Контрольная работа по токсикологической химии

Отборочные тесты на наркотик (представляющий опасность для жизни) на основе мочи колеблются в диапозоне от простых  иммунотестов до сложных лабораторных анализов. Скорость и достоверность  иммунотестов сделали их наиболее распространенным методом проверки мочи на содержание наркотиков, вызывающих зависимость. Тест компании SERATEC на выявление Каннабинола (ТНС) основывается на протекании специфических  иммунохимических реакций антигенов  и антител, которые используются при анализе особых соединений в  биологических средах. Этот тест является быстрым, наглядным, конкурентноспособным анализом, который может использоваться для обнаружения каннабинола  в моче человека при предельной концентрации 50 нг/мл.

ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ

Тест компании SERATEC на обнаружение  наркотиков Каннабинола (ТНС) является последовательным иммунотестом, в котором  один химически помеченный наркотик (парный наркотик) противопоставляется  наркотику, который может находиться в моче из-за сокращенного присутствия  обязательных антител. Тестирующее  приспособление содержит полоску мембраны, специально покрытую смежным наркотиком, на стержне тестирующего устройства. Окрашенная (золотистого оттенка) анти-каннабиноловая площадка парного одноклонового  коллоидного антитела находится на правом краю мембраны. В случае отсутствия наркотика в моче, раствор золотисто-окрашенного парного коллоидного антитела и моча двигаются вверх, хроматографически под действием сосудов, сквозь мембрану. Этот раствор перемещается в неподвижную зону парного наркотика в районе стержня тестирующего приспособления. Окрашенное (золотистое) парное коллоидное антитело присоединяется к парному наркотику, образуя заметную полосу реакции соединения антитела с парным наркотиком. Это объясняет образование видимого осадка в зоне теста, когда тестируемая моча не показывает содержания наркотика. Если же наркотик присутствует в моче, он/метаболит антиген борется со смежником (парным элементом) наркотика в районе стержня тестера (“тестирующего приспособления”) чтобы занять ячейку выпавшего антитела на анти-каннабиноловом моноклонном антителе-золотистом коллоидном конъюгате (парном элементе). В случае достаточного количества наркотика, он займет выпавшие структурные ячейки антитела. Это само собой предотвратит присоединение окрашенного антитела-коллоидного золотистого конъюгата к зоне парного наркотика на стержне тестера. Поэтому отсутствие окрашенного стержня в районе теста указывает на положительный результат. Кроме того, в ленту иммунохроматографической мембраны в зоне контроля (С) добавляют контрольную полоску с разностной реакцией антиген/антитело для установления правильности завершения теста. Такая контрольная полоска должна всегда присутствовать, независимо от того находится там наркотик либо метаболит. Это означает то, что моча с отрицательным показателем оставит две окрашенные полоски, а моча, которая показала положительный результат, оставит только одну полоску. Присутствие этой индикаторной полоски в зоне контроля также служит в качестве 1) доказательства того, что был обеспечен достаточный объем и 2) был достигнут необходимый приток тестируемого состава.

 

 

Вопрос  № 8:

 

Опишите судебно-химическую экспертизу смертельного отравления смесью фенобарбитала  и морфина. Дайте схему анализа  с учетом выбора оптимального объекта  исследования и методы изолирования. Проведите описание способов обнаружения  и количественного определения  с химизмом реакций, где это возможно.

 

Ответ:

 

Судебно-медицинская экспертиза

Причинами проведения судебно-медицинской  экспертизы могут быть острые отравления и морфинизм. Острые отравления морфином возможны при передозировке, с целью  самоубийства или при ошибочном  введении вместо другого лекарственного средства.

Летальная суточная доза морфина для  взрослого составляет 0,1—0,5 г. При морфинизме смертельная доза может возрастать до 3—4 г вследствие развития привыкания.

В случае отравления морфином при  судебно-медицинском исследовании трупа наблюдаются разлитые обильные трупные пятна синюшно-красного цвета, сужение зрачков (может и  не сохраняться), цианоз слизистых оболочек. При аутопсии обнаруживают венозное полнокровие внутренних органов; гистологически отмечаются признаки циркуляторных расстройств, в частности субсерозные кровоизлияния и признаки полнокровия.

