Распространение контрафактной продукции в России

Определение условий идентификации  сульфаниламидов методом УФ-спектрофотометрии включало в себя подбор растворителя, концентрацию вещества в растворе, а также диапазона длин волн, в котором УФ-спектры веществ имеют специфические параметры (рис. 2): спектр сульфаметоксазола имеет максимум при - 256 нм, сульфадиметоксина – при 268 нм, фталилсульфатиазола – при 262 нм.

В качестве более информативного метода оценки подлинности субстанций сульфаниламидов и их таблетированных форм может выступать метод ИК-спектроскопии. Было показано, что ИК-спектры сульфаниламидных субстанций, снятые в диске калия бромида в диапазоне длин волн 4000-400 см-1, являются специфичными для каждого вещества.

В результате проведенных  нами исследований было подтверждено, что выполнение комплекса испытаний  на основе данных методов позволяет  безошибочно установить подлинность  испытуемого препарата.

 

 

 

 

Рис. 2. УФ спектры сульфаниламидов  в области длин волн 220–300 нм. Условные обозначения: 1-сульфаметоксазол, 2-сульфадиме-токсин, 3-фталилсульфатиазол.

 При установлении методов,  позволяющих оценить количественное  содержание  действующего компонента  в субстанциях сульфаниламидов  и их таблетированных формах, выбор был сделан в пользу УФ-спектрофотометрической методики, демонстрирующей большую специфичность по сравнению с титриметрическими методами анализа, и позволяющей одновременно с количественным определением оценивать подлинность испытуемого объекта. Нами были подобраны оптимальные концентрации испытуемого и стандартного растворов, а также длины волн для проведения анализа. Помимо ко-тримоксазола, нами были разработаны условия оценки количественного содержания субстанций и таблеток других сульфаниламидов методом УФ-спектрофотометрии.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3.2.Классическая  ИК-СФМ

Инфракрасная (ИК) спектроскопия  характеризуется широкой информативностью, что создает возможность объективной  оценки подлинности и количественного  определения лекарственных веществ. ИК-спектр однозначно характеризует  всю структуру молекулы. Различия в химическом строении меняют характер ИК-спектра. Важные преимущества ИК-спектрофотометрии — специфичность, быстрота выполнения анализа, высокая чувствительность, объективность получаемых результатов, возможность анализа вещества в кристаллическом состоянии.

В ГФ XI рекомендованы два  способа установления подлинности лекарственных веществ по ИК-спектрам. Один из них основан на сравнении ИК-спектров испытуемого вещества и его стандартного образца. Спектры должны быть сняты в идентичных условиях, т.е. образцы должны быть в одинаковом агрегатном состоянии, в одной и той же концентрации, единой должна быть скорость регистрации и т.д. Второй способ заключается в сравнении ИК-спектра испытуемого вещества с его стандартным спектром. В этом случае необходимо строго соблюдать условия, предусмотренные для снятия стандартного спектра, приведенные в соответствующей НТД (ГФ, ВФС, ФС). Полное совпадение полос поглощения свидетельствует об идентичности веществ. Однако полиморфные модификации могут давать различные ИК-спектры.

В таком случае для подтверждения  идентичности необходимо перекристаллизовать испытуемые вещества из одного и того же растворителя и вновь снять спектры. Соответствующая коллекция подробных ИК спектров прилагается к практическому руководству. Данный метод не является экспрессным и не позволяет проводить анализ в походных условиях, однако с его помощи можно практически однозначно установить подлинность лекарственных средства. Причем анализировать можно не только субстанции, как это принято в фармакопейном анализе , но и лекарственные препараты .

При достаточно большом содержании действующего вещества в лекарственной форме «Таблетки» ( 30-40% и болен ) можно получать ИК спектр, на котором достаточно четко видны практически все полосы поглощения активной субстанции. Мешающее влияние  вспомогательных веществ на спектре отсутствует. В некоторых случаях вспомогательные вещества вместе с активной субстанцией позволяют получить  ИК спектр, характерный для лекарственного препарата конкретного производителя. На пример, на рисунке 1-3(см. приложение) представлены ИК-спектры препаратов разных производителей различаются (рис.2 и 3,см.приложение) между собой (набор слабых полос с частотами около 2361, 2346 и 2334 см соответствует колебаниям присутствующего в атмосфере углекислого газа и не включается в интерпретацию).

В практическое руководство были включены спектры и собственно лекарственных веществ , и таблеток  фторхинолонов.

