Контрольная работа по микробиологии

Этиотропные противогриппозные лекарственные препараты делятся на три группы:

· Блокаторы М2 каналов вируса гриппа А (амантадин, ремантадин);

· Ингибиторы функции нейраминидазы вируса гриппа А и В (озельтамивир, занамивир);

· Другие препараты.

Действие противовирусного препарата направлено на конкретный, узкий этап репликационного цикла вируса. К препаратам с таким механизмом действия как раз и относят амантадин, ремантадин и их аналоги. К сожалению, к амантадину и ремантадину формируются резистентные варианты вируса гриппа, вызванные мутациями в белке М2. Причем такие вирусы способны передаваться при контактах. Для оптимизации условий химиотерапии гриппа на основе ремантадина в РФ был создан препарат пролонгированного действия - полирем. Он является сочетанием ремантадина с сополимером винилового спирта и виниламиноянтарной кислоты, подавляет репродукцию всех вирусов гриппа А, а также имеет антитоксический эффект при гриппе В. К числу важнейших достижений последних лет в лечение гриппа относится создание препарата нового поколения озельтамивира (тамифлю). Озельтамивир, соединяясь с гидрофобным «карманом» активного участка нейраминидазы вируса гриппа, блокирует способность последнего отщеплять остатки сиаловой кислоты с поверхности инфицированной клетки, тем самым подавляя выход из нее новых вирионов.

В последнее время в комплексное лечение гриппа включают иммунотропные лекарственные средства - интерфероны и их индукторы, обладающие комбинированным этиотропным и иммуномоделирующим эффектом. Интерферон - защитный полипептид, который вырабатывается клетками при проникновении в них вирусов гриппа. Он видоспецифичен и активен относительно многих вирусов. Интерферон стимулирует продукцию в клетках специального белка (антивирусного глобулина), тормозящего вирусную репликацию путем вмешательства в трансляцию вирусной мРНК в рибосомах, препятствуя синтезу вирусспецифического протеина.

Своевременное применение этиотропных средств (не позднее 48 часов от появления первых признаков болезни) смягчают симптомы интоксикации, сокращают число осложнений, продолжительность лихорадки и заболевания в целом.

Препараты выбора - Арбидол (арбидол по 0,05 мг) назначают детям 2-6 лет по 1 таблетке 3-4 раза в сутки в течение 3-5 дней; арбидол по 0,1 мг назначают детям 6-12 лет по 1 таблетке 3-4 раза в сутки в течение 3-5 дней; арбидол по 0,1 мг назначают детям старше 12 лет и взрослым по 2 таблетке перед едой 3-4 раза в сутки в течение 3-5 дней или

Ингавирин - для взрослых ( у детей и подростков до 18 лет не применяется) по 1 капсуле в день в течение 5-7 дней.

Ремантадин - взрослым и детям старше 14 лет в первый день по 100 мг 3 раза в день, на 2-й и 3-й - по 100 мг 2 раза день. После еды. Запивая достаточным количеством жидкости или

Ремантадин (Альгирем) в виде сиропа детям 1-3 в 1-й день - 10 мл (2 чайные ложки) сиропа (20 мг) 3 раза в день, 2-3-й дни - по 10 мл 2 раза в день, 4-й день - 10 мл 1 раз в день; детям 3-7 лет в 1-й день 15 мл (30 мг) 3 раза в день, 2-3-й дни - по 15 мл 2 раза в день, 4-й день - 15 мл 1 раз в день, детям 7-14 лет суточная доза до 150 мг в день или

Озельтамивир (Тамифлю) внутрь для взрослых по 1-2 капсуле. Детям старше 12 лет - по 1 капсуле каждые 12 часов в течение 5 дней.

Тилорон (Амиксин) по 125 мг 1 раз в сутки внутрь после еды в течение первых двух дней, затем по 125 мг через каждые 48 часов в течение недели, детям старше 7 лет - по 0,06 г в первые 2 дня, затем по 0,06 г через 48 часов (всего 3-4 таблетки); или

Индукторы интерферона.Препараты альфа-интерферона:

Интерферон альфа-2b (Гриппферон) капли в нос в каждый носовой ход детям от 0 до 1 года по 1 капле 5 раз в день, от 1 до 3 лет по 2 капли 3-4 раза в день; от 3 до 14 лет по 2 капли 4-5 раз в день, взрослым по 3 капли 5-6 раз в день; или

Интерферон альфа (человеческий интерферон с низкой противовирусной активностью (до 10 000 МЕ) по 3-5 капель в носовые ходы 4-6 раз в сутки или в виде ингаляций 2 раза в день (в течение 2-3 дней) при появлении первых симптомов гриппа;

Интерферон альфа-2 в свечах: Виферон-1 применяется для лечения новорожденных и детей в возрасте до 7 лет; Виферон-2 применяется для лечения взрослых - по 1 ректальной свече 2 раза в сутки в течение 5 дней.