Выявление морфина в биологическом материале

Морфин не разрушается в тканях и органах в течение длительного  времени. При судебно-химическом исследовании его возможно обнаружить через несколько  месяцев после захоронения. Для  судебно-химического анализа используют кровь и мочу, а также желудок, части тонкого кишечника с  содержимым, ткани печени, селезёнки, почки, лёгких, головного и спинного мозга.

Качественное обнаружение морфина  в биологическом материале проводят при помощи некоторых реактивов, для которых характерны цветные  реакции при взаимодействии с  морфином: реактив Марки (для алкалоидов опия, раствор формальдегида в концентрированной серной кислоте); реактив Манделина (раствор ванадата натрия в концентрированной серной кислоте).

Реактив Марки образует красно-фиолетовое окрашивание в присутствии морфина, этой реакцией можно обнаружить до 0,05 мкг вещества в пробе. Реактив  Манделина дает фиолетовое или бледно-розовое  окрашивание.

Для отличия морфина от кодеина  и других подобных ему алкалоидов (за исключением героина) используют хлорид железа(III). При наличии морфина в нейтральном растворе при добавлении этого реактива раствор окрашивается в синий цвет.

Количественное определение морфина  производят при помощи колориметрии.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Вопрос  № 9:

 

Судебно-химическое доказательство отравления карбофосом. Рецептор токсичности. Методы изолирования и очистки. Способы  обнаружения и количественного  определения.

 

Ответ:

 

Для обнаружения карбофоса применяют  цветные реакции и метод хроматографии  в тонком слое сорбента.

Реакция диазотирования с сульфаниловой  кислотой. Нескалько миллилитров хлороформного раствора или хлороформной вытяжки вносят в пробирку и жидкость выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 2 мл воды, 1 мл раствора диазотированной сульфаниловой кислоты и 0,5 мл 5% раствора гидроксида натрия. Появление вишнево-красной окраски указывает на наличие карбофоса в исследуемом растворе.

Реакция с реактивом Марки. В фарфоровую чашку вносят несколько миллилитров хлороформного раствора исследуемого препарата, который выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 5-10 капель реактива Марки. Появление оранжевой окраски, которая через некоторое время переходит в темно-коричневую, указывает на наличие карбофоса в исследуемом растворе.

Выполнению этой реакции мешает эмульгатор ОП-7, который содержится в технических препаратах карбофоса.

Обнаружение карбофоса методом хроматографии. На пластинку, покрытую тонким слоем силикагеля КСК, закрепленным гипсом, наносят каплю раствора исследуемого вещества и каплю раствора «свидетеля» (0,01 %-го раствора карбофоса в хлороформе). Пластинку подсушивают на воздухе, а затем вносят в камеру для хроматографирования, насыщенную парами смеси н-гексана и ацетона (2:1). После того как система растворителя поднимется на пластинке на 10 см выше линии старта, пластинку вынимают из камеры, подсушивают на воздухе и опрыскивают раствором бромтимолового синего, содержащим нитрат серебра. После подсушивания пластинки на воздухе ее вносят на 20 мин в термостат, нагретый до 60 градусов. После указанного времени пластинку охлаждают и для обесцвечивания фона опрыскивают 10% раствором уксусной кислоты. При наличии карбофоса и ряда других фосфорсодержащих органических соединений на желтом фоне пластинки появляются пятна лилового цвета.

 

 

Вопрос  № 10:

 

Причины необходимости подкисления  полярного растворителя для экстракции из биоматериала алкалоидов и других веществ основного характера. Влияет ли природа соединения, используемого  для создания рН, на эффективность  экстракции.

 

Ответ:

 

На степень извлечения алкалоидов органическими растворителями из водных растворов определенное влияние оказывают электролиты. С увеличением концентрации электролитов в водных растворах степень экстракции алкалоидов органическими растворителями повышается. Из кислых водных растворов, насыщенных NaCl или (NH₄)₂SО₄, алкалоиды экстрагируются лучше, чем из растворов, не содержащих этих электролитов, причем характер кислоты оказывает влияние на процесс экстрагирования алкалоидов: в случае подкисления щавелевой и соляной кислотами алкалоиды лучше экстрагируются из водных растворов, чем при подкислении серной кислотой.

Список  используемой литературы:

 

1. Крамаренко В.Ф. - Токсикологическая  химия – 1989
2. Швайкова М.Д. Токсикологическая химия [1975]