Подтверждением подлинности  лекарственного вещества может служить  также интенсивность поглощения. Для этой цели используют такие константы  как показатель поглощения или величина интегральной интенсивности поглощения, равная площади, которую огибает  кривая на спектре поглощения.

Соответствующее оборудование производится российскими предприятиями: ЗАО Сорбполимер, г. Краснодар; НПФ ЛЮМЕКС, г. Санкт-Петербург.

Для анализа фальсифицированных препаратов, содержащих действующие  вещества, указанные на этикетке, но изготовленные другим производителем- не тем, который указан на этикетке, необходимо использовать:

- приоритетные методы  анализа чистоты

- биофармацевтические методы- тест «растворение».

Наиболее важными методами анализа чистоты лекарственных  субстанций и препаратов в фармацевтическом анализе являются ВЭЖХ и ГЖХ. Поскольку  при производстве поддельных лекарств обычно используются более дешевые  субстанции, то по составу примесей (родственные соединения, остаточные органические растворители) можно   только установить факт подделки, но и  определить происхождение фальсифицированного  препарата. Более того, данные методы позволяют устанавливать подлинность  действующего вещества и проводить  его количественное определение.

Тест «растворение» в  настоящее время активно используется в фармакопейном анализе. Однако общая фармакопейная статья регламентирует анализ только по одной точке: если другое не оговорено в документе на конкретный препарат, требуется, чтобы через 45 мин после начала испытания в раствор перешло не менее 70 % действующего вещества. Но, как показывают практика и наши собственные исследования, выполнить данное требование не так уж и сложно. Поэтому гораздо более важным является получение кривых растворения. При этом отбор проб следует начинать уже через 5 мин после начала испытания и строить профиль высвобождения необходимо как минимум по 6 временным точкам. На таких графиках основные различия для препаратов с немодифицированным высвобождением обычно наблюдаются в первые 30 мин теста.

Методы ВЭЖХ, ГЖХ тест «растворение» так же, как и  ИК спектроскопический анализ, необходимо проводить в лабораторных условиях. Однако в некоторых случаях только эти методы могут позволить выявить грамотно сделанные подделки. Например, было проведено исследование подделки таблеток Клацид ( Abbott Laboratories, Италия), которые должны содержать кларитромицин.

Анализ данного препарата  методом ТСХ и с помощью  качественных реакций указывал на его  подлинность. Однако после получения  ИК спектра препарата и его  сравнения со спектром оригинального  Клацида было установлено, что подделка либо содержит указанное на упаковке действующее вещество в явно недостаточном количестве, либо не содержит его вовсе. Анализ методом ВЭЖХ в обращенно-фазовом режиме показал, что кларитромицин( время удерживания около 3,3 мин), вероятнее всего, был заменен его более дешевым аналогом- эритромицином ( время удерживания около 4,0 мин). Причем последний был добавлен в таблетки в количестве, достаточном для его обнаружения химическими реакциями и методом ТСХ. Незначительные различия в крупных структурах кларитромицина и эритромицина ( замена ОН-группы на СН3О) не позволяют их различить этими методами. В частности, эффективности хроматографической системы ( количества теоретических тарелок) при анализе методом ТСХ недостаточно, чтобы разделить очень близкие по структуре соединения.

Необходимо также отметить, что экспресс-анализ позволяет проводить  только первичный скрининг лекарственных  препаратов. Он не заменяет фармакопейный  анализ, а дополняет его. Достаточно сложно проводить все испытания  по нормативной документации каждый раз, когда необходимо удостовериться в подлинности препарата. Однако, если экспресс- методы вызывают сомнения в происхождении того или иного средства, необходим полный анализ последнего по соответствующей нормативной документации.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3.3. БИК-спектроскопия.

Ближний инфракрасный диапазон (БИК) электромагнитного спектра  простирается от 800 нм до 2500нм (от 12500 до 4000см-1 ) и находится между средней ИК - областью с большей длиной волн и видимой областью с более короткими длинами волн. Средний и ближний диапазоны могут использоваться для колебательной спектроскопии. В то время как спектры, полученные в среднем ИК регистрируют главным образом атомные колебания в индивидуальных химических связях большинства молекул, соответствующие спектры БИК показывают так называемые обертоны и комбинационные полосы.

Преимущества спектроскопии  БИК

• Быстрота (обычно 5 – 10с)

• Не требуется предварительной подготовки образца

• Простота проведения измерений

• Высокая точность и воспроизводимость анализа

• Нет загрязнений

• Процесс-контроль

• Возможность проведения измерений через стеклянную и пластиковую упаковку

• Автоматизация измерений

• Перенос метода с одного прибора на другой

• Анализ физических и химических свойств

По сравнению с жидкостными  методами химического анализа, анализ методом спектроскопии БИК более  быстрый, простой и точный. Измерения  могут проводиться очень быстро, обычно время анализа составляет лишь 5-10 секунд. Не требуется предварительная  подготовка образца и специальное  обучение персонала. Данные спектры  могут содержать информацию о  физических свойствах материала, таких  как размер частиц, термическая и  механическая предварительная обработка, вязкость, плотность и т.п.

Сравнение ИК-СПЕКТРОСКОПИИ ближнего и среднего диапазонов.

Сокращение времени подготовки образца является одним из главных  преимуществ ближнего ИК по сравнению со средним. Это происходит, прежде всего, из-за сравнительно низкого коэффициента поглощения для большинства материалов в БИК диапазоне. Измерения в среднем диапазоне порошкообразных образцов традиционно выполняются или методом диффузного отражения или прессованием образцов в таблетки и измерение спектров в режиме пропускания. В обоих случаях образцы должны быть сначала измельчены в тонкий порошок, а потом перемешаны с непоглощающим веществом, таким как KBr. Измельченные и перемешанные с KBr порошки помещаются в пресс-форму и прессуются в таблетки при высоком давлении с помощью гидравлического или ручного пресса. В случае измерений в режиме диффузного отражения измельченный и смешанный с KBr образец помещается прямо в стаканчик для образца, поверхность образца выравнивается и потом вводится в приставку диффузного отражения для измерений. Эти методы подготовки образцов широко и успешно используются, но имеют недостатки, такие как более длительное время для подготовки образца, более высокая возможность для загрязнения образца, возможно понижение воспроизводимости образец-образец и пользователь–пользователь из-за различий возникающих при приготовлении образца, и дополнительная стоимость KBr разбавителя.

Кроме того, преимущество БИК  спектроскопии состоит в том, что здесь для измерений твёрдых  и жидких образцов применяется довольно недорогое оптоволокно. Сравнимые  с ним аксессуары для средней  ИК-области или ограничены их физической досягаемостью, либо хрупкостью и сложностью работы с ними. Благодаря всему этому БИК спектроскопия намного более привлекательна для использования в производственном процессе.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Список  использованной литературы:

1. Арзамасцев А.П, Дорофеев В.Л,  Коновалов А,А, Кочин В.Ю «Выявление фальсифицированных лекарственных средств с использованием современных аналитических методов» , «Химико-Фармацевтический журнал» Том 38, № 3, стр 39, 2004 год.

2. Азимова И.Д., Теплякова  Н.Г., Дорофеев В.Л., Арзамасцев А.П.  «Испольхование  методик-спектроскопии с целью выявления фальсифицированных лекарственных препаратов, содержащих  действующее  вещество омепрозол», 28.12.2010 г. http://tele-conf.ru/problemyi-himii-farmakologii-i-bav

3.Буданцев Л. А. Современные подходы к выявлению фальсифицированных лекарственных препаратов группы сульфаниламидов // Вестник Военно-медицинской академии, СПб, 2007 – С. 152.

4. Внукова В.А. «Фальсифицированные и контрафактные лекарственные средства: определяемся с терминами.», «Новая  Аптека» №9 40стр , 2005год.

5. Постановление правительства Российской Федерации от 29.12.2007 №321 " Об утверждении технического регламента "О безопасности лекарственных средств для медицинского применения".

6.Препьялова А.А. «Фальсифицированные лекарственные средства на рынке Российской Федерации». «Ремедиум» стр7, март 2006 года.

7.Чакалева И.И «Рынок фальсифицированных лекарственных средств в России: сегодня, завтра.», «Новая Аптека» №1 стр.29 , 2002 год.

8. Федеральный закон от 12.04.2010 N 61-ФЗ "Об обращении лекарственных средств"

9. Фурье ИК-Спектрометр http://www.netzsch-thermal-analysis.com

10.Чакчир Б.А., Алексеева  Г.М. «Фотометрические методы  анализа»,СПБ,2010

Содержание:

1.Введение………………………………………………………………………

2.1 Распространение контрафактной  продукции в России………………….

2.2.Причины распространения  фальсифицированных лекарственных  средств………………………………………………………………………….

2.3.Декларирование соответствия  ЛС………………………………………..

3.Применение физико-химических методов при выявления фальсификатов…………………………………………………………………

3.1. Применение УФ-СФМ для обнаружения фальсификатов в сравнении с другими физико-химическими методами……………………………………