Злокачественного отек

 

Министерство сельского хозяйства Российской Федерации

ФГБОУ ВПО Костромская государственная сельскохозяйственная академия

Кафедра: эпизоотологии, паразитологии и микробиологии

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Курсовая работа по дисциплине «Ветеринарная микробиология и микология»

 

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО ОТЕКА

 

 

       

                                                                 

Выполнила: студентка 2 курса

Факультета заочного обучения 
Специальность «Ветеринария»

Юрьева Ольга Михайловна

 

 

Научный руководитель:

к.в.н., доцент

Парамонова Наталья Юрьевна

                

 

 

                                                                    

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Караваево 2015

 

Содержание

Введение…………………………………………………………………………...3

Обзор литературы…………………………………………………………...…….4

Собственные исследования…………………………………………………......15

Этапы идентификации и типизации микроба………………………………….16

Заключение…………………………………………………………………..…...24

Профилактика злокачественного отека крупного рогатого скота……………25

Документы регламентирующие исследования………………………………...26

Список используемой литературы……………………….….………………….27

Приложение……………………………………………………………………....28

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Введение

В данной курсовой работе я хочу  рассмотреть тему «Злокачественного отек» у крупного рогатого скота на примере хозяйства ОАО СХП «Вощажниково» Борисоглебского района Ярославской области.

Данное заболевание часто регистрируется в хозяйствах занятых разведением, содержанием крупного рогатого скота, овец, свиней, лошадей нанося хоть и небольшой экономический ущерб, но становясь стационарным в данном хозяйстве является причиной многих ветеринарно-санитарных  и хозяйственных ограничений, наложенных на данное сельхоз. предприятие.

В ОАО СХП «Вощажниково» данное заболевание проявилось на родильном отделении в сентябре 2012 года. В данное время в хозяйстве происходили массовые отелы и родильные боксы не очищались и не дезинфицировались должным образом, что привело к вспышке злокачественного отека.

За последние годы доказано широкое распространение в природе возбудителей злокачественного отека. Отдельные виды клостридий в норме находятся в кишечнике жвачных животных. Сlostridium novyi, по более раним  источникам b. oedematiensmaligni, был обнаружен в 64% из 200 проб земли в различных частях средней Европы. Так, Цейсслер неоднократно выделял Сlostridium novyi в случаях газовых отеков свиней, лошадей, овец и крупного рогатого скота.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Обзор литературы

Злокачественный отек (лат. — Oedemamalignum, septicaemiagangrenosa; англ. — Malignantoedema, gasgangrena, bighead; раневой газовый отек, газовая гангрена) — остро протекающая неконтагиозная раневая токсикоинфекция животных и человека, вызываемая группой патогенных клостридии и характеризующаяся воспалительными отеками с образованием газов, некрозом пораженных тканей и интоксикацией организма [6].

Злокачественный отек животных и человека известен с древнейших времен. В медицинской литературе его чаще описывают под термином «газовая инспекция», или «газовая гангрена». Научное описание болезни сделал Р. Кох (1881), он же выделил один из его возбудителей — Сlostridiumnovyi. Луи Пастер и Жубер выделили Сlostridiumsepticum в 1887 году.

К заболеванию восприимчивы овцы, крупный рогатый скот, свиньи и некоторые другие виды животных. Резервуаром возбудителя инфекции является почва и навоз. Болезнь встречается чаще всего в виде спорадических случаев, а в отдельных регионах - в виде небольших вспышек. Основным условием развития злокачественного отека является ранение, оперативное вмешательство, кастрация, стрижка, обрезка хвостов. В ветеринарной практике нередки случаи возникновения болезни после проведения вакцинации животных, когда она осуществлялась нестерильными иглами и после инъекции не дезинфицировалась надлежащим образом. Кроме того, развитие болезни возможно после тяжелых родов, отделения последа, выпадения матки и т.п.

Злокачественный отек - заболевание полимикробной этиологии. В развитии инфекционного процесса основную роль играют следующие виды бактерий из рода клостридиум: Clostridium septicum, Clostridium novyi, Clostridium perfringens, Clostridium histolyticum, Clostridium sordellii. У сельскохозяйственных животных возбудителем заболевания чаще является C.septicum, нередко наблюдается смешанная инфекция. У овец возбудителем может быть C.chauvoei (Ф. И. Каганф, Л. В. Кириллов, 1976). В пораженных тканях иногда обнаруживают протеолитическую анаэробную бактерию C.sporogenes, которая способствует гнилостному распаду тканей, в результате чего осложняется течение болезни. Выделяют и сопутствующую аэробную микрофлору (стрептококки, стафилококки, кишечная палочка, протей).

