Сахарный диабет

У испытуемых проводили  забор капиллярной крови натощак  для определения количества глюкозы, для определения уровня общего ХС, уровня ТГ в сыворотке крови проводился забор крови из локтевой вены.

 

4.2. Методы исследования

4.2.1. Глюкозооксидазный  метод определения глюкозы

Определения уровня глюкозы в крови  проводилось при помощи лабораторного анализатора Super GL.

Проведение анализа: Установить флакон с системным гемолизирующим флаконом в камеру анализатора. Провести калибровку прибора по реагенту 2. Контроль правильности рекомендуется производить  по контрольным сывороткам.

Схема определения глюкозы:

Таблица 5                            

	Макрометод	Микрометод
Реагент 1, мкл	1000	500
Анализ.образец, мкл	20	10

Тщательно перемешать. Пробирки с пробами поместить в ячейки для серийных проб анализатора и  провести измерение согласно инструкции анализатора SUPER GL.

Расчет. Оценка результатов  осуществляется автоматически в  выбранных исследователем единицах и регистрируется на ленте принтера.

 

4.2.2. Определение холестерина в сыворотке крови

Определение производилось  на автоматическом анализаторе HUMASTAR 600.

     Назначение и особенности

Набор предназначен для прямого  количественного определения холестерина  ЛПНП. Уровень ЛПНП вместе с холестерином ЛПВП (уровень ЛПВП может быть определен  с помощью набора HUMAN, номер по каталогу 10084600) имеет диагностическую важность для оценки риска развития ИБС и атеросклероза пациента.

     Метод

Количественное определение холестерина  ЛПНП состоит из двух стадий: первая стадия – удаление из зоны реакции  хиломикронов холестерина ЛПОНП  и холестерина ЛПВП под действием ферментов. Вторая стадия – определение холестерина ЛПНП широко распространенным ферментативным методом с применением специфичных для холестерина ЛПНП поверхностноактивных веществ. Комбинация этих двух стадий делает данное определение холестерина ЛПНП более точными по сравнению с другими методами.

 

4.2.3. Определение триглицеридов в сыворотке крови

 

       Определение  производилось на автоматическом  анализаторе HUMASTAR 600.

Метод

Концентрация триглицеридов определяется после ферментативного гидролиза под действием липазы. Образующаяся в результате ряда ферментативных реакций перекись водорода под действием пероксидазы реагирует с 4-аминоантипирином и 4-хлорфенолом с образованием окрашенного хинонимина.

 

 Риск атеросклероза

Таблица 6

Слабо повышенный уровень	От 1,71 до 2,28 ммоль/л
Существенно повышенный уровень	Более 2,28 ммоль/л

 

 

 

ГЛАВА 5. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

5.1. Биохимические  показатели углеводного обмена

В соответствии с классификацией ВОЗ от 1981 года, где диабет определили, как синдром хронической гипергликемии, основным диагностическим критерием является определение глюкозы в крови. Величина этого критерия по классификации ВОЗ 1995 года равнялась 7,8 ммоль/л, при заборе крови натощак.

Анализ клинических  проявлений СД, выявляемых уже при его манифестации в основном у взрослой части населения, показывает высокую частоту наличия у них поздних сосудистых осложнений, развитие которых происходит при длительном нарушении углеводного обмена в течении 5-7 лет. Эти и другие наблюдения поставили под сомнение надежность диагностических критериев СД, ранее рекомендованных как Американской диабетической ассоциацией (АДА, 1979), так и ВОЗ (1980, 1985). На протяжении последних более 15 лет указанные рекомендации применялись практически во всех странах мира как для диагностики СД в постоянной практической деятельности, так и при проведении эпидемиологических исследований для изучения распространенности СД. С целью разрешения указанных противоречий АДА в мае 1995 года поручила международному экспертному комитету провести необходимые исследования и подготовить соответствующие предложения по улучшению диагностики СД. В июле 1997 года доклад Международного экспертного комитета был представлен на очередном ежегодном съезде и опубликован в журнале этой ассоциации «Diabetes Care».

Таблица 7

Критерии постановки диагноза СД и других категорий гипергликемии (ВОЗ, 1999).

Категории гипегликемии	Концентрация глюкозы  в ммоль/л. (натощак)
	цельная кровь		Плазма
	венозная	Капиллярная	венозная	Капиллярная
СД	>6,1	>6,1	>7,0	>7,0
Нарушенная толерантность  к глюкозе	<6,1	<6,1	<7,0	<7,0
Нарушенная гликемия натощак	>5,6 и <6,1	>5,6 и <6,1	>6,1 и <7,0	>6,1 и <7,0

 

Наиболее простым методом  диагностики нарушения углеводного  обмена, но не постановки точного диагноза СД, является измерение уровня глюкозы в сыворотке крови натощак. По результатам исследования показателей уровня глюкозы в сыворотке крови были сформированы 3 группы (диагнозы были поставлены ранее в виду результатов полученные после проведения нагрузочной пробы (теста толерантности к глюкозе):

Таблица 8

Уровень содержания глюкозы  в сыворотке крови (ммоль/л)

№ п/п	Условно-здоровые доноры	Больные с НТГ	Больные СД-II
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25	5,1 4,35 4,81 4,7 3,85 3,32 3,74 5,7 5,4 3,32 4,5 4,34 5,6 4,06 4,16 5,08 4,26 5,35 3,5 4,0 4,84 3,7 4,01 3,83 5,74	5,93 8,0 6,78 6,04 6,0 7,5 7,3 6,31 6,01 7,83 7,04 6,2 6,02 6,35 6,7 7,3 7,1 6,0 8,01 6,09 7,7 6,4 6,07 7,31 5,97	10 7,5 7,63 7,0 6,7 6,4 6,03 8,37 8,8 6,7 7,5 8,4 8,1 7,5 6,7 6,4 6,4 10,3 12,0 11,8 6,3 6,3 7,2 8,62 6,0
М	4,45	6,72	7,79
M	0,15	0,14	0,34
% изм.		+51%	+75%
Р		<0,05	<0,01

