Автор работы: Пользователь скрыл имя, 29 Ноября 2014 в 11:39, контрольная работа
Краткое описание
Задание 10. Влияние концентрации фермента на скорость реакции. Нарисуйте график этой зависимости. Решение: При высокой концентрации субстрата (многократно превышающей концентрацию фермента) и при постоянстве других факторов скорость ферментативной реакции пропорциональна концентрации фермента. Поэтому зная скорость реакции, катализируемой ферментом, можно сделать вывод о его количестве в исследуемом материале. При проведении ферментативной реакции в условиях избытка субстрата скорость реакции будет зависеть от концентрации фермента. Графическая зависимость такой реакции имеет вид прямой линии (рис.1).
1) транспортная. Данная функция
крови крайне разнообразна. Кровь
осуществляет перенос газов (за
счет способности гемоглобина
связывать кислород и углекислый
газ), различных питательных и
биологически активных веществ;
2) трофическая. Питательные
вещества поступают в организм
с пищей, затем расщепляются в
желудочно-кишечном тракте до
белков, жиров и углеводов, всасываются
и переносятся кровью к различным
органам и тканям;
3) дыхательная. Осуществляется
в виде транспорта кислорода
и углекислого газа. Оксигенированный
в легких гемоглобин (оксигемоглобин)
доставляется кровью по артериям
ко всем органам и тканям, где
происходит газообмен (тканевое
дыхание), кислород расходуется на
аэробные процессы, а углекислота
связывается гемоглобином крови (карбоксигемоглобинам)
и по венозному кровотоку доставляется
в легкие, где вновь происходит оксигенация;
4) защитная. В крови имеются
клетки и системы, обеспечивающие
неспецифическую (система комплемента,
фагоциты, NK-клетки) и специфическую
(Т– и В-системы иммунитета) защиту;
5) экскреторная. Кровь выводит
продукты распада макромолекул (мочевина
и креатинин выводятся почками
с мочой).
В совокупности эти функции
обеспечивают гомеостаз (постоянство
внутренней среды организма).
Составные компоненты крови:
1) клетки (форменные элементы);
2) жидкое межклеточное
вещество (плазма крови).
Соотношение частей крови: плазма
– 55 – 60%, форменные элементы – 40 – 45%.
В связи с тем что в крови содержатся
как истинные клетки (лейкоциты), так и
постклеточные образования (эритроциты
и тромбоциты), в совокупности их принято
именовать их в совокупности форменными
элементами.
Качественный и количественный
состав крови (анализ крови) – гемограмма
и лейкоцитарная формула.
Гемограмма взрослого человека:
1) эритроцитов содержится:
а) у мужчин – 3,9 – 5,5 x 1012 в 1 л,
или 3,9 – 5,5 млн в 1 мкл, концентрация гемоглобина
130 – 160 г/л;
б) у женщин – 3,7 – 4,9 x 1012, гемоглобин
– 120 – 150 г/л;
2) тромбоцитов – 200 – 300 x
109 в 1 л;
3) лейкоцитов – 3,8 – 9 x 109
в 1 л.
Белковую фракцию плазмы составляет
несколько десятков различных белков.
Большая величина молекул дает основание
относить их к коллоидам. Присутствие
коллоидов в плазме обусловливает ее вязкость.
Белки плазмы различают по строению
и функциональным свойствам. Их количественное
и качественное определение производят
специальными методами электрофореза,
основанного на различной подвижности
белков в электрическом поле, ультрацентрифугирования,
иммуноэлектрофореза, при котором в электрическом
поле передвигаются целые комплексы связанных
со специфическими антителами молекул.
В плазме крови человека содержится примерно
200—300 г белка. Белки плазмы делят на две
основные группы: альбумины и глобулины. В глобулиновую
фракцию входит фибриноген.
Альбумины. Альбумины составляют
около 60% белков плазмы. Их высокая концентрация,
большая подвижность при относительно
небольших размерах молекулы, определяют
онкотическое давление плазмы. Большая
общая поверхность мелких молекул альбумина
играет существенную роль в транспорте
кровью различных веществ, таких как билирубин,
соли тяжелых металлов жирные кислоты,
фармакологические препараты (сульфаниламиды,
антибиотики и др.). Известно, что, например,
одна молекула альбумина может одновременно
связать 25—50 молекул билирубина.
