даты отбора проб крови. В лаборатории мазки после окраски по Граму исследуют под световым микроскопом с целью обнаружения капсул и делают посевы на питательные среды. У павшего животного при подозрении сибирской язвы также берут пробу крови. Если количества крови недостаточно, то проводят следующие манипуляции. Ухо со стороны, на которой лежал труп, перевязывают шпагатом в двух местах, ближе к основанию и отсекают между перевязкой. Места разреза прижигают калёным железом. Затем отрезанное  ухо помещают в герметичный пакет и в термос. Вскрытие трупа недопустимо! Если вскрытие сделано, то с предосторожностью отбирают лимфатические узлы, кусочки селезёнки и печени, помещают в двойные  герметичные полиэтиленовые пакеты и в термос. От свиней пробы крови не берут. В качестве патологического материала используют кусочки воспалённой ткани в области отёка и заглоточные лимфатические узлы. Для исследования кожевенного сырья от каждой кожи отрезают участок величиной 3х3 см и надевают на бечёвку, маркируют и обеззараживают в камере Крупина при 0,7 атм. в течение 1 часа 45 минут. .[12]

Лабораторные  исследования. В ветеринарных лабораториях в зависимости от их оснащения могут быть проведены следующие исследования: микроскопия мазков, бактериологические исследования с целью выделения чистой культуры и изучения их свойств, идентификация выделенной культуры, биопроба на лабораторных животных, серологические исследования.

Микроскопические исследования. Из доставленного патологического материала делают мазки, фиксируют этиловым спиртом с добавлением 3% перекиси водорода, окрашивают по Граму и на капсулу - по Михину, Ребигеру, Ольту или Романовскому-Гимза; при наличии люминесцентных сывороток используют метод флюоресцирующих антител. В мазках, окрашенных по Граму, Bac. anthracis - грамположительная палочка (прямая). Палочки располагаются короткими цепочками или попарно, концы их, обращенные друг к другу, резко обрублены, свободные концы обычно закруглены. В отдельных случаях (чаще в мазках от свиней) форма микробов сибирской язвы может быть нехарактерной (короткие толстые или изогнутые, иногда зернистые палочки со вздутием посередине или на конце, возможно наличие "теней" микробов).

В окрашенных специальными методами мазках из патологического материала и среды ГКИ сибиреязвенные палочки окружены капсулой. В фиксированных препаратах капсулы бацилл хорошо окрашиваются всеми способами: Михина, Ребигера, Ольта, Романовского-Гимзы, Бурцева, Ионе, Кауфмана.[13]

Окраска по Михину. Мазок окрашивают леффлеровской метиленовой синью в течение 2-3 минут, при этом его подогревают до появления паров. Краску быстро смывают водой, а мазок высушивают фильтровальной бумагой. Бациллы - тёмно-синие, капсулы- светло-розовые.

Окраска по Ребигеру. 15-20 г генцианвиолета растворяют в 100-150 мл 40% формалина, тщательно и многократно взбалтывают и дают отстоятся несколько часов, затем фильтруют. Полученным раствором окрашивают нефиксированные мазки. Бациллы -тёмно-фиолетовые, капсулы фиолетово-розового цвета.

Окраска по Ольту. В 100 мл кипящей дистиллированной воды растворяют 3 г сафранина, после охлаждения фильтруют. Красят 1-2 мин. Бациллы - красные, капсулы - жёлтые.

Окраска по Романовскому-Гимзе. На фиксированный мазок наносят краску, выдерживают в течение 15-20 минут и быстро смывают. Бациллы тёмно-синие, капсула розовая или бледно-розовая.

По результатам микроскопического исследования немедленно дают предварительный ответ. В случае обнаружения капсульных форм бацилл диагноз на сибирскую язву считают установленным и дальнейшие исследования продолжают в соответствии с инструкцией.[12]

Посев на питательные среды. Посевы из исходного патологического материала делают в МПБ и на МПА или в бульон и на агар Хоттингера (рН 7,4). Одновременно можно делать посевы на дифференциально-диагностическую среду с 0,01 %  фенолфталеинфосфата натрия, а также на желатин, кровяной бульон и агар, среду ГКИ (60 % стерильного раствора Хенкса без антибиотиков и 40 % стерильной неконсервированной сыворотки крупного рогатого скота, инактивированной при 56-58⁰С в течении 30 мин, рН 7,2-7,4). Посевы инкубируют 18-24 ч при температуре 37-38 (С и при отсутствии роста выдерживают при той же температуре еще 48 часов. После суточного роста сибиреязвенных бацилл МПБ остается прозрачным, а на дне образуется рыхлый, в виде комка ваты осадок, разбивающийся при встряхивании. Из бульонной культуры делают мазки, окашивают по Граму и микроскопируют. В мазках обнаруживают цепочки, состоящие из сибиреязвенных палочек или парно расположенные палочки. На плотных питательных средах бациллы сибирской язвы образуют плоские матово-шероховатые колонии. Под малым увеличением микроскопа колонии имеют вид сплетённых нитей («голова медузы»). При посеве уколом в столбик 10-12% желатины бациллы на 2-5 сутки образуют желтовато-белый стержень.[8]