Технология получения интерферона

Из вышеприведенных  примеров получения интерферона  с помощью модифицированных микроорганизмов вытекает вывод, что до сегодняшнего момента не разработана единая схема получения микробиологического интерферона, обладающая огромным выходом продукта и отсутствием технологических недостатков. Имеющиеся штаммы используются в производстве различными научными центрами, но на данный момент совершенствование данной технологии продолжается.

 

3. Механизмы действия интерферонов

 

ИФН проявляют некоторые  виды активности как лимфокины и  им-муномодуляторы. ИФН I типа, действующие преимущественно как ингибиторы репликации вирусов в клетке, реализуют свой эффект, стимулируя выработку рибосомами клеток хозяина клеточных ферментов, которые тормозят продукцию вирусов, нарушая трансляцию вирусной мРНК и синтез вирусных белков.

ИФН вырабатывают большинство видов животных, но проявление их активности видоспецифично, т.е. они действуют только у того вида животных, в которых вырабатываются.

ИФН вызывают индукцию трех ферментов:

- протеинкиназы, нарушающей начальный этап построения пептидной цепи;

- олигоизоаденилат синтетазы, активирующей РНК-азу, которая разрушает вирусную РНК;

- фосфодиэстеразы, разрушающей конечные нуклеотиды тРНК, что приводит к нарушению элонгации пептида.

С учетом антивирусного  и иммуномоделирующего эффектов ИФН в НПО «Биомед» предложены и успешно апробированы, суппозитории с ИФНаn1 и пробиотиками при терапии дисбактериозов вирусной и бактериальной этиологии, кандидозов; в гинекологической практике для лечения эндометритов, кольпитов, вагинитов и гинекологического герпеса.

 

4. Терапевтическое применение ИНФ человека

 

Различают два поколения  препаратов интерферона. Для первого  поколения характерно натуральное  происхождение, при котором его получают из крови доноров. Из него получают интерферон лейкоцитарный человеческий сухой, который применяют для ингаляций и закапывания в носовые проходы. Также производят интерферон в свечах, очищенный концентрированный интерферон в сухом виде и Лейкинферон.

Этот метод получения  препаратов на основе интерферона является достаточно дорогим и малодоступным, поэтому в конце 20 века при помощи генной инженерии были созданы препараты интерферона второго поколения.

Таким образом, удалось  разработать препараты Интерлок, Реаферон, Интераль и другие, содержащие в себе рекомбинантный человеческий альфа-интерферон (приложение А).

По причине своих  уникальных свойств препараты интерферона  применяют при лечении и профилактики всех респираторных заболеваний, большинства онкозаболеваний, для лечения многих вирусных заболеваний и гриппа. Препараты интерферона широко применяются в лечении гепатита В и С: интерферон ограничивает развитие вируса, препятствует возникновению цирроза и исключает смертельный исход.

У некоторых препаратов интерферона имеются побочные эффекты, например, кожные высыпания, аллергии и заболевания кроветворной системы. При длительном приеме интерферона в организме вырабатываются антитела к интерферону, что делает его неспособным к борьбе с вирусами. Причина этих явлений кроется в наличии альбумина в препаратах на основе интерферона.

Альбумин получают из крови, поэтому существует риск (хоть и минимальный) заражения гепатитом и другими болезнями, передающимися через кровь.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

 

Разработка методов  получения лейкоцитарного и рекомбинантного  интерферона в препаративных  количествах, а также высокоэффективных  методов их очистки открыла возможность  применения этих препаратов в лечении  вирусных гепатитов.

В настоящее время во многих странах мира выпускаются коммерческие препараты: человеческий лейкоцитарный, лимфобластный «Велферон» (Wellferon), фибробластный (Ферон); интерферон и интерфероны, полученные генно-инженерными методами: рекомбинантные альфа-(Роферон, Реальдерон и другие), бета- и гамма-интерферон (Гаммаферон) [15].

Главным из ИНФ является ИФНγ.

ИФНγ — ключевой медиатор активации системы естественной цитотоксичности, регулирует процесс дифференцировки естественных киллерных клеток и их цитотоксическое взаимодействие с клетками-мишенями, стимулирует цитотоксические и регуляторные функции макрофагов, активирует цито-токсические лимфоциты.

Под действием ИФНγ повышается продукция цитокинов, таких, как интерлейкин-1, интерлейкин-2, интерлейкин-12, ИФНβ, и фактора некроза опухолей-α.