Индукторы эндогенного интерферона.

Циклоферон при не осложненном гриппе: в 1-й день 4 таблетки одномоментно, во 2,4 и 6-й дни - по 2 таблетки 1 раз в день перед едой (всего на курс 10 таблеток). Для лечения тяжелых и осложненных форм гриппа применяется Циклоферон раствор для инъекций, вводят по 2 ампулы 12,5% циклоферона внутримышечно (4 мл) в 1, 2, 4, 6, 8, 10, 13, 16, 19 и 22-й дни лечения.

До последних лет борьба с гриппом была основана главным образом на общегигиенических мероприятиях, направленных на защиту организованных коллективов от заноса вируса извне и отдельных лиц от контакта с вирусом, уже циркулирующим среди населения. Этот путь профилактики обладает невысокой эффективностью при такой широко диссеминированной и контагиозной инфекции, как грипп. Капельно-воздушное рассеивание возбудителя осуществляется при гриппе не только явно больными, но также лицами со стертой, или даже субклинической формой инфекции. Все усилия повысить резистентность населения к гриппозной инфекции путем применения различных неспецифических средств оказались безуспешными. До настоящего времени еще не открыты специфические медикаментозные препараты, которые действовали бы на вирусную гриппозную инфекцию аналогично сульфамидам или пенициллину при бактериальных заболеваниях.

Среди новых методов профилактики гриппа наиболее обоснованными и перспективными являются методы, применяемые с целью усиления специфического противогриппозного иммунитета у восприимчивых к гриппу людей путем активной или пассивной иммунизации.

Эффективность метода профилактики гриппа путем пассивной иммунизации противогриппозной сывороткой была показана в эксперименте на лабораторных животных. Метод основан на вдыхании 2-3 мл распыленной, поливалентной противогриппозной А и В сыворотки. Этот метод успешно применялся в различных клиниках для лечения эпидемического гриппа в первые дни заболевания. Серотерапия заметно смягчала токсические явления гриппозной инфекции и предупреждала развитие осложнений. Механизм ее действия должен быть связан, в основном, с блокированием антителами обширных территорий воздухоносных путей, еще не занятых вирусом, и с нейтрализацией гриппозного токсина. Широкое применение серопрофилактики и терапии гриппа встретило препятствие в силу сложности, необходимой для массового применения аппаратуры и дефицитности сыворотки.

Более реальным приемом прививочной профилактики гриппа является активная иммунизация вакцинами, приготовленными из гриппозного вируса типа А и В. В настоящее время твердо установлен факт развития у переболевших гриппом людей приобретенного иммунитета со средней продолжительностью в 1-2 года. Перед началом каждой вспышки резко преобладают люди с низким содержанием антител в крови. Эти показатели заметно возрастают как у переболевших, так и у не болевших людей после окончания эпидемии и дают постепенное снижение в течение ближайших 1-2 лет.

В последние годы широко изучаются два метода активной иммунизации против гриппа:

· Подкожная иммунизация препаратами из концентрированного и очищенного вируса обоих типов, направленная на искусственное усиление общего гуморального иммунитета;

· Иммунизация живой ослабленной вакциной с целью воспроизведения бессимптомной формы гриппа и сопутствующего ей общего и местного иммунитета путем введения вируса непосредственно в дыхательные пути.

Итак, основное средство массовой профилактики гриппа - вакцинация (прививка) от гриппа. Современные противогриппозные вакцины бывают инактивированными и субъединичными. Они хорошо очищены и редко вызывают побочные реакции.

 

 

Ситуационная задача:

В стационар поступил больной с направительным диагнозом «Подозрение на пищевую токсикоинфекцию».

Какой материал взять на исследование?

Какой метод микробиологической диагностики следует использовать?

Как этот метод реализовать?

 

Пищевые токсикоинфекции - обширная группа инфекционных заболеваний человека, вызываемых различными микробами и их токсинами. Наиболее распространенными возбудителями пищевых токсикоинфекций являются сальмонеллы, реже протей. Пищевые токсикоинфекции возникают при употреблении пищевых продуктов, содержащих указанные микробы. При этом бактериальные клетки быстро размножаются в благоприятных условиях. Болезнь сопровождается повышением температуры, расстройством сердечно - сосудистых функций и симптомами острого гастроэнтерита.

Для подтверждения диагноза используются бактериологический и серологи-ческий методы. Бактериологическому исследованию подвергаются остатки пищи и продуктов, из которых она была приготовлена, рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, собранные от больного в отдельные стеклянные банки, плотно закрытые крышкой. Для исследования в микробиологическую лабораторию направляют по 150-200 граммов рвотных масс и промывных вод желудка, причем для промывания в этом случае используют кипяченую воду кипяченую воду без добавления калия перманганата и натрия бикарбоната. При направление на бактериологическое исследование кала рекомендуется забирать последние (более жидкие) порции испражнений в количестве 3-5 граммов. Кровь и моча исследуется у лихорадящих больных. Материал для исследования рекомендуется забирать как можно раньше от начала болезни, до того как начато этиотропное лечение.

Бактериологическое исследование производится путем посева материала на дифференциально-диагностические среды (Эндо, Плоскирева и др.) для выделения чистой культуры сальмонелл, а также в конденсационную воду скошенного питательного агара для выделения протея. Помещают в термостат при 370С в течение 20-24 часов. Затем отмечают цвет колоний на чашках с дифференциальной средой и наличие «ползучего» роста, характерного для протея, в пробирке со скошенным питательным агаром. Подозрительные колонии пересевают на скошенный питательный агар для получения чистых культур и одновременно ставят с ними реакцию агглютинации на стекле, используя смеси диагностических сывороток. Реакцию ставят перед постановкой развернутой РА для предварительного определения вида микроба. На предметное стекло наносят каплю узкоспецифической адсорбированной сыворотки. Сыворотку наносят в разведении 1:100 и рядом каплю физиологического раствора. Исследуемую культуру микроба петлей вносят в обе капли и размешивают. Через 2-4 минуты учитывают результат. При положительной наблюдается скучивание бактерий в виде хлопьев на фоне прозрачной жидкости. В контроле - равномерная муть. Затем, в зависимости от результата ставят повторную реакцию с тем же материалом и с соответствующими монорецепторными сыворотками. На следующий день с чистой культурой бактерий ставят развернутую реакцию агглютинации с соответствующей сывороткой и делают посев на среды «пестрого ряда». При выделении одного и того же серовара сальмонелл из организма больного и пищевого продукта делают окончательное заключение об этиологии пищевой токсикоинфекции и источнике заболевания.

При наличии «ползучего» роста на скошенном питательном агаре, из конденсационной воды петлей берут материал для приготовления препарата «висячая капля» с целью установления подвижности и для мазка, который окрашивают по Грамму и микроскопируют. Вид протея устанавливают на основании биохимических признаков после посева выделенной чистой культуры на среды пестрого ряда.

Для серологической диагностики используются реакция агглютинации с сывороткой больного. Реакция ставится с начала 2-й недели болезни и имеет ретроспективное диагностическое значение.

Вначале готовят разведение сыворотки больного. В отдельную пробирку добавляют 2,4 мл физиологического раствора и 0,1 мл сыворотки - получается разведение сыворотки 1:25 (это основа). В штатив устанавливают 7 пробирок, 2 последние из них - контрольные. Во все пробирки, кроме последней наливают 0,5 мл физиологического раствора. Затем из основы берут 0,5 мл и добавляют в первую пробирку - получают разведение 1:50. Из 1-й пробирки вновь берут 0,5 мл и переносят во 2-ю (разведение 1:100). Таким же образом готовят ряд последовательных двукратных разведений сывороток. Из 5-й пробирки 0,5 мл жидкости выливают в сосуд с дез раствором. В 6-й только физиологический раствор (контроль антигена), в 7-ю добавляют 0,5 мл основы.

На следующем этапе работы во все пробирки кроме 7-й (контроль сыворотки) вносят по 2-3 капли антигенного диагностикума. Жидкость во всех пробирках мутнеет. Штатив с пробирками встряхивают и помещают на 2 часа в термостат. Через 2 часа учитывают предварительный результат реакции. Окончательный результат учитывают через 16-18 часов при нахождении пробирок в условиях комнатной температуры. При положительной реакции на дне пробирки образуется агглютинат - осадок в виде перевернутого зонтика, надосадочная жидкость остается прозрачной. Отрицательная реакция - содержимое пробирки равномерно мутное, без осадка. Жидкость такая же как в 6-й пробирке (контроль антигена). В 7-й пробирке (контроль сыворотки) жидкость прозрачна, но нет осадка. Результат реакции следует оценивать либо +, либо -.

Список используемой литературы

 

1. Воробьев А.А. «Медицинская  микробиология, вирусология, иммунология», Москва 2004. Учебное пособие для  медвузов.

2. Белоусов Ю.Б., Зырянов  С.К., Гуревич К.Г. Эффективность и  безопасность лекарственных средств, применяемых при ОРВИ и гриппе //РМЖ - 2004 - Т.12 - №2.

3. Борисов Л.Б. «Руководство  к лабораторным занятиям по  микробиологии», 1993 г.

4. http://vse-zabolevaniya.ru/mikrobiologija/virusy-grippa-gripp.html

5. Н.В. Каверин «Изменчивая  инфлюэнца». Журнал «Наука и жизнь». Беседа с корреспондентом.