Бабезиоз (пироплазмоз) собак: новые данные по старой проблеме

Бабезиоз (пироплазмоз) собак: новые данные по старой проблеме

Бабезиоз (пироплазмоз) собак является широко распространенным во всем мире клинически существенным, трансмиссивным гемопротозойным заболеванием. Только в Ростовской области зараженность собак бабезиозом в период с марта по июнь достигает 35% [1].

На сегодняшний день в отечественной ветеринарной литературе сложилось несколько устойчивых стереотипов относительно бабезиоза собак, вот некоторые из них: бабезиоз (пироплазмоз) легко диагностируется в острую стадию заболевания; на собаках паразитирует только один вид бабезий (пироплазм), который не поражает другие виды животных, а пироплазмы других видов животных не поражают собак; пироплазмоз передается только через укусы клещей или при переливании крови; на ранних стадиях заболевания пироплазмоз легко лечится, а не леченые собаки, как правило, погибают; для бабезиоза (пироплазмоза) нехарактерно носительство.

Конечно, у каждого специалиста есть свои мнения и догадки относительно бабезиоза, но в отсутствии полноценной молекулярной диагностики они остаются только догадками и уделом меньшинства специалистов.

Разные виды бабезий часто называют пироплазмами, что является собирательным термином для рода бабезий и тейлерий. Эти два рода за последние 10 лет подверглись скрупулезному генетическому исследованию, что привело к переклассификации и изменениям в токсономии этих паразитов. По международной классификации роды Babesiaspp. входят в семейство Babesiidae, надсемейство

Piroplasmida в пределах типа Apicomplexa, кроме того, в надсемейство Piroplasmida входит также и родTheileriidae.

В англоязычной литературе на основании величины бабезий при световой микроскопии выделяют «большой» бабезиоз (пироплазмоз) при обнаружении в мазках крови методом световой микроскопии бабезий размерами более 3-5 μm. На сегодняшний день мы знаем, что это такие бабезии (пироплазмы) как B. canis и B. vogeli. О «малом» бабезиозе говорят при обнаружении в мазках крови бабезий менее 3 μm, это такие бабезии (пироплазмы) как B. gibsoni (табл 1). Несмотря на кропотливое наблюдение в течение почти ста лет за паразитами в мазках крови, классификация бабезий не шла дальше, чем классификация их по морфологическим особенностям и размерам. Впервые предложил классифицировать возбудителей бабезиоза собак по клиническим признакам заболевания немецкий протозоолог Эдвард Рейчнов, который выявил серьезные различия в тяжести клинического течения и патогенности возбудителей, вызывающих бабезиоз (пироплазмоз) во Франции и на Севере Африки. Наиболее вероятно, что сейчас эти паразиты известны как B. canis и B. rosi соответственно. До 1980 года никаких новых изменений в номенклатуру возбудителей бабезиозов внесено не было. Возбудители бабезиоза собак были переклассифицированы только с появлением молекулярных методов диагностики и молекулярного генотипирования. Последние исследования бабезиоза собак сосредоточены на определении таксономического статуса известных и недавно обнаруженных возбудителей бабезиоза, улучшении диагностических методов, раскрытии аспектов патофизиологии этого заболевания и поиск новых химиотерапевтических и иммуннопрофилактических протоколов.

Такой возбудитель бабезиоза собак как B. canis в 2000 году был повторно классифицирован в три подвида: B. canis canis, B. canis rossi и B. canis vogeli [2, 3]. В 2005 году на основании перекрестных иммунных реакций, серологического тестирования, векторной специфики и генетического родства эти паразиты признаны независимыми видами B. canis, B. rossi и B. vogeli. Все три паразита названы большими (крупными бабезиями, по ранее предложенной морфологической классификации) (табл. 1) [2, 3].

Четвертая крупная бабезия, паразитирующая на собаках, выделена в Северной Каролине (США) от собак с клиническими и гематологическими признаками бабезиоза. На сегодняшний день еще не классифицирована и определена как неклассифицированная крупная Babesia sp., изолят из Северной Каролины (табл. 1) [2].

Большинство специалистов признают, по крайней мере, три возбудителя «малого» бабезиоза (пироплазмоза) у собак. Они отличаются по клиническим и генетическим характеристикам, это Babesia gibsoni, Babesia conradae. В другом исследовании бабезии (пироплазмы) были выделены от больных собак на западе США и описаны в оригинальном исследовании как B. gibsoni [3, 4] и Babesia microti-like, последняя позже идентифицирована как Theileriaannae [5, 6] (табл. 1).

Кроме того, имеются сообщения о выделении из крови собак, больных бабезиозом, три разновидности Theileria. У небольшого числа собак в Европе были выделены Theileria (Babesia) equi и Theileria annulata; и у 82 собак в Южной Африке была выделена неклассифицированная Theileriasp — Южно-Африканская Theileria sp. [5, 6].

При световой микроскопии интроэритроцитарные стадии Babesiaspp. неразличимый от Theileria spp.

Известно, что на кошках паразитирует Babesia felis и тейлерия Cytauxzoon felis, которые при световой микроспории имеют такие же характеристики, как и бабезии (пироплазмы) собак. Однако данных о том, что эти возбудители могут поражать собак, нет.

Как и при решении многих других вопросов, касающихся таксономии, не обошлось без разногласий при классификации бабезий (пироплазм) собак. Особенно это касается так называемых малых бабезий (пироплазм). Исторически роды Babesia и Theileria были разделены на основании стадий жизненного цикла и трансовариальной передачи в клещах. [2]. Противоречие заключается в том, должны ли Babesia spp. и Theileria spp. классифицироваться на основании их естественного цикла в организме собак и клещей, или могут использоваться генетические данные молекулярного анализа. С 2000 года при классификации бабезий (пироплазм) предпочтение отдают генетическим аспектам возбудителей. При молекулярных исследованиях в основном используют локус субъединицы рибосомального гена 18S РНК для родовых отличий бабезий (пироплазм), поскольку эта часть гена достаточно устойчива к мутациям. Но другие рРНК гены, например, цитохрома b и гены, кодирующие белки теплового шока, также использовались для родовой идентификации возбудителей бабезиоза[5, 8].

На сегодняшний день установлены зоны распространения бабезиоза собак, они перечислены в таблице 1; имеется всесторонняя и современная карта распространения клещевых инфекций собак Европы, Восточной и Юго-Восточная Азии [2]. Как и ожидалось, географическое распространение клещевых инфекций полностью связано с географическим распространением клещей-переносчиков этих заболеваний. Интересно отметить, что распространение Babesiagibsoni не связано с распространением каких-либо клещей, и быстрое глобальное распространение этого возбудителя связано с его уникальной возможностью прямой передачи от больной собаки к здоровой через укусы, минуя какие-либо клещевые векторы [9, 10].

На сегодняшний день Babesia vogeli является самой распространенной пироплазмой собак, что связано с широчайшим распространением вектора – коричневого собачьего клеща (Rhipicephalus sanguineus) (табл. 1). Babesia vogeli распространена повсеместно, в тропических и субтропических областях, а также в более прохладных широтах, где кроме Babesia vogeli распространена другая большая бабезия – Babesia canis. Такое распространение часто приводит к микст-инфекциям. Babesia canis передается Dermacentor spp. и имеет все более и более широкое распространение в центральной Европе, тогда как совсем недавно считалось, что ее распространение ограничено Францией [2].

Babesia rossi преимущественно распространена в Африке (вместе с B. vogeli и B. gibsoni). Первоначально этот агент был выделен только в Южной Африке, но на сегодняшний день есть сообщения о его выделении и в других регионах Африканского континента, включая Нигерию и Судан [2], где его распространяют клещи Haemaphysalisspp., являющиеся энзоотичными для этих мест (табл. 1).

Среди малых бабезий наибольшее географическое распространение получила B. gibsoni. Методом молекулярной идентификации она была обнаружена в южных, восточных и юго-восточных азиатских странах, получив наибольшее распространение там, где практикуются незаконные собачьи бои.

До сегодняшнего дня в Российской Федерации световая микроскопия остается единственным методом диагностики бабезиоза у собак. На основании световой микроскопии и общего анализа крови при пироплазмозе постоянно можно выявить анемию, моноцитоз, тромбоцитопению, повышенное СОЭ и, конечно, паразитемию. Бабезии (пироплазмы) могут определяться как внутри эритроцитов, так и свободно (рис. 1, 2), а также внутри макрофагов. Считается, здесь они оказываются в результате фагоцитоза пораженных эритроцитов. Такие макрофаги, нагруженные эритроцитами, также являются диагностическим критерием бабезиоза. Судить о тяжести течения по результатам световой микроскопии можно по степени паразитемии, анемии и моноцитоза, но без клинических параллелей эти данные имеют невысокую ценность. По литературным данным, предел чувствительности световой микроскопии приблизительно 0,001 % зараженных паразитами эритроцитов [2].

Во всем мире иммуноферментный анализ на протяжении последних 30 лет был самым распространенным тестом на бабезиоз (пироплазмоз) собак [7, 8]. Однако неудовлетворительная специфика из-за перекрестных реакций между Babesia spp. и другими микроорганизмами Apicomplexa, вносили субъективность в окончательные результаты исследования и мешали крупномасштабному применению этих методик. С 2000 года для диагностики бабезиоза начал активно внедряться метод ПЦР.

Методом ПЦР можно обнаружить паразитов при паразитемии 5 бабезий в 1 мкл крови [2]. Однако, несмотря на высокую чувствительность, ПЦР будет давать отрицательные результаты, если в пределах образца не окажется ни одного паразита. Как показывает практика, ложноотрицательные результаты могут отмечаться при хроническом бабезиозе и носительстве бабезий у бродячих животных. При проведении исследования на бабезиоз (пироплазмоз) у клинически здоровых собак необходимо учитывать эту особенность. Группой авторов была проверена чувствительность ПЦР [2 ,4] в комплексном исследовании у трех собак. При этом учитывались клинические параметры, гематологические исследования, серологический титр антител к бабезиям. Присутствие ДНК бабезий определялось методом ПЦР каждый день после экспериментального заражения. После полного клинического выздоровления, диагностированного по клиническим признакам, на фоне отсутствия увеличения селезёнки, нормальной геммограммы и отсутствия бабезий при световой микроскопии на 50 день после пика паразитемии в крови этих собак была обнаружена ДНК бабезий. Данное исследование показывает возможность обнаружения очень незначительного количества ДНК возбудителя методом ПЦР; данный эксперимент, возможно, моделирует ситуацию, сравнимую с хроническим бабезиозом.