Глобулины. Эту группу белков
электрофоретически, по показателям подвижности,
разделяют на несколько фракций: α1—, α2—, β3— и γ—глобулины.
С помощью иммуноэлектрофореза эти фракции
подразделяют на мелкие субфракции более
однородных белков. Так, во фракции α1—глобулинов имеются
белки, простетической группой которых
являются углеводы. Эти белки называются гликопротеинами. В составе гликопротеинов
циркулирует около 60% всей глюкозы плазмы.
Еще одна группа — мукопротеины — содержит мукополисахариды,
фракцию аз составляет медьсодержащий
белок церулоплазмин, в котором на
каждую белковую молекулу приходится
восемь атомов меди. Таким образом связывается
около 90% всей содержащейся в плазме меди.
В плазме имеются еще тироксинсвязывающий
и другие белки.
β—глобулины. участвуют в
транспорте фосфолипидов, холестерина,
стероидных гормонов, металлических катионов.
Они удерживают в растворе около 75% всех
липидов плазмы. Металлсодержащий белок
трансферрин осуществляет перенос железа
кровью. Каждая молекула трансферрина
несет два атома железа.
γ—глобулины характеризуются
самой низкой электрофоретической подвижностью.
В эту фракцию белков входят различные
антитела, защищающие организм от вторжения
вирусов и бактерий. Количество этой фракции
возрастает при иммунизации животных.
К γ—глобулинам относятся также агглютинины крови.
Фибриноген занимает промежуточное
положение между фракциями β— и γ—глобулинов.
Этот белок образуется в клетках печени
и ретикулоэндотелиальной системы; обладает
свойством становиться нерастворимым
в определенных условиях (под воздействием
тромбина), принимать при этом волокнистую
структуру, переходя в фибрин. Содержание
фибриногена в плазме крови составляет
всего 0,3%, но именно его переходом в фибрин
обусловливается свертывание крови и
превращение ее в течение нескольких минут
в плотный сгусток. Сыворотка крови по
своему составу отличается от плазмы только
отсутствием фибриногена.
Альбумины и фибриноген образуются
в печени, глобулины в печени красном костном
мозге, селезенке, лимфатических узлах.
При нормальном питании в организме человека
за 1 сут вырабатывается около 17 г альбумина
и 5 г глобулина. Период полураспада альбумина
составляет 10—15 сут глобулина — 5 сут.
Белки плазмы вместе с электролитами
являются ее функциональными элементами.
С их помощью в значительной степени осуществляется
транспорт веществ из крови к тканям. К
числу транспортируемых компонентов относятся
питательные вещества, витамины, микроэлементы,
гормоны, ферменты а также конечные продукты
обмена веществ.
Из питательных веществ самую
большую часть составляют липиды. Их концентрация
колеблется в широком диапазоне, но максимальное
содержание отмечается после приема жирной
пищи. На относительно постоянном уровне
удерживаются переносимая плазмой глюкоза
(44,4—66,6 ммоль/л) и аминокислотные остатки
(4 мг%). Витамины могут переноситься либо
в связанному белками, либо в свободном
виде. Их уровень в плазме также подвержен
колебаниям и зависит не только от их содержания
в продуктах питания и синтеза кишечной
флорой, но и от наличия особого фактора,
облегчающего их всасывание в кишке.
Микроэлементы циркулируют
в плазме в виде металлсодержащих белков
(Со и др.) или белковых комплексов (Fe). Из
конечных продуктов обмена наибольшей
концентрации, особенно при тяжелой мышечной
работе и недостатке кислорода, достигает
молочная кислота. Не использованные организмом
и подлежащие удалению конечные продукты
обмена веществ (мочевина, мочевая кислота,
билирубин, аммиак) доставляются плазмой
к почкам, где и удаляются с мочой.
Белки плазмы в силу способности
связывать большое число циркулирующих
в плазме низкомолекулярных соединений
участвуют, кроме того, в поддержании постоянства
осмотического давления. Им принадлежит
ведущая роль в таких процессах, как образование
тканевой жидкости, лимфы, мочи, всасывание
воды.
