Злокачественного отек

Мясо-пептонный агар (МПА).Данная питательная среда служит для выращивания анаэробных и других микробов.

1. К мясо-пептонному бульону для придания плотности добавляют 2—2,5% мелко нарезанного и промытого агар-агара. Агар-агар получают путем специальной обработки морских водорослей. Он является веществом полисахаридной природы, содержит незначительное количество азота и не представляет собой питательный субстрат. Студень, образуемый агар-агаром, расплавляется при 70— 100°C и застывает при 40—50°.

2. Кипятят, помешивая, до полного расплавления агара. В некоторых случаях для просветления среды прибавляют белок одного куриного яйца, смешанного с двойным количеством холодной воды. Среду помещают в автоклав на 45 минут при 115°С. Свернувшиеся хлопья белка адсорбируют взвешенные частицы и осаждаются на дно.

3. Проверяют и исправляют реакцию среды. Отстаивают и фильтруют через ватно-марлевый фильтр в горячем автоклаве или в специальной металлической воронке с двойными стенками, между которыми находится горячая вода.

4.Разливают среду через  стеклянную воронку с зажимом  в пробирки и флаконы и стерилизуют  в автоклаве при 120°С в течение 15—20 минут.

5. Из расплавленного стерильного мясо-пептонногоагара приготовляют скошенный и прямой агар (агар столбиком). В первом случае пробирки укладывают горизонтально до полного застывания, во втором — пробирки помещают в штатив вертикально.

 

Характеристика красителей и реактивов, применяемых для идентификации микроба.

Окраска по Граму

1. На обезжиренном предметном  стекле в капле воды делают  тонкий мазок, чтобы клетки равномерно  распределялись по поверхности  стекла и не образовывали скоплений.

2. Препарат высушивают  на воздухе, фиксируют над пламенем  горелки и окрашивают в течение 1...2 мин карболовым генциановым  или кристаллическим фиолетовым.

3. Затем краситель сливают  и мазки обрабатывают 1…2 мин раствором  Люголя до почернения.

4. Сливают раствор Люголя, препарат обесцвечивают в течение 0,5…1,0 мин 96%-ным этиловым спиртом  и быстро промывают водой.

5. Дополнительно окрашивают  в течение 1…2 мин водным фуксином.

6. Краситель сливают, препарат  промывают водой и высушивают.

7. Микроскопируют с иммерсионной системой.

При правильном окрашивании грамположительные бактерии имеют сине-фиолетовый, грамотрицательные – розово-красный цвет.

Для получения достоверных результатов необходимо готовить мазки для окраски по Граму из молодых, активно растущих (обычно односуточных) культур, так как клетки из старых культур иногда дают неустойчивую реакцию по Граму. Грамотрицательные бактерии могут выглядеть как грамположительные, если бактериальная пленка (мазок) слишком толста и обесцвечивание спиртом не проведено до конца.

Окраска по Муромцеву:

1. Влажные мазки фиксируют этиловым или метиловым спиртом, или спирт-эфиром поровну, или ацетоном в течение 1-2 часов.

2. Промывают дистиллированной водой.

3. Красят 5-10 минут синькой Мансона в разведении 1:40.

4. Сливают краску.

5. Дифференцируют 10% водным раствором танина 8-10 минут (до появления голубоватой окраски).

6. Промывают водой.

7. Высушивают фильтровальной бумагой.

Окрашенный мазок имеет светло-голубой фон, при этом ядра нервных клеток окрашиваются в синий цвет, а тельца Бабеша-Негри – в бледно-фиолетовый с темными включениями.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Заключение

Проведя лабораторное бактериологическое исследование, состоящее из:

1. Первичной микроскопии мазков-отпечатков из поступившего патологического материала: обнаружены грамположительные изолированные палочки с закругленными концами, а также отдельные цепочки из трех-пяти бактерий, споры овальной формы, располагаются центрально.
2. Выделена культура методом заражения морской свинки – животное пало через 20 часов после заражения. Патологическая картина: в подкожной клетчатке в месте введения ощущаются пузырьки газа, кожа легко отделяется от мышц, мышцы светло розового цвета, кишечник вздут, в грудной и брюшной  полости наличие желтого транссудата. При микроскопии мазков отпечатков из трупа морской свинки обнаружены грамположительные палочки с закруглёнными концами, овальные споры расположены центрально. В препарате-отпечатке из серозных покровов печени  обнаруживаем длинные нити.
3. Выделенная культура из патологического материала и из внутренних органов морской свинки идентична по характеру роста и по морфологическим свойствам:

наблюдался нежный бесцветный вуалеобразный налёт с микроскопическими изрезанными краями и с нежными отростками колонии окружены зоной гемолиза. При микроскопии данной культуры, окрашенной по Граму, получены такие же результаты как и при первичной микроскопии мазков отпечатков, так и мазков отпечатков из внутренних органов лабораторного животного и выделенной культуры.

Был выделен возбудитель злокачественного отека – C. septiсum.

 

 

 

 

 

 

 

 

Профилактика злокачественного отека

крупного рогатого скота

Профилактика злокачественного отека крупного рогатого скота сводятся в основном к соблюдению строгой асептики при операциях и своевременному лечению ран. Для профилактики родильного злокачественного отека необходимо соблюдение санитарно-гигиенических условий при отелах. При 
тяжелых родах с повреждением слизистых оболочек и прилегающих к ним тканей родовых путей рекомендуется орошение их дезинфицирующими растворами. Большое значение имеет соблюдение санитарно-гигиенических условий при родах и оказании акушерской помощи.

В ОАО СХП «Вощажниково» для ликвидации данного заболевания был разработан и осуществлен  комплексный план по оздоровлению хозяйства (см.приложение).

В последующее время и в данный момент проводится профилактика злокачественного отека в хозяйстве методом вакцинации всего восприимчивого поголовья по указанной схеме:

1. В 65 дневном возрасте вакцинация против клостридиозов и пастереллеза с ревакцинацией через 21-30 дней вакциной «Ван Шот Ультра 8».
2. В 9 месячном возрасте  повторно вакцинация против клостридиозов и пастереллеза с ревакцинацией через 21-30 дней (Ван Шот Ультра 8).
3. Маточное (дойное) поголовье прививается ежегодно вакциной Ван Шот Ультра 8 и при  запуске вакциной «СКОУГАРД 4КС»(  для профилактики коронавирусной и ротавирусной инфекций, колибактериоза и клостридиоза у  новорождённых телят).

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Документы регламентирующие исследования

Лабораторные исследования, описанные выше, проводились согласно методическим указаниям по лабораторным исследованиям на злокачественный отек животных (Утверждены Главным управлением ветеринарии Минсельхоза СССР 5 января 1984 г.).

Диагноз на злокачественный отек считается установленным в случае получения одного из следующих результатов:

          -выделение из патологического материала  культуры со свойственными характерными для одного из возбудителей данного заболевания  и гибель хотя бы одной из двух зараженных исходным материалом или полученной культуры морских свинок с типичной для данного возбудителя патологоанатомической картины и  выделения из органов культуры возбудителя.

-гибели хотя бы одной  морской свинки из двух, зараженных  исходным материалом, при наличии  у неё типичной для данного  возбудителя патологоанатомической  картины и выделения из неё  культуры возбудителя, если даже  в посевах из исходного материала  возбудителя не выделено.

Срок исследования 5 суток.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Список использованной литературы:

