Предмет микробиологии. Роль микробиологии в работе провизора

Виды болезней растений

1. Бактериальные:

• гниль (сухая – ткани превращаются в порошкообразную массу, мокрая – ткани приобретают сметанообразную консистенцию),

• пятнистости (некрозы) – образуются пятна на листьях, стеблях,

• язвы (антракнозы) – трещины на листьях, плодах, стеблях,

• опухоли – местное разрастание тканей (ветвей, корней),

• увядание – сосудистое заболевание, приводит к гибели растения.

2. Грибковые:

• парша – появление трещин, уплотнения пробковидной консистенции,

• мучнистая роса – белый мучнистый налет на листьях, плодах,

• ржавчина – желтые или оранжевые участки скопления спор грибов на листьях, плодах,

• чернь – черная пленка на побегах, плодах, которая легко удаляется.

3. Вирусные:

• мозаика – мозаичная окраска листьев в результате разрушения хлорофилла – бледно окрашенные пятна чередуются с участками нормальной окраски.

• желтуха – пожелтение листьев, нарушение обмена веществ, раковые наросты, карликовость, кустистость.

Пути передачи инфекционных заболеваний растений: через почву, воду, воздух и т.д.

Bходные ворота: естественные (чечевички, нектарники, устьица, корневые волоски), искусственные (повреждения растений под действием физических факторов, ферментов агрессии).

Механизмы защиты растений:

1. наследственные (изолированность сосудистой системы, антибиотические вещества растений);

2. приобретенные: а) собственные, б) обусловленные действием человека.

Методы защиты растений:

Карантинные – защита территории страны от ввоза больных растений, плодов, семян.

Физико-химические: удаление больных растений, их частей, сжигание листьев, дезинфекция почвы, протравливание семян и др.

Биологические: лечение антибиотиками, селекция, вакцинация (обработка семян экстрактами из возбудителей).

Высушенные растения и их части, не подвергнутые химической обработке, называются растительным лекарственным сырьем (РЛС). РЛС загрязняется микробами во время: сбора, сушки, измельчения, стандартизации, упаковки, хранения. Чаще всего порче подвергаются плоды, ягоды, корневища, богатые водой и углеводами. Меньше подвергаются инфицированию сухие листья, корни, кора, содержащие мало питательных веществ. Количество микробов в 1 г сырья называется микробным числом (МЧ). Оно определяется методом посева смыва на МПА (для выявления бактерий), на плотную среду Сабуро (для выявления грибов).

Признаки микробной порчи: изменение цвета, неприятный запах, гниение, размягчение паренхимы, плесень. В инфицированном сырье уменьшается количество БАВ, накапливаются токсины. Такое сырье не только бесполезно, но и оказывает вредное действие.

Меры предупреждения: сбор здоровых частей растений, тщательная очистка от почвы, правильная организация всех этапов работы с РЛС (сушка и хранение в тени при хорошей вентиляции и пониженной влажности, сырье необходимо перекладывать, проводить дезинфекцию).

Стерильные и асептически изготовляемые ЛФ

 

        Назад к плану лекции

С микробиологической точки зрения готовые лекарственные средства по уровню микробной чистоты делят на стерильные и нестерильные. Стерильные лекарственные средства (СЛС) не должны содержать жизнеспособных микроорганизмов на всех стадиях развития. Стерильные лекарственные формы готовят в асептических условиях с последующей стерилизацией в конечной упаковке. К стерильным лекарственным средствам относятся препараты: для инъекций и инфузий; офтальмологические (глазные капли и мази); наносимые на открытые раны, ожоги; для введения в полости тела, которые не содержат микроорганизмов (полость среднего уха, матки, мочевого пузыря); лекарственные препараты для новорожденных.

Асептические лекарственные формы готовят в асептических условиях без стерилизации в конечной упаковке: препараты для детей до 1 года, глазные мази на стерильной основе, лекарственные средства с антибиотиками, термолабильные лекарственные средства

Гарантией качества СЛС по показателю «стерильность» является создание асептических условий при их изготовлении. Для этого предусмотрены специальные методы работы в асептических блоках аптек, микробиологических боксах, а также использование антисептики, дезинфекции, стерилизации. Эти мероприятия регламентированы приказом N 309 от 20.10.97 "Об утверждении инструкции по санитарному режиму аптек"), Методическими указаниями по изготовлению стерильных растворов в аптеках, 1994 г.

Правила изготовления СЛС включают следующие требования

• Требования к помещению: стерильные лекарственные формы готовят в асептическом блоке. Для обеззараживания воздуха используются бактерицидные лампы. Уборка блока производит-1 раз в смену с использованием дезинфицирующих растворов: 1% хлорамин Б, 0,75% хлорамин Б + 0,5% моющего средства, 3% H2О2 + 0,5% моющего средства, 6% H2О2, Эстостерил-1 (0,3-0.5% водный раствор надуксусной кислоты), Гибитан (20% водный раствор хлоргексидина биглюконата, из которого готовят рабочий раствор), Лизоформин (альдегид+ЧАС), Жавелион-Хлор, Аэродезин ;

• Требования к оборудованию, вспомогательным материалам: аптечная посуда, пробки, санитарная одежда, инструменты стерилизуется паровым методом (120º - 45 мин. – 1,1 атм. или 132º - 20 мин. – 2 атм.) или горячим воздухом (180º, 60 мин). ;

• Вода используется свежеперегнанной и хранится в закрытых емкостях. Качество воды регламентирует НТД: ГОСТ, Санитарные правила и нормы (2.1.4.1074-01), Фармакопейные статьи. Вода очищенная /ФС 42-2619-89/ должна соответствовать требованиям на питьевую воду, храниться не более 3 суток, содержать не более 100 КОЕ/мл. Вода для инъекций /ФС 42-2620-89/ должна соответствовать испытаниям на воду очищенную, быть апирогенной, содержать не более 10 КОЕ/мл, храниться не более 24 часов ;

• Требования к персоналу. При работе в асептическом блоке провизор в шлюзе - надевает специальную обувь, бахилы, моет руки, надевает стерильный халат, шапочку, марлевую повязку, бахилы, дезинфицирует руки с помощью антисептических препаратов: этиловый спирт 76% йдопирон 1%, 0,5% раствор хлоргексидина биглюконата в 70% этаноле (гибитан), хлорамин 0,5%, дегмин (1% водный раствор ЧАС и высокомолекулярных спиртов), клиндезин, лизанин.

Объем микробиологических исследований Стерильные лекарственные средства исследуют на стерильность. Исследования проводятся методами, рекомендованными Фармакопеей в асептических условиях с помощью: прямого посева и мембранных фильтров.

Метод прямого посева Контроль стерильности лекарственных средств проводят с использованием жидких питательных сред. Для выявления бактерий используют тиогликолевую среду. Для обнаружения грибов применяют среду Сабуро. Учет результатов проводят визуально после выдержки в термостате в течение 7—14 суток при 30—35ºС (для бактерий), 20-25ºС (для грибов). Признаком стерильности является отсутствие роста микробов.

Метод мембранных фильтров При определении стерильности лекарственных средств, обладающих выраженным противомикробным действием, и лекарственных средств, разлитых в ёмкости более 100 мл, используют метод мембранной фильтрации. Инъекционные и инфузионные растворы должны быть не только стерильными, но и не содержать пирогенных веществ и механических частиц. Пирогены — вещества, вызывающие повышение температуры тела. Источниками пирогенов являются компоненты микробных клеток, сохранившихся после стерилизации (липополисахариды (эндотоксины) клеточных стенок грамотрицательных бактерий). Основным методом определения пирогенности СЛС, предусмотренным фармакопеями всех стран, является биологический метод in vivo и ЛАЛ-тест, который проводится in vitro.

Микрофлора нестерильных ЛФ

 

        Назад к плану лекции

Основные нестерильные лекарственные формы: настои, отвары, таблетки, растворы, настойки, мази, пленки, порошки, капли и др.

В нестерильных лекарственных средствах (НЛС) допускается содержание определенного количества непатогенных микроорганизмов. Нормируемое количество микробных клеток в НЛС зависит от назначения, происхождения и агрегатного состояния (жидкая или твердая форма) лекарственного средства. Контаминация ГЛС может происходить при нарушении технологии их изготовления, правил хранения и контроля.

Источники микробной контаминации

1. Сырье может быть природного происхождения (растительное, животное) и синтетическое. Сырье животного происхождения используют, например, для получения панкреатина (поджелудочная железа свиней), тималина (тимус), тиреоидин (щитовидная железа крупного рогатого скота). Органы и ткани животных могут содержать большое количество микробов (бактерии, вирусы). Многие микробы длительно сохраняются в сырье при замораживании.

2. Растворитель: вода, спирт (ЛП на спирте содержат меньше микробов за счет бактерицидного действия последнего).

3. Упаковка: различают первичную (индивидуальную), вторичную, объединяющую несколько первичных упаковок и транспортную. Первичная упаковка непосредственно контактирует с препаратом (флаконы, ампулы из стекла, бумага, пленки и т.д.). Упаковочные материалы с гладкой непроницаемой поверхностью имеют низкий уровень микробного загрязнения (стекло, алюминиевая фольга).

4. Персонал: попадание микробов от персонала может происходить воздушно-капельным, воздушно-пылевым путями с выделениями из ВДП, контактным путем с рук, волос, одежды. (В течение 1 мин. человек, не двигаясь, выделяет в окружающую среду 10·103 механических и микробных частиц, в положении сидя с легкими движениями рукой и головой – до 500·103, при интенсивной работе – до 106).

5. Воздух и технологическое оборудование.

6. Вспомогательные вещества (наполнители – глюкоза, крахмал, желатин, масло какао).

7. Посуда.

8. Рецепты.

Чаще в лекарственных препаратах встречаются: стафилококки, бациллы, сарцины, споры плесневых и дрожжевыхгрибов.Количество микробов в лекарственных препаратах в значительной степени зависит от вида сырья. Наибольшее количество микробов обнаруживается в настоях и отварах, т.к. они богаты питательными веществами. Меньше микробов в настойках, они готовятся на этиловом спирте, который обладает противомикробным действием.

Признаки порчи настоев и отваров:

1. изменение цвета,

2. помутнение, осадок,

3. пленка,

4. неспецифический запах.

Признаки порчи таблеток, порошков:

1. изменение цвета,