Разделение и выделение антоцианов

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Приложение 2.

Разделение антоцианов методом бумажной хроматографии.

Оборудование: бумага для хроматографии, капилляры, чашки петри, фарфоровые чашки с пестиками, воронки, фильтровальная бумага, пробирки, держатели.

Реактивы: соляная кислота концентрированная, изоамиловый спирт, вода.

Ход опыта.

1.Приготовить раствор: изоамиловый спирт – 5частей, 36%-ная соляная кислота – 1часть, вода – 1часть.

2.Отрезать полоску бумаги для хроматографии длинной 17см, шириной 8 см.

3.Отметить на бумаге  линию старта и линию финиша (примерно в 5мм от начала и  конца).

4.На линии старта карандашом  отметить 4 точки, обозначить их цифрами.

5.На каждую точку аккуратно  нанести по раствору выделенных  антоцианов.

6. Чашку Петри наполнить  смесью изоамиловый спирт - соляная кислота-вода.

7.Опустить полоску бумаги  в чашку до линии старта.

8.Жидкость начнет медленно  подниматься, когда она поднимется до линии финиша вынуть бумагу. Просушить.

9.На полоске бумаге  проявились пятна. Обвести их  простым карандашом, отметить центр  каждого пятна. Отмерить расстояние  от линии старта до центра  пятна.  Рассчитать Rf.

 

 

         Приложение 3.

 

В чистую пробирку налить 2-3 мл вытяжки антоцианов, добавьте каплю разбавленной кислоты. Если полученная вытяжка антоцианов имела первоначально буроватую окраску, то после добавления 1— 2 капель кислоты она примет красивый розово-красный цвет. Изменения окраски связаны с перестройками в молекуле антоциана.

К окрасившемуся в розовый цвет раствору добавляйте по каплям разбавленную щелочь (0,001-процентный раствор едкого натра) или немного, на самом кончике ножа, порошка питьевой соды. Розовая окраска исчезает.

Контролируя с помощью индикаторной бумаги изменение рН раствора, происходящее в результате постепенного добавления кислоты или щелочи, можно установить более точную зависимость цвета   антоцианов от кислотности среды.

 

 

 

Цвет вытяжки	Значение рH
Красный	2-3
Розовый	4-5
Синий	6-7
Зелёный	8
Жёлто - зелёный	9-10

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Приложение 4.

Аурантинидин	-H	-OH	-H	-OH	-OH	-OH	-OH
Цианидин	-OH	-OH	-H	-OH	-OH	-H	-OH
Дельфинидин	-OH	-OH	-OH	-OH	-OH	-H	-OH
Европинидин	-OCH3	-OH	-OH	-OH	-OCH3	-H	-OH
Лютеолинидин	-OH	-OH	-H	-H	-OH	-H	-OH
Пеларгонидин	-H	-OH	-H	-OH	-OH	-H	-OH
Мальвидин	-OCH3	-OH	-OCH3	-OH	-OH	-H	-OH
Пеонидин	-OCH3	-OH	-H	-OH	-OH	-H	-OH
Петунидин	-OH	-OH	-OCH3	-OH	-OH	-H	-OH
Розинидин	-OCH3	-OH	-H	-OH	-OH	-H	-OCH3

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Приложение 5.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Приложение 6.

 

Строение ряда антоцианидинов
Антоцианидин	Общая структурная формула	R3	R5	R6	R7	R3'	R4'	R5'
Апигенидин		−H	−OH	−H	−OH	−H	−OH	−H
Аурантинидин		−OH	−OH	−OH	−OH	−H	−OH	−H
Капенсинидин		−OH	−OMe	−H	−OH	−OMe	−OH	−OMe
Цианидин		−OH	−OH	−H	−OH	−OH	−OH	−H
Дельфинидин		−OH	−OH	−H	−OH	−OH	−OH	−OH
Европинидин		−OH	−OMe	−H	−OH	−OMe	−OH	−OH
Гирсутидин		−OH	−OH	−H	−OMe	−OMe	−OH	−OMe
6-гидроксицианидин		−OH	−OH	−OH	−OH	−OH	−OH	−H
Лютеолинидин		−H	−OH	−H	−OH	−OH	−OH	−H
Мальвидин		−OH	−OH	−H	−OH	−OMe	−OH	−OMe
5-метилцианидин		−OH	−OMe	−H	−OH	−OH	−OH	−H
Пеларгонидин		−OH	−OH	−H	−OH	−H	−OH	−H
Пеонидин		−OH	−OH	−H	−OH	−OMe	−OH	−H
Петунидин		−OH	−OH	−H	−OH	−OMe	−OH	−OH
pulchellidyna		−OH	−OMe	−H	−OH	−OH	−OH	−OH
Розинидин		−OH	−OH	−H	−OMe	−OMe	−OH	−H
Трицетинидин		−H	−OH	−H	−OH	−OH	−OH	−OH