 

Список литературы

 

1 Временная фармакопейная статья 42У-23/60-439-97. Интерферон человеческий рекомбинантный альфа-два.

2 www.antibiotic.ru/ab/brviri.shtml

3 www.study.online.ks.ua

4 Кравченко В.В. и др. Биоорганическая химия, 1987, т.13, №9, с.1186-1193

5 Taniguchi Т. et al. Nature, 1980, v. 285, р. 547-549; Goeddel D.V. et al. Nucl. Acids Res., 1980, v. 8, p. 4057-4074; Remaut E. et al. Nucl. Acids Res., 1983, v. 7, p. 4677-4688

6 Авторское свидетельство СССР N 1703691. C 12 N 15/21. Рекомбинантная плазмидная ДНК plF14, кодирующая полипептид со свойствами лейкоцитарного интерферона-альфа-2 человека, и штамм бактерий Escherichia coli - продуцент полипептида со свойствами лейкоцитарного интерферона-альфа-2 человека

7 Патент РФ N 2054041. C 12 N 15/21. Рекомбинантная плазмидная ДНК plF16, кодирующая зрелый лейкоцитарный интерферон альфа-2 человека, штамм E. coli - продуцент зрелого интерферона альфа-2 человека

8 Патент США N 4656131. Method for producing interferons. МКИ C 12 P 21/00, НКИ 435/68.

9 Аэрация и перемешивание в процессах культивирования микроорганизмов. Обзор. Бирюков В.В. Кузьмина Л.М., М. 1984, ВНИИСЭНТИ.

10 Neilley L.K. et al. Neurology, 1996, v. 46, p. 552-554; Brod S. A. et al. Neurology, 1996, v. 46, p. 1633-1638; Huber S. et al. Schweiz. Med. Wochenschr., 1996, v. 126, p. 1475-1481

11 Мясников А.Н., Останин К.В., Смирнов М.Н. и др. Авторское свидетельство 1530749

12 Kukuruzinska M.A. et al. Ann. Rev. Biochem., 1987, v. 56, p. 915-944

13 Ballou C.E. J. Biol. Chem., 1970, v. 245, p. 1197-1203

14 Montesino R. et al. Protein Expr. Purif., 1998, v. l4, p. 197-207

15 www.pharmvestnik.ru

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Приложение А

Название препарата	Подтип ИНФ	Способ получения	Фармакологическое действие	Показания к применению
Интерферон	α	Биосинтез в культуре лейко-цитов донорской крови под воз-действием вирусов	Антивирусное, им-муномодулирую-щее, антипролифе-ративное	Вирусные заболевания, лейкоз, злокачественная меланома, рак почек, карциноидный синдром
Интерлок	α	Биосинтез в куль-туре лейкоцитов донорской крови под воздействием парамиковирусов	Подавляет жизнедея-тельность ряда виру-сов	Вирусные заболевания глаз, гепатиты
Интерферон альфа-2	α2	Рекомбинантный	Антивирусное, им-муномодулирующее, ингибирует проли-ферацию большого спектра опухолевых клеток	Эпителиальная форма  острой и рецидивирующей вирусной инфекции глаз; онкологические заболевания
Интерферон альфа-2а	α2а	Рекомбинантный. Белок, содержа-щий 165 амино-кислот	Противовирусная, противоопухолевая  активность	Лейкемический ретикулоэндотелиоз, саркома ка-поши, рак почки.
Реаферон	α2	Рекомбинанатный ИНФ в генетичес-кий аппарат кото-рой встроен ген человеческого лейк-итарного ИНФ α2.	Противовирусная, иммуномодулирующая, противоопухо-левая активность	Вирусные, опухолевые заболевания
Интерферон альфа – n1	αn1	Высокоочищен-ный человеческий ИНФ	Противовирусная	Хронический активный инфекционный гепатит В
Инреферон бета	β	Суперпродуция фибробластов человека стиму-лятором в присут-ствии ингиби-торов обменных процессов	Противовирусная, иммуномодулирующая, противоопухо-левая активность	Хронические вирусные инфекции в офтальмологии, гинекологии и урологии, дерматологии, гепатологии, онкологии
Интерферон гамма	γ	Рекомбинантный	Противовирусная, иммуномодулирующая, противоопухо-левая активность	Хронические гранулематоз-ные заболевания