Сахарный диабет

Потеря веса – является непостоянным симптомом диабета, более характерным для диабета 1-го типа. Похудание наблюдается даже при усиленном питании больного и является следствием неспособности тканей перерабатывать глюкозу в отсутствии инсулина. «Голодающие» ткани в таком случае начинают перерабатывать собственные запасы жиров и белков.

Вышеописанные симптомы более характерны для диабета первого типа. В случае этого заболевания, симптомы развиваются быстро. Больной, как правило, может назвать точную дату появления симптомов. Часто симптомы заболевания развиваются после перенесенного вирусного заболевания или стресса. Молодой возраст больного является очень характерным для диабета 1-го типа.

При диабете 2-го типа, больные чаще всего обращаются к врачу в связи с наступившими осложнениями заболевания. Само заболевание (особенно на начальных стадиях) развивается практически бессимптомно. Однако в некоторых случаях отмечаются следующие малоспецифичные симптомы: вагинальный зуд, воспалительные заболевания кожи трудно поддающиеся лечению, сухость во рту, мышечная слабость. Наиболее часто причиной обращения к врачу становятся осложнения заболевания: ретинопатия, катаракта, ангиопатия (ишемическая болезнь сердца, нарушения мозгового кровообращения, поражение сосудов конечностей, почечная недостаточность и др.). Как уже упоминалось выше, диабет второго типа более характерен для людей взрослого возраста (старше 45 лет) и протекает на фоне ожирения.

При осмотре больного врач обращает внимание на состояние кожных покровов (воспалительные процессы, расчесы) и подкожного слоя жира (уменьшение в случае диабета 1-го типа, и увеличение при диабете 2-го типа).

Диагностика сахарного диабета налагает особую ответственность на клинических биохимиков, поскольку данное заболевание имеет не только медицинское, но и социальное значение. Для постановки диагноза и последующего длительного мониторирования пациентов используют следующие тесты.

Глюкоза в крови.

Важное место в диагностике сахарного диабета занимает определение содержания глюкозы в крови36.

Современные тесты основаны на высокоспецифических ферментативных реакциях и дают достаточно точные результаты анализа37. Нормальная концентрация глюкозы в крови (гликеемия) натощак колеблется в пределах 3,3-5,5 ммоль/л38. Повышение концентрации глюкозы выше этого уровня свидетельствует о нарушении метаболизма глюкозы39. Для того чтобы установить диагноз диабета нужно установить повышение концентрации глюкозы в крови по меньшей мере в двух последовательных измерениях проводимых в разные дни. Забор крови на анализ проводят в основном в утреннее время. Перед забором крови нужно удостовериться в том, что пациент ничего не ел накануне обследования. Также важно обеспечить пациенту психологический комфорт во время проведения обследования для того, чтобы избежать рефлекторного повышения уровня глюкозы в крови, как ответ на стрессовую ситуацию40.

Представим критерии диагностики сахарного диабета (см. табл. 2.)

Глюкозотолерантный тест.

Глюкозотолерантный тест (далее ГТТ) является суррогатным методом оценки степени выраженности компенсаторной гиперинсулинемии. В соответствии с критериями Комитета экспертов ВОЗ (1980, 1985, 1999) изменения концентрации глюкозы в крови при проведении перорального глюкозотолерантного теста у здоровых людей и больных нарушениями углеводного обмена отражены в таблице 2.

Глюкозотолерантный тест необходимо проводить пациентам с пограничными значениями гликемии натощак, а также лицам с выявленными факторами риска в отношении развития сахарного диабета. Для проведения теста больной 3 дня должен получать диету, содержащую не менее 150 г углеводов (этому требованию отвечают все столы больничного питания), и сохранять обычную физическую активность.

Таблица 2.

Критерии диагностики сахарного диабета41

Диагностический критерий	Концентрация глюкозы, моль/л (мг/дл)
	Цельная кровь	Плазма
	венозная	капиллярная	венозная
Норма
Натощак	3,3-5,5 (59-99)	3,3-5,5 (59-99)	4,0-6,1 (72-110)
После приема глюкозы через 2 часа	<6,7 (<120)	< 7,8 (<140)	<7,8 (<140)
Сахарный диабет
Натощак	≥6,1 (? 110)	≥ 6,1 (≥110)	≥7,0 ≥6,7
После приема глюкозы через 2 ч; или через 2 ч после приема пищи*	≥10,0 (?180)	≥11,1 (?200)	≥11,1 (≥200)
Нарушенная толерантность к глюкозе
Натощак	<6,1 (<110)	< 6,1 (<110)	<7,0 (<126)
После приема глюкозы через 2 ч	≥6,7 и <10,0 (≥120 и <180)	≥7,8 и <11,1 (≥140 и <200)	≥7,8 < 11,1 (≥ 140 и < 200)
Нарушенная гликемия натощак
Натощак	≥5,6 и <6,1 (? 100 и <110)	≥5,6 и <6,1 (? 100 и <110)	≥6,1 и < 7,0 (≥110 и <126)
После приема глюкозы через 2 ч	≥ 6,7 и <10,0 (≥120 и < 180)	≥ 7,8 и <11,1 (≥140 и <200)	≥ 7,8 и < 11,1 (≥140 и < 200)

* - или случайное определение  гликемии в любое время дня вне зависимости от времени приема пищи

 

За трое суток до пробы отменяются тиазидные диуретики, контрацептивы и глюкокортикостероиды. Пробу проводят утром после 8-14 ч голодания. Во вемя проведения пробы пациенту не разрешают курить. Берут исходную порцию крови натощак, больной принимает 75 г глюкозы, растворенной в 250-300 мл воды, которую он должен выпить в течение 5 мин (ребенок – из расчета 1,75 г на 1 кг веса, но не более 75 г), кровь берут через 2 часа и немедленно определяют уровень глюкозы.

Если концентрация глюкозы колеблется от 7,8 до 11 ммоль/л, то состояние исследуемого расценивается как нарушение толерантности к глюкозе (предиабет). Диагноз диабет устанавливается если концентрация глюкозы превышает 11 ммоль/л через два часа с начала проведения теста. Как простое определение концентрации глюкозы, так и проведение глюкозотолерантного теста дают возможность оценить состояние гликемии только на момент исследования.

Для оценки уровня гликемии на более длительном промежутке времени (примерно три месяца) проводят анализ по определению уровня гликозилированного гемоглобина (HbA1c). Образование этого соединения находится в прямой зависимости от концентрации глюкозы в крови. Нормальная содержание этого соединения не превышает 5,9% (от общего содержания гемоглобина). Повышение процентного содержания HbA1c выше нормальных значений свидетельствует о длительном повышении концентрации глюкозы в крови на протяжении трех последних месяцев. Данный тест проводят в основном для контроля качества лечения больных диабетом.

HbA1c является гликолизированной  формой присутствующего в ритроцитах  гемоглобина А. При повышенных  концентрациях глюкозы в крови  она вступает в неферментативное  взаимодействие с белками плазмы  с образованием шифровых оснований, в том числе с гемоглобином. Степень гликолизирования гемоглобина зависит от концентрации глюкозы в крови и от длительности контакта глюкозы с гемоглобином. Поэтому количество гликолизированного гемