Автор работы: Пользователь скрыл имя, 05 Декабря 2013 в 04:57, дипломная работа
Цель исследования: выявить влияние вариабельности физиологических и цитолого-биохимических свойств ольхи кустарниковой, сформированной в условиях разного повышенного естественного радиационного фона (ПЕРФ), на радиочувствительность ее семенного потомства.
В связи с этим были поставлены следующие задачи:
1. Выявить влияние ПЕРФ на массу семян и их всхожесть.
2. Определить физиологические и цитолого-биохимические характеристики семенного потомства ольхи кустарниковой, произрастающей в условиях разного ПЕРФ.
Условные обозначения
Введение
1. Литературный обзор
1.1. Адаптация растений
1.2. Внутривидовая изменчивость растений
1.3. Физиологические адаптации
1.4. Всхожесть - как адаптация к выживанию вида
1.5. Биохимические адаптации
1.5.1. Системы обеспечения надежности ДНК и репарация
генетических повреждений
1.5.2. Адаптации растений посредством антиоксидантных систем при действии стресса
1.5.3.Ферменты супероксиддисмутаза и пероксидаза
1.5.4. Естественные антиоксиданты
1.6. Радиоустойчивость семян
1.6.1. Механизмы радиоустойчивости
1.6.2. Внутривидовая радиочувствительность
1.6.3. Влияние внутривидового адаптационного потенциала на
радиочувствительность растений
2. Материал и методики
2.1. Характеристика ольхи кустарниковой
2.2. Лабораторный посев семян
2.3. Облучение семян
2.4. Анализ кривых «доза-эффект»
2.5. Определение количества низкомолекулярных антиоксидантов в проростках
2.6. Комплексный цитолого-биохимический метод дифференциальной оценки активности генома в процессах репликации, трансляции, репарации и его общей устойчивости
2.7. Определение активности пероксидазы
2.8. Определение активности супероксиддисмутазы
2.9. Цитологический анализ
2.10. Статистическая обработка результатов
3. Результаты и обсуждение
3.1. Влияние повышенного естественного радиационного фона на массу семян и их всхожесть
3.2. Физиологические и цитолого-биохимические характеристики семенного потомства ольхи кустарниковой, произрастающей в условиях ПЕРФ
3.3 Вариабельность коэффициентов антиоксидантной защиты, общей активности генома, репарации, общей относительной устойчивости генома клеток и радиочувствительность ольхи кустарниковой
Выводы
Список использованной литературы
g-фон |
Vвыжив. прор. |
Vвыжив. прор. +250 Гр |
Vkаоз |
Vkоаг |
Vkреп |
Vkуг |
Dq, Гр* |
tga* |
20±2 |
8,5 |
29,4 |
8,7 |
31,5 |
32,7 |
12,3 |
6,0±0,6 |
0,5±0,05 |
100±10 |
17,6 |
24,5 |
17,7 |
48,5 |
28,9 |
15,3 |
10,0±1,0 |
0,8±0,08 |
300±15 |
13,3 |
21,1 |
12,0 |
24,9 |
32,5 |
16,7 |
9,8±1,0 |
0,6±0,06 |
500±25 |
32,5 |
27,9 |
9,1 |
19,3 |
22,0 |
50,0 |
15,8±0,6 |
0,4±0,04 |
700±35 |
23,5 |
14,2 |
11,9 |
31,7 |
21,9 |
21,4 |
4,0±0,4 |
0,9±0,09 |
*р ≤0,1
Следует отметить, что наибольшая вариабельность значения kоаз отмечена у клеток проростков, выросших из семян, сформированных при ПЕРФ 100 мкР/ч. Вычисленный коэффициент корреляции между вариабельностью значения коэффициента общей антиоксидантной защитой клеток и фоном произрастания материнских растений показал отрицательную зависимость (r=-0,2) и низкую статистическую достоверность различий между полученными данными (рис.3.5. А). То есть, суммарная антиоксидантная защита у проростков в целом находится на одном уровне и не зависит от фона произрастания материнских растений. Вторая часть дозовой кривой показывает обратно пропорциональную зависимость изучаемого критерия от величины дозы облучения. Количественно эту зависимость оценивали по тангенсу угла наклона (tga) второго участка дозовой кривой, величина которого была тем больше, чем быстрее изменялись наблюдаемые показатели в интервале больших доз радиации.
|
А |
|
Б |
Рис. 3.4. Вариабельность выживаемости проростков семенного потомства ольхи кустарниковой, выросшей в условиях ПЕРФ, А – без облучения, Б - острое g-облучение 250 Гр.
По оси абсцисс – радиационный фон, мкР/ч;
по оси ординат – коэффициент вариабельности (V), %
Наклонный участок дозовой кривой показывает второй вид устойчивости - резистентность геномных систем.
При сравнении вариабельностей общей активности генома и репаративной способности клеток проростков ольхи кустарниковой в зависимости от ПЕРФ произрастания также была установлена отрицательная статистически достоверная корреляция (r = - 0,6 и - 0,8, соответственно; рис.3.5 Б и В). Следует отметить, что вариабельность значения kоаг при фоне 100 мкР/ч на 50% выше контрольного значения. Значения tga по мере роста ПЕРФ увеличиваются на 20-80 % (кроме варианта 500 мкР/ч; табл.3.3). Ранее проведенные исследования общей функциональной активности генома у проростков растений показали, что у большинства исследованных центрально- и южноякутских видов растений повышенная функциональная активность генома приводит к снижению радиоустойчивости (в диапазоне доз, превышающих квазипороговую), по сравнению с уральскими экоформами (Журавская и др, 2006).
На рис.3.5. Г показано изменение вариабельности интегральной общей относительной устойчивости генома клеток проростков, семенного потомства родительских растений, длительное время существующих в условиях ПЕРФ. Показано, что с повышением фона произрастания происходит увеличение вариабельности этого показателя (r=0,5).
Следует отметить Vkуг при γ-фоне 500 мкР/ч, где показатель вариабельности в 4,1 раза выше чем у контроля, что отразилось на значении квазипороговой дозы (Dq=15,0 Гр), которая в 2,5 раза выше, относительно контроля. Можно предположить, что при этом фоне произрастания эволюционно создались благоприятные условия для различных вариаций характеристик растений (физиологических и биохимических). И это несмотря на то, что вариабельность kаоз, kоаг kреп ниже контрольного значения (табл.3.3). Вероятно, подобное сочетание вариабельностей выше перечисленных коэффициентов при γ-фоне 500 мкР/ч является наиболее оптимальным для существования ольхи кустарниковой, длительное время испытывающей действие хронического γ-облучения естественной радиацией и вызывает высокую радиоустойчивость семенного потомства, относительно других значений ПЕРФ.
|
A |
|
Б |
|
В |
|
Г |
Рис. 3.5. Вариабельность антиоксидантной защиты (А - kаоз), общей активности генома (Б - kоаг), репарации (В - kреп) и общей относительной устойчивости генома (Г - kуг) клеток проростков семенного потомства ольхи кустарниковой, выросшей в условиях разного ПЕРФ
По оси абсцисс – радиационный фон, мкР/ч;
по оси ординат – коэффициент
вариабельности (V),
Выводы
1. Установлено уменьшение и «стандартизация» средней массы семян ольхи, выросшей в условиях 300 мкР/ч. Выявлено появление бимодальных вариационных кривых всхожести семян растений, выросших в условиях ПЕРФ, что говорит о нестабильности геномов индивидуумов, составляющих эту выборку.
2. Установлено, что вариабельность выживаемости проростков растений, выросших в условиях γ-фона от 100 до 700 мкР/ч, изменяется нелинейно, во всех вариантах значение вариабельности выше в 2÷3,8 раза, относительно контроля. Вычисленный коэффициент корреляции (r=0,7) имеет положительное значение и указывает на достоверность этого явления С увеличением экспозиционной дозы произрастания материнских растений уменьшается вариабельность выживаемости проростков на 10–50%. В варианте с облучением семян наблюдалась обратная корреляция (r = - 0,6) между вариабельностью признака и фоном произрастания семенного потомства.
3. Установлено, что
вариабельность общей
4. Показано, что вариабельности активности генома и репаративной способности клеток проростков ольхи кустарниковой в зависимости от ПЕРФ произрастания имеют отрицательную статистически достоверную корреляцию (r = - 0,6 и - 0,8), что приводит к увеличению на 20-80 % значений tga (кроме варианта 500 мкР/ч).
5. Показано,
что с ростом фона
Список использованной литературы