Разновидностью распределительной
хроматографии является хроматография
на бумаге, широко используемая в биохимических
лабораториях, в том числе клинических,
для разделения пептидов, аминокислот
и других веществ. В качестве стационарной
фазы при этом служит вода, адсорбированная
целлюлозными цепями фильтровальной бумаги.
Образец помещают на одном конце бумажной
полосы, этим же концом бумагу погружают
в подходящую смесь органических растворителей
(например, бутанол–уксусная кислота–вода
в определенных соотношениях). При движении
растворителя по бумаге благодаря силе
капиллярности происходит разделение
компонентов смеси. Проявленную хроматограмму
высушивают, а местоположение каждого
из разделяемых веществ определяют химическими
или физико-химическими методами.
В сыворотке крови здорового
человека при электрофорезе на бумаге
можно обнаружить 5 фракций: альбумины,
б1-, б2-, в-, г-глобулины. Методом электрофореза
в агаровом геле в сыворотке крови выделяют
7– 8 фракций, а при электрофорезе в крахмальном
или полиакриламидном геле – до 16–17 фракций.
Следует помнить, что терминология белковых
фракций, получаемых при различных видах
электрофореза, еще окончательно не установилась.
При изменении условий электрофореза,
а также при электрофорезе в различных
средах (например, в крахмальном или полиак-риламидном
геле) скорость миграции и, следовательно,
порядок белковых зон могут меняться.
Еще большее число белковых
фракций (свыше 30) можно получить методом
иммуноэлектрофореза. Этот метод представляет
собой своеобразную комбинацию электрофоретического
и иммунологического методов анализа
белков. Иными словами, термин «иммуноэлектрофорез»
подразумевает проведение электрофореза
и реакции преципитации в одной среде,
т.е. непосредственно на гелевом блоке.
При данном методе с помощью серологической
реакции преципитации достигается значительное
повышение аналитической чувстительности
электрофоретического метода.
Зонный, или зональный, электрофорез
— это электрофорез на поддерживающих
средах (носителях). Зонный электрофорез можно
осуществить с использованием смоченных
буферным раствором (рН 8,6) полосок хроматографической
бумаги, ацетат —
целлюлозной пленки, агарового геля и
других носителей.
Если на электроды электрофоретической
камеры, в которой размещены
полоски носителя, подать напряжение,
то в созданном таким образом электрическом
поле ионы буфера и частицы нанесенного
на полосу субстрата (сыворотки или плазмы)
придут в состояние направленного движения.
При нанесении у катода 20—100мкл сыворотки
белки крови, заряженные отрицательно,
устремляются к аноду со скоростью, зависящей
от величины приложенного к электродам
напряжения, заряда белков, их молекулярной
массы, рН и ионной силы буфера. Заряд белков
при этом может быть образован первично
или вторично (в результате взаимодействия
с буфером).
Для характеристики процесса электрофореза
на носителе принято использовать понятия:
падение напряжения на 1см полосы (градиент
потенциала) – В/см и сила тока, приходящаяся
на 1см поперечного сечения полосы (плотность
тока), — мА/см. Под падением напряжения
(градиентом потенциала) следует понимать
распределение величины приложенного
к электродам напряжения на всем расстоянии
между электродами. Находится оно делением
величины выходного напряжения (регистрируемого
вольтметром источника постоянного напряжения)
на расстояние между электродами, точнее
— тот путь (в см), который преодолевают
электрически заряженные частицы (ионы,
электроны) от электрода к электроду. Так,
если он составляет 30см, а напряжение между
электродами — 150 В, то падение напряжения
(градиент потенциала) окажется равным
частному от деления 150 на 30, т.е. 5 В/см.
В зависимости от используемой величины
падения напряжения различают: низко —
(5 — 15), средне — (обычно 20 — 40) и высоковольтный
(превышающий 50 В/см) электрофорез.
Биохимия. Краткий курс с упражнениями
задачами. / Под ред. Е.С. Северина. – М.:Гэотар-мед, 2001г.
Биологическая химия : сб. ситуац. задач для студентов, обучающихся
по специальности 060301 – Фармация (заочная
форма) / сост. Л. В. Труфанова, Л.Л. Петрова,
С.К. Антонова [и др.]/ – Красноярск: КрасГМУ,
2013. – 60 с.