Автор работы: Пользователь скрыл имя, 09 Ноября 2013 в 21:51, доклад
Трансплантация эмбрионов впервые была выполнена и описана Вальтером Хипом в 1890 году. Он трансплантировал два эмбриона ангорских кроликов беременным крольчихам бельгийской породы и получил смешанный помет крольчат обоих пород. Опыты по пересадке эмбрионов на крупных сельскохозяйственных животных начались в 1930-х годах на овцах и козах. Первые успешные пересадки эмбрионов на крупном рогатом скоте и свиньях были осуществлены в 1950-х годах Джимом Роусоном в Кембридже, Англия. Первые коммерческие пересадки эмбрионов были проведены в начале 1970-х годов. Первоначально эмбрионы извлекались от доноров и подсаживались реципиентам с использованием хирургического метода.
ИСТОРИЯ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНОВ
Трансплантация эмбрионов
Первые коммерческие пересадки эмбрионов были проведены в начале 1970-х годов. Первоначально эмбрионы извлекались от доноров и подсаживались реципиентам с использованием хирургического метода. Это продолжалось до конца 1970-х годов, пока не был разработан не хирургический метод и популярность трансплантации эмбрионов резко возросла.
Пересадку эмбрионов осуществляют двумя методами: хирургическим и нехирургическим. Хирургический метод (чаще применяется за границей) включает лапаротомию по белой линии живота под общим наркозом или реже боковой разрез под местной анестезией с последующим обнажением полового тракта и введением эмбриона в полость матки через небольшой прокол в ее стенке. Непосредственно перед трансплантацией с помощью шприца для подкожных инъекций в пастеровскую пипетку, в кончике которой имеется небольшое количество среды для культивирования, засасывается подходящий эмбрион; все эти манипуляции тщательно контролируются под микроскопом. Проведение трансплантации хирургическим путем — трудоемкий процесс, для выполнения которого требуется опытная бригада ветврачей (как минимум 2 хирурга, анестезиолог), а также рабочий но уходу за животными; однако результаты, судя по стельности реципиентов после пересадки им эмбрионов, обычно бывают хорошими и варьируют в пределах от 52 до 90%.
У овец успешную трансплантацию хирургическим способом осуществляли во все периоды развития, вплоть до стадии 12—13-дневного удлиненного трофобласта, причем даже на поздних стадиях развития степень приживления эмбрионов была высокой (до 40% ). У свиней получен положительный результат только при пересадке 6—8-дневных блfстоцист, попытка пересадить удлиненный трофобласт на 9-й день развития оказалась безуспешной.
При нехирургическом методе пересадки животному делают низкую сакральную анестезию, вводят маточный релаксант.
Нехирургическую пересадку эмбрионов проводят с помощью модифицированного катетера Кассу, предназначенного для искусственного осеменения.
Эмбрион засасывают шприцем в стерильную пайету в такой последовательности: среда, пузырек воздуха, среда с эмбрионом, пузырек воздуха, среда, пластиковая пробка.
Замороженные эмбрионы непосредственно перед использованием оттаивают быстрым методом, погружая в воду, нагретую до 37°С. Пайету, пробирку или ампулу быстро извлекают из канистры криобиологического сосуда, погружают в воду на 10-12 с. Оттаянные эмбрионы переносят из пробирки или ампулы на часовое стекло для морфологической оценки.
Подготовленный катетер Кассу вводят во влагалище, затем под контролем руки, находящейся в прямой кишке, продвигают через цервикальный канал до середины рога на стороне яичника с желтым телом. Убедившись в правильности расположения прибора, медленно выталкивают содержимое пайеты в просвет рога матки.
Реципиентов после пересадки эмбрионов обеспечивают полноценным кормлением, ежедневно предоставляют активный моцион. Через 50-60 дней после пересадки проводят ректальное исследование на стельность. При нехирургическом методе пересадки приживаемость эмбрионов составляет 40-50%.
Нехирургическая пересадка 8—16-клеточных эмбрионов в матку свиней закапчивалась супоросностью, хотя эффективность в опытах была небольшой. Проведение канюли через длинный цервикальный канал свиньи остается трудной и очень ответственной операцией с постоянной опасностью прободения стенки полового тракта.