Химико-токсикологическое определение при отравлении цитостатистиками

С=О – карбонильная группа,

N=O – нитрозогруппа,

N=N – диазогруппа,

C=N – азометиновая  группа,

C6H6 – бензольное ядро.

Иногда в молекуле наряду с хромофорами находятся  ауксохромные группы, которые не обладают собственным поглощением, но усиливают поглощение хромофоров. К таким группам относятся:

- NH2 – аминогруппа,

- OH – гидроксильная  группа,

- OCH3 – метоксигруппа,

- N(CH3)2 – диметиламиногруппа,

- Cl, Br, F, I –галогены.

Идентификацию веществ в условиях скрининга проводят по спектрам поглощения. Кривая зависимости светопоглощения от длины волны 

 

называется спектром поглощения и является качественной характеристикой вещества.

Характер спектра может  меняться в зависимости от:

- природы растворителя,

- рН раствора для  веществ, способных к ионизации,  если молекулярная и ионизированная  формы обладают различным светопоглощением.

Получение спектров поглощения в различных условиях повышает информативность  метода.

Наряду с идентификацией веществ по характеру спектра можно провести их количественное определение, измеряя интенсивность поглощения в области максимума. Расчет концентрации вещества проводят по уравнению Бугера-Ламберта-Бера:

D = Е * L * C, где

D – оптическая плотность,

Е – удельный показатель поглощения 1% раствора при толщине  слоя 1 см,

L – толщина светопоглощающего  слоя,

C – концентрация вещества (%).

Измерение абсорбции D проводят на спектрофотометрах различных  моделей, дающих монохроматическое  излучение, т.к. закон Бера справедлив только для монохроматического излучения.

При проведении скрининга  сравнивают спектры поглощения исследуемого вещества со спектрами эталонов.

Достоинства спектральных методов анализа:

- универсальность, позволяющая  анализировать различные классы химических соединений,

- высокая чувствительность (мкг),

- информативность.

К недостаткам метода можно отнести необходимость  высокой степени 

 

чистоты исследуемых  веществ, поэтому рекомендуется  сочетать спектральные методы анализа с предварительной очисткой веществ, например, с помощью ТСХ или других методов.

 

 

 

2. Иммунохимические методы в скрининге лекарственных веществ. Иммунохимический анализ (ИХА)

 

Современные иммунохимические методы анализа лекарственных и наркотических  средств отличаются такими особенностями, как высокая чувствительность, специфичность, экспрессность, простота выполнения. Реакция проводится непосредственно в биожидкости, поэтому не требуется применять изолирования и дополнительной очистки. Методы ИХА позволяют одновременно анализировать большое число проб, поэтому они удобны для целей экспресс-диагностики.

В то же время, широкое  применение этих методов сдерживается тем, что для них требуются  особые реагенты (особо чистые сыворотки, ферменты и т.п.), которые необходимо закупать у иностранных поставщиков.

В основе всех методов  ИХА лежит специфическая реакция  «антиген – антитело», где антигеном  является определяемое вещество, чужеродное для организма. При введении в  живой организм чужеродного соединения (антигена АГ) образуются антитела АТ, которые сразу связываются с антигеном. Образующийся комплекс АГ+АТ выпадает в осадок. Реакция АГ+АТ является специфичной и протекает количественно, что используется и для целей количественного определения.

Для детектирования результатов реакции один из компонентов (антиген или антитело) метят специальной меткой.

 

 

 

 Таблица 1. Зависимость природы метки и способа ее детектирования от различных видов ИХА

Метод	Способ детектирования
Радиоиммунный анализ (РИА)	Радиоактивность
Иммуноферментный анализ (ИФА)	Ферментная активность
Поляризационный флюороиммуноанализ (ПФИА)	Интенсивность флюоресцентной поляризации
Люминесцентный иммуноанализ (ЛИА)	Интенсивность люминесценции

Существуют и некоторые  другие методы. Наибольшее распространение в химико-токсикологическом анализе лекарственных и наркотических средств получили РИА и ИФА. В ИФА в качестве метки для антигенов (определяемых веществ) используются ферменты. Как правило, это различные оксидазы, способные окислять специальное химическое вещество – хромогенный субстрат, с образованием окрашенных продуктов. По интенсивности окраски и судят о количестве искомого вещества.

В РИА используется аналогичный  принцип, только в качестве метки  используется радиоактивный изотоп. Измеряя радиоактивность выделившегося изотопа, определяют количество искомого вещества.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

Цитостатическая болезнь -своеобразное полисиндромное заболевание, возникающее в связи с воздействием на организм цитостатических факторов и обусловленное гибелью главным образом делящихся клеток, в первую очередь костного мозга, эпителия пищеварительного тракта, кожи; нередкое проявление цитостатической болезни-поражение печени.

Этиология: прием цитостатиков, используемых в лечении опухолей или в качестве иммунодепрессантов, воздействие ионизирующей радиации (в этом случае говорят о лучевой болезни). Патогенез: гибель больших количеств делящихся клеток с опустошением костного мозга, нарушением целостности эпителия пищеварительного тракта, выпадением волос, а также поражение разной степени всех органов и систем. Развивающиеся у больных агранолицитоз, тромбоцитопения, язвенно-некротические изменения желудочно-кишечного тракта могут осложняться вторичными процессами: ангиной, сепсисом, геморрагиями, прободением кишечника и т. п. Важнейшую роль в патологическом процессе играют доза цитостатика и "мощность" воздействия, т. е. количество препарата, принятого в единицу времени (чем выше разовая доза цитостатика, тем тяжелее поражение). Широкое распространение цитостатиков приводит к случайным отравлениям ими детей, использованию с суицидальной целью, употреблению при истерии.                                                                                                              Клиническая картина складывается из ряда последовательно развивающихся синдромов. Вначале появляется отек слизистой оболочки полости рта, который в дальнейшем может смениться гиперкератозом (белесоватые трудно снимаемые наложения главным образом на деснах), вслед за оральным поражением, иногда почти одновременно с ним, в крови снижается число лейкоцитов, тромбоцитов, ретикулоцитов. В отличие от

 

 иммунных агранилицитоз гранулоциты, уменьшаясь в числе, не исчезают совсем.                                                                                                                     На высоте гранулоцитопении развивается инфекция (ангины, пневмонии, абцессы на местах инъекций и т. п. ); глубокая тромбоцитопения сопровождается кровотечениями из носа, желудочно-кишечного тракта, кожными геморрагиями. При отсутствии кровопотерь на высоте аграналициоза выраженной анемии не бывает, она появляется позже. В костном мозге - опустошение клеточного состава. Поражение желудочно-кишечного тракта проявляется некротической энтеропатией.              Отдельные системы организма поражаются различными цитостатиками неодинаково . Циклофосфан вызывает выраженную иммунодепрессию, быстро развивающийся афанулоцитоз (непродолжительный), общую неглубокую тромбоцитопению, поражение кишечника. Миелисан напротив, почти не вызывает иммунодепрессии, почти не поражает кишечник; афанулоцитоз и тромбоцитопения появляются поздно (через 2 нед после отравления), но бывают очень глубокими и продолжаются несколько недель. Рубомицин и адриабластин при передозировке могут вызывать тяжелый миокардит. Винкрисан почти не поражает фанулоцитарный и тромбоцитарный ростки, но вызывает иммунодепрессию, часто полиневрит. Гепатотропное действие оказывают преимущественно циклофосфан 6-меркаптопурин. Одно из частых проявлений цитостатической болезни - септицемия: высокая температура, иногда озноб, бактериемия (патогенная микрофлора) при отсутствии очага инфекции.                                         Пневмонии отличаются малой выраженностью клинических признаков: может быть сухой кашель, рентгенологические данные скудные, хрипов мало, они влажные мелкопузырчатые, иногда крепитирующие. Лечение аналогично таковому при острой лучевой болезни. Преднинизолон при цитостатической болезни не показан. Обязательны изоляция больных и

 

соблюдение условий  асептики.

Решающую роль играют антибактериальная  терапия, переливание тромбоцитов  при тромбоцитопеническом геморрагическом  синдроме. При отсутствии выраженной анемии переливание крови не показано. Инъекционные препараты вводят только внутривенно. Прогноз определяется тяжестью поражения. Установлено, что без повторного введения цитостатических препаратов болезнь не рецидивирует.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ЛИТЕРАТУРА:

1. Авцын А  .П. и др. Микроэлементозы человека. -М.: Медицина, 1991 
2. Альберт А. Избирательная токсичность. Физико-химические основы 
терапии. Пер. с англ. В 2-х томах. - М: Медицина, 1989., 400 с. 
3. Андруа Дж., Бримблекумб П., Джикелз Т., Лисе П. Введение в 
химию окружающей среды. Пер. с англ.-М.:Мир. 1999., 271 с. 
4. Безопасное применение пестицидов. 14 доклад Комитета экспертов 
ВОЗ. Женева-Москва: ВОЗ - Медицина, 1996., 40 с. 
5. Бертрам Г. Катцунг. Базисная и клиническая фармакология: в двух 
томах. - М. -СПб.: Бином - Невский диалект, 1998. 
6. Богоявленский В.Ф., Богоявленский И.Ф. Острые отравления.- 
М.:Гигаюкрат.-1999.- 158с. 
7. Варфоломеев С. Д., Гуревич К. Г. Биокинетика: практический курс. - 
М. >ФАИР-ПРЕСС, 1999.- 720 с. 
8. Государственная фармакопея СССР XI Издание. - М. Медицина. - 
1987-1990. В. 1-2. 
9. Бертрам Г. Катцунг. Базисная и клиническая фармакология: в двух 
томах. - М. -СПб.: Бином - Невский диалект, 1998. 
10. Богоявленский В.Ф., Богоявленский И.Ф. Острые отравления.- 
М.:Гигаюкрат.-1999.-158 с. 
11. Варфоломеев С. Д., Гуревич К. Г. Биокинетика: практический курс. - 
М. :-ФАИР-ПРЕСС, 1999.- 720 с. Белова А.В. Руководство к практическим занятиям по токсикологической химии. М., «Медицина», 1976 
12. Золотев Ю.А. Основы аналитической химии в 2- томах.- М.: Высшая 
школа.-2002 
13. Крамаренко В.Ф. Токсикологическая химия. Киев, "Высшая школа", 1989, 
448с. 
                                                                                                                             

 

14. Лужников  Е. А. Клиническая токсикология. - М.: Медицина, 1999. - 415с. 
15. Лужников Е.А., Костомарова Л.Г. Острые отравления. М., "Меди- 
цина",2000 
16. Лурье Ю. Ю. Справочник по аналитической химии,- М.: Медицина,-480с. 
17. М.Ё. Маркова, В.В. Афанасьев, Э.К. Цыбулькин. Клиническая 
токсикология детей и подростков. С.-П., «Интермедика», «Специальная 
литература», 1999, в 2-х томах. 
18. Основы аналитической токсикологии (каталог публикаций ВОЗ) / Р. 
А. Брейтуйэт, С. С. Браун, Б. Уиддоп и др. - М.: Медицина, 1997. - 364с. 
19. Парк Д. Биохимия чужеродных соединений.-пер.с англ.-М.: Мир, 1977.- 
567с. 
20. Профилактика и лечение отравлений под ред. Дж.А.Хенри и Х.М. 
Уайзман- Женева: ВОЗ,-1998.- 339 с. 
21. Сергиенко В.И., Бондарева И. Б. Математическая статистика в 
клинических исследованиях.- М.: Гэотар , 2000.- 256 с. 
22. Сергиенко В.И., Джеллифф Р., Бондарева И Б. Прикладная 
фармакокинетика: основные положения и клиническое применение.- 
М.: Изд-во РАМН, 2003 -208с. 
23. Скальный А.В. и др. Биоэлементы в медицине - М.: Издательский дом 
«ОНИКС», 2004, 272с. 
24. Справочник по токсикологии и гигиеническим нормативам (ПДК) 
потенциально опасных химических веществ. Под ред. Кушневой В. 
С., Горшковой Р. Б. М.: Изд. AT, 2000.-272 с. 
25. Тюкавкина Н.А. Органическая химия в 2-х томах . - М.: Дрофа, 2003 
26. Токсикологическая химия. Учебное пособие в 2-х частях. Составители: 
Плетенева Т.В., Борисова Е.Я. и др. - Изд-во РУДН, 2000.- 352 с. 
27. Учебно-методические разработки для самостоятельной подготовки и 
выполнения лабораторных занятий по токсикологической химии / под ред. 
                                                                                                                           

Б.Н. Изотова. Изд-во ММА, Часть1и2, 1989 / 
28. Учебно-методическая разработка. "Химико-токсикологической анализ на 
группу веществ изолируемых минерализацией"./Кузнецова Н.И., Изотов 
Б.Н. ММА им. И.М. Сеченова, 1996 
29. Харитонов Ю.Я. Аналитическая химия в 2-х томах - М.: Высшая школа, 
2001 
30. ШвайковаМ.Д. Токсикологическая химия. М., «Медицина», 1975