Возможность ПЦР-диагностики в обнаружении ДНК бабезий (пироплазм) при хроническом течении заболевания можно улучшить, проверяя не один, а несколько образцов крови от подозреваемого животного [4, 5].

Тяжесть течения бабезиоза у собак и кошек колеблется от субклинической инфекции, при которой развивается невыраженная анемия, до очень тяжелого течения заболевания с развитием синдрома мультиорганного расстройства и быстрой гибели. Факторами, определяющими тяжесть течения, являются вид пироплазмы, вызвавшей заболевание, порода собаки, а также особенности физиологического состояния животного, такие как возраст, иммунный статус, наличие микст- инфекций, а также преморбидное состояние животного. Все виды бабезий (пироплазм) могут вызвать лихорадку, анорексию, спленомегалию, анемию и тромбоцитопению в результате прямого повреждения и разрушения эритроцитов хозяина (гемолиз), снижения осмотической резистентности зараженных эритроцитов.

Клинические особенности бабезиоза были рассмотрены с разных сторон [1, 2, 3]. При длительном наблюдении выявлено, что из всех больших бабезий Babesia vogeli является наименее патогенной, по крайней мере, у взрослых собак, и вызывает самые мягкие формы бабезиоза, часто развиваются хронические формы заболевания. А самой патогенной бабезией является Babesia rossi, выделенная в Африке [7].

У собак, зараженных Babesia rossi, часто развиваются различные осложнения. При этом такие как гепатопатия и иммунооблусловленный гемолиз утяжеляют течение заболевания, но не вызывают смерть, если должным образом проводится терапия. В то время как ДВС-синдром, энцефалиты, острая почечная недостаточность и отек легких требуют ранней и очень интенсивной терапии. При этом прогноз остается плохим [2, 7]. Напротив, бабезиоз (пироплазмоз), вызываемый Babesia vogeli, часто протекает субклинически, но у щенков в возрасте до 3-4 месяцев заболевание может быть фатальным (рис. 1-5).

Кроме того, бабезиоз (пироплазмоз), вызываемый Babesia vogeli, тяжело протекает у собак с иммунодепрессией, получающих химиотерапию по поводу онкологических заболеваний, после хирургических вмешательств, особенно после спленэктомии.

Тяжесть течения бабезиоза (пироплазмоза), вызванного Babesia canis, Babesia gibsoni, Theileria annae и Babesia conradae, колеблется от умеренного до тяжелого, но может наблюдаться широкий диапазон тяжести клинического состояния и осложнений в зависимости от индивидуальных особенностей животного (рис. 6) [2, 6, 7].

Babesia conradae, как считают многие исследователи, более патогенна, чем B. gibsoni, приводит к более высокой паразитемии и выраженной анемии [8]. В Испании инфекция, вызванная Theileria annae, была связана с выраженным гемолизом и азотемией [2, 5]. Неклассифицированная Babesia sp. в Северной Каролине была связана с неопределенными клиническими признаками, такими как летаргия, анорексия, пигментурия и умеренная лихорадка. Данные признаки были более выражены у спленэктомированных собак [3]. Результаты лабораторных исследований отражали умеренную анемию и выраженную тромбоцитопению, которую до этого наблюдали при инфекции, вызванной Babesia vogeli [3]. Были проведены гистологические исследования, которые показали, что данные пироплазмы способны вызывать гипоксическое повреждение почек (гипоксическая и гемоглобинурическая нефропатия) в виде тубулярных изменений, и гломерулонефрит по различным механизмам [8, 9].

Клинико-патoлогическое исследование собак, пораженных Theileriaannae на Северо-Западе Испании, показало, что у 36% собак (n = 58) отмечалась азотемия; у этих животных смертность была в 10 раз выше, чем у собак без азотемии. [5]. К сожалению, в этих исследованиях не приведены данные, показывающие корреляцию тяжести заболевания с выраженностью азотемии, но высокий белок в моче, повышенный креатинин, гипоальбуминемия и гиперхолестеринемия у больных собак заставила авторов предположить, что наиболее вероятной причиной поражения почек у собак при инфекции Theileria annae является гломерулонефрит [5]. Вместе с тем исследования уровня азотемии у собак, зараженных B. rossi, показали, что уровень креатинина и мочевины не являлся прогностическим показателем возникновения острой почечной недостаточности с плохим прогнозом [11, 12]. В недавних исследованиях эндокринных маркеров болезни установлено, что отмечается корреляция между высокой смертностью собак, больных бабезиозом, вызванным B. rossi, и высоким уровнем кортизола и АКТГ, при одновременно низком уровне T4 [13].