 

 

Уровень содержания глюкозы  в сыворотке крови здоровых доноров  – 4,45±0,15 ммоль/л, то есть в пределах нормы, которая составляет 3,3 - 5,7 ммоль/л. Содержание глюкозы в сыворотке людей с НТГ составляет 6,72±0,14 ммоль/л, а больных СД-II – 7,79±0,34 ммоль/л, что на 51% и на 75% соответственно выше по сравнению с условно-здоровыми донорами.

По уровню гликемии можно  судить о состоянии инсулярного  аппарата человека, но он не может быть единственным верным критерием для постановки диагноза СД.

 

Изменение соедержания глюкозы  в сыворотке крови больных  с НТГ и больных СД-II типа. (в % от уровня контрольной группы). Рис. №

 

Рис.1. Изменение содержания глюкозы сыворотки крови больных с НТГ и больных с СД –II типа. (в % от уровня здоровых).

 

Уровень гликемии отражает состояние инсулярного аппарата поджелудочной железы, но тем не менее не может служить единственным и самым верным фактором для постановки диагноза СД, т.к. зависит от метода исследования, характера пробы взятой крови, возраста, предшествующей диеты, времени приема пищи перед исследованием, влияния некоторых гормональных и лекарственных препаратов, даже психологического состояния человека во время взятия пробы.

Многочисленные исследования продемонстрировали, что довольно большое  количество людей с нормальной глюкозой натощак, тем не менее имеют аварийные  уровни после нагрузки глюкозой.

Т.о. НТГ  часто является  нарушением углеводного обмена предшествующим СД-II. Для выявления НТГ проводят пробу с перроральной нагрузкой глюкозой (не менее 75г). Исследование проводиться в два этапа: на первом определяется уровень глюкозы натощак, на втором через два часа после пробного завтрака. Этот тест позволяет более точно диагностировать НТГ и СД.

Таблица 9

Диагностический критерий концентрации глюкозы для постановки диагноза СД и НТГ (ВОЗ, 1999).

Условия проведения исследования	Концентрация глюкозы  в ммоль/л. (натощак)
	цельная кровь		Плазма
	венозная	Капиллярная	венозная	Капиллярная
СД
Натощак	>6,1	>6,1	>7,0	>7,0
Через 2 часа после нагрузки глюкозой	>10,0	>11,1	>11,1	>12,2
Нарушенная толерантность  к глюкозе
Натощак	<6,1	<6,1	<7,0	<7,0
Через 2 часа после нагрузки глюкозой	>6,7 и <10,0	>7,8 и <11,1	>7,8 и <11,1	>8,9 и <12,2

 

В таблице 9 приведены  показатели уровня гликемии людей с  достаточно точно установленными диагнозами, в том числе и по результатам  проведения теста толерантности  к глюкозе. Во второй группе уровень  гликемии после через два часа поле нагрузки глюкозой не превысил 11,1 ммоль/л, т.о. диагноз СД-II поставить нельзя, но натощак превышал норму, что свидетельствует о высоком риске развития СД-II.

При нарушенной толерантности  печень не способна полностью ассимилировать поступающую в организм глюкозу. Процессы гликолиза, гликогенсинтеза замедлены, в следствии этого уровень глюкозы в крови повышается после еды. На раннем этапе нарушения толерантности к глюкозе в изменении секреции инсулина ведущую роль играет повышение концентрации СЖК, которое приводит к ингибированию гликолиза в β-клетках, ведет к уменьшению образования АТФ, являющегося важнейшим стимулятором секреции инсулина. В третьей группе уровень глюкозы в плазме крови по истечении 2 часов после пробного завтрака практически 95% случаев превышал 11,1 ммоль/л, натощак составлял в среднем 7,79±0,34 ммоль/л.

Сахарный диабет развивается  в результате многих причин, но все  они патогенетически выражаются в каком-либо из 3-х вариантов:

1. дефект инсулярного аппарата – нарушение функции β-клеток поджелудочной железы вследствие чего они теряют способность реагировать на повышение уровня глюкозы – является основной причиной возникновения СД-II.

В результате потери  β-клетками способности реагировать  на повышение уровня глюкозы возникает  относительный дефицит инсулина. Из-за дефицита инсулина снижается утилизация глюкозы в тканях, и усиливается глюконеогенез в печени. В результате возникает выраженная гипергликемия.

2. дефект периферических тканей утилизации глюкозы.
3. дефект ферментов

Все эти три фактора  приводят к дефициту количества инсулина, либо к дефициту его эффекта.

В следствии дефицита инсулина в организме глюкоза  не может пройти сквозь стенки клеток, потребляющих глюкозу при помощи этого гормона (клетки мышечной, жировой  тканей), и становится недоступной для получения энергии. Нарушение транспорта глюкозы через клеточные мембраны приводит к угнетению утилизации глюкозы по пути окислительного фосфорилирования.

 Нарушение процесса  фосфорилирования в результате  недостаточности инсулина, обуславливается  тем, что глюкоза фосфорилируется под действием фермента гексокигазы, активатором которой является инсулин, что ведет ведет к задержке всасывания стенкой кишечника глюкозы и замедляет поступление ее в печеночные клетки.