1.Clostridium septiсum

Clostridium septiсum (Vibrion septique) - анаэробная бактерия, выделена из трупа коровы Пастером и Жубертом в 877 г.

Морфология и тинкториальныесвойства. C. Septicum - полиморфная грамположительная бескапсульная подвижная палочка (перитрих), длиной 2-10 мкм и шириной 0,8-2 мкм. Споры овальной формы, располагаются центрально или субтерминально, образуются в культурах и трупе. В мазках из культур находят отдельные палочки, цепочки и нити. В препаратах-отпечатках из серозных покровов печени и других органов обнаруживают длинные нити [2].

Культивирование. C.septicum - строгий анаэроб. Оптимальная температура 37°С, рН 7,6. На среде Китт-Тароцци растет интенсивно, через 16-24 ч наступает равномерное помутнение среды с газообразованием. Через 48 ч микробы оседают на дно и бульон просветляется. При росте в мозговой среде почернения не наступает, но образуется газ. В агаре столбиком растет в виде нежных хлопьеподобных колоний диаметром 1 -2 мм с уплотненным центром и радиально отходящими перепутанными нитями, а на поверхности кровяного агара с глюкозой (агар Цейсслера) - в виде кружевных сплетений нитей-арабесок с зоной гемолиза. Молоко свертывается медленно (через 3 -5 дней), пептонизации сгустка казеина нет.

Биохимические свойства. Ферментирует с образованием кислоты и газа глюкозу, лактозу, галактозу, мальтозу, левулёзу и салицин, не разлагает глицерин и маннит. Очень редко разлагает сахарозу. Это свойство используется при дифференциальной бактериологической диагностике для идентификации C. Septicum и C. chauvoei, так как последний микроб сахарозу ферментирует постоянно. Разжижает желатину и свертывает лакмусовое молоко с образованием кислоты и газа. Не переваривает коагулированную сыворотку и яичный белок, не образует индола, обычно не восстанавливает нитраты в нитриты и не вырабатывает большого количества сероводорода.

Устойчивость. Вегетативные формы микроба быстро гибнут под влиянием различных факторов внешней среды, они довольно чувствительны к кислороду. Споры относительно устойчивы и выдерживают кипячение в течение 2-15 мин. В почве этот микроб может вегетировать и сохраняться годами.

Патогенность. C. septicum синтезирует высокоактивный экзотоксин сложного состава. Токсин может быть выделен из фильтрата культур на бульоне Мартена (рН 7,6 -7,8), на средах из кислотного и ферментативного гидролизата казеина. В составе токсина обнаруживают четыре растворимых компонента (α, β, γ, δ). Альфа-токсин - кислородостабильный летальный, некротический и гемолитический фактор. Бета-токсин - кислородолабильный гемолизин. Является ферментом дезоксирибонуклеазой. Вызывает быстрый гемолиз. Нейтрализуется антисывороткой C. perfringens. Гамма-токсин - фермент гиалуронидаза. Дельта-токсин - кислородолабильный гемолизин, лизирующий эритроциты барана, лошади и человека. В культуральных фильтратах этого микроба, кроме указанных токсических компонентов, обнаружены еще фибринолизин и коллагеназа, которые могут играть некоторую роль в деструктивных процессах при газовой гангрене.

Антигенная структура. В составе C. septicum выделены О- и Н - ан-тигены. Установлено, что имеется общность споровых антигенов у С. septicum и C. chauvoei, но они могут четко дифференцироваться по О -антигену. С помощью Н - агглютинации внутри вида C. septicum выявлено шесть серологических групп [7].

2.Clostridium novyi

Clostridium novyi (C. oedematiens) выделен Нови в 1883 г. из трупа морской свинки, его этиологическая роль как возбудителя газовой гангрены установлены в 1915 г. Вейнбергом и Сегеном.

Морфология и тинкториальные свойства. Крупная полиморфная прямая или слегка изогнутая с закругленными, иногда обрубленными краями палочка, длиной 4 -8 мкм и шириной 1 -1,5 мкм; бактерии могут располагаться короткими цепочками по 3 -5 и более клеток. Капсул не образует. В молодых культурах палочки подвижны (перитрихи), в присутствии кислорода подвижность быстро теряется. Образует круглые или овальные субтерминальные споры, которые обычно обнаруживаются через 24 ч роста культуры. Процесс спорообразования более интенсивный на щелочных средах, обедненных питательными веществами и разлагаемыми углеводами. Хорошо окрашиваются спиртоводными растворами обычных анилиновых красок. Молодые вегетативные клетки грамположительные, из старых культур - грамотрицательные.