1. Алтухов Н.Н. Краткий справочник ветеринарного врача. Москва: "Агропромиздат", 2010. – 84 с.
2. Арапов Д. А., Анаэробная газовая инфекция, М., 2007. – 57 с.
3. Бакулов И.А., Эпизоотология с микробиологией, Москва: "Агропромиздат", 2006. – 98 с.
4. Ветеринарное законодательство том 2 . Москва «Колос» 1972. – 166 с.
5. Достоевский П.П., Судаков Н.А., Атамась В.А., Справочник ветеринарного врача/ К.: Урожай, 2011г. – 324с. 
6. Коваленко Я. Р., Анаэробные инфекции с.-х. животных, М., 2006. – 157 с.
7. Козловский Е. В., Емельяненко П. А. «Ветеринарная микробиология» Учебник. - М.: Колос, 2005. – 69 с.
8. Костенко Т. С., Родионова В.Б., Скородумов Д.И. «Практикум по ветеринарной микробиологии» Уч. пос. - М.: Колос, 2009. – 135 с.
9. Кузнецов А.Ф. Справочник ветеринарного врача. Москва: «Лань», 2011. – 96 с.
10. Сидорчук А.А., Бессарабов Б.Ф., Воронин Е.С. и др. «Инфекционные болезни животных» / Под ред.. — М.: Колос , 2007. – 195 с.
11. Смирнова Н. И. «Ветеринарная микробиология» - Минск: Высшая школа, 2009г. – 211с

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Приложение

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

В Ростовскую межрайонную вет.бак.лабораторию

Ярославская обл. г.Ростовул. Спартаковская 130

 

 

СОПРОВОДИТЕЛЬНАЯ

В   Ростовскую межрайонную ветеринарную лабораторию

Адрес г.Ростовул.Спартаковская 130

При этом направляется для бактериологического исследования

Патологический материал кусочки печени, сердца, легкого, селезенка и почка целиком куски мышечной ткани.

От Крупного рогатого скота в возрасте3 лет принадлежащего ОАО СХП «Вощажниково»   Борисоглебского района пос.Кр.Октябрь.

Дата заболевания животного: 5.09.2012 г.

Дата падежа: 09.09.2012 г.

Клиническая картина: угнетение, отказ от корма, температура тела 37 С0, отек в области тазобедренных групп мышц, плотной консистенции, безболезненный, крепитирующий,холодный.

Данные патологоанатомического вскрытия:отек легких, сердце дряблое, увеличено в размере, стенки миокарда истончены, селезенка увеличена, отечна, геморрагический некротический эндометрит, брюшина воспалена,  в кишечнике наличие каловых масс с пузырьками газа, брыжейка геморрагична, печень с жировой дистрофией светло- коричневого (глинистого) цвета, почки с кровоизлияниями на лоханке.

Предположительный диагноз: Злокачественный отек.

Дата отправки материала:09.09.2012г.

 

Должность Главный ветеринарный врач  ОАО СХП «Вощажниково»   Гуляев Е.А.

Подпись_________________

 

Экспертиза №  733.

Дата поступления материала: 09.09.2012 года.

Адрес и наименование хозяйства ОАО СХП «Вощажниково»   Борисоглебского района пос. Кр.Октябрь.

Что прислано на исследование: кусочки печени, сердца, легкого, селезенка и почка целиком куски мышечной ткани.

В каком состоянии принят материал свежий в герметично упакованной таре.

На что исследовать: Злокачественный отек.

Патологоанатомические и органолептические данные: отек легких, сердце дряблое, увеличено в размере, стенки миокарда истончены, селезенка увеличена, отечна, геморрагический некротический эндометрит, брюшина воспалена,  в кишечнике наличие каловых масс с пузырьками газа, брыжейка геморрагична, печень с жировой дистрофией светло- коричневого (глинистого) цвета, почки с кровоизлияниями на лоханке.

Микроскопическое исследованиеисходного  материала произведены мазки отпечатки с пораженных мышц, и с внутренних органов. Метод окраскипо Грамму.    Морфология микробовграмположительные изолированные палочки с закругленными концами, а также отдельные цепочки из трех-пяти бактерий, споры овальной формы, располагаются центрально.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Посевы

Вид матиериала из которого произведен посев	Наименование сред									Характер роста на среде
	МПА	МПБ	Полужидкий МПА	сывороточные		ППА	ППБ	Китта-Тароции	Эндо
				МПА	МПБ
Кровь
Печень								+		помутнение с обильным газообразованием
Селезенка
Желчь
Почка
Головной мозг
Лимфоузел
Сычуг