Культивирование. C. novyi - один из наиболее строгих анаэробов. Оптимальная температура 37°С, рН 7,8. На среде Китта - Тароци дает обильный рост со сплошным помутнением и слабым газообразованием. Культуры издают неприятный запах. На кровяном агаре с глюкозой растет в виде шероховатых серого цвета плоских колоний с неправильными бахромчатыми краями и отростками, образующими на периферии колоний параллельные петли. Колонии окружены зоной гемолиза. Мозговая среда не чернеет. Молоко свертывается медленно с выпадением мелких хлопьев, пептонизация не наступает.

Биохимические свойства. Сахаролитические свойства выражены слабо и различны у отдельных типов. C. novyi типа А, В и С ферментирует глюкозу, фруктозу и мальтозу, а тип D только глюкозу; глицерин разлагают все типы, кроме некоторых штаммов типа В. Способность разлагать углеводы изменяется в зависимости от штамма. Протеолитические свойства выражены слабо. Желатина разжижается медленно, свернутая сыворотка крови, вареное мясо, казеин и свернутый яичный белок не разжижаются. Нитраты восстанавливаются в аммиак без прохождения стадии нитритов. Сульфаты не восстанавливаются в сероводород, индол не образуется.

Устойчивость. Вегетативные формы по своей устойчивости не отличаются от других видов патогенных анаэробов. Они погибают от воздействия прямых солнечных лучей через 24 -48 ч, ультрафиолетовых лучей через 20 -30 мин. Нагревание до 80°С убивает их за 20 мин, кипячение -за 5 мин. Споры могут сохраняться в почве в течение 7 -8 лет и выдерживать кипячение 1 -2 ч [9].

Патогенность. Злокачественный отек, обусловленный C. Novyi может возникать вследствие любого ранения, инфицированного этим возбудителем. Исход болезни, как правило, смертельный.

C. novyi в организме и при росте на элективных питательных средах синтезирует и выделяет очень активный и сложный токсин, в составе которого обнаружено восемь компонентов. К числу лучше изученных относят альфа-, бета-, гамма- и дельта - токсины. Альфа-токсин - термолабильный, летальный, некротический, капиллярный яд. Вызывает некроз тканей, желатинозный отек и гибель животных. Бета-токсин - фосфорлипаза С (лецитиназа). Обладает некротическим, гемолитическим и летальным действием. Гамма-токсин –фосфорлипаза D. Некротизирующий и гемолитический факторы. Дельта-токсин - кислородолабильный гемолизин. Экзотоксин C. novyiпо активности превосходит токсины других возбудителей газовой гангрены. Он сильнее других токсинов угнетает фагоцитоз и обладает четким гемолитическим действием, которое нейтрализуется специфической антитоксической сывороткой, ему присущи летальные и некротические свойства и диффузионная активность. Токсин разрушается при нагревании до 50°С в течение 30 мин. Этот микроб также образует ферменты патогенности - гиалуронидазу, фибринолизин, дезоксирибонуклеазу, протеиназы.

Антигенная структура. По составу растворимых антигенов токсина различают четыре типа C. novyi - А, В, С и D.

Тип А - С. novyi (C. oedematiens) -вызывает газовую гангрену у человека и животных, выделяется также при брадзоте. Вырабатывает альфа-, гамма- и дельта - токсины. Тип В -C. gigas - является возбудителем брадзота овец, инфекционного некротического гепатита овец, а также газовой гангрены человека и травоядных. Может вызывать у крупного рогатого скота и свиней инфекционный некротический гепатит. Вырабатывает альфа- и бета-токсины. Тип С -C. bubalorum- вызывает хронический остеомиелит у буйволов, продуцирует гамма-токсин. Тип D - C. haemolyticum- вызывает инфекционную иктерогемоглобинурию у крупного рогатого скота, очень редко у овец и в единичных случаях у свиней. Синтезирует бета-токсин, а также эта- и тэта-токсины. Первый из них фермент тропомиозиназа, расщепляет миозин и повреждает мышцы.

3. Clostridiumperfringens

Clostridium perfringens (В. perfringens, C. welchii) открыт и описан в 1892 г. Уэлчем и Нетталом. Широко распространен в природе и встречается повсеместно, особенно большое количество его обнаруживают в почве, богатой гумусом. Патогенные штаммы микроба выделяются из почвы главным образом в местах, где почва загрязняется фекалиями животных. Основной резервуар сохранения патогенных штаммов – здоровые животные, в желудочно – кишечном тракте которых интенсивно размножается C. рerfrigens и выделяется с фекалиями во внешнюю среду. Так происходит загрязнение кормов, пастбищ, почвы вначале вегетативными формами, а затем спорами: микроб быстро спорулирует и длительное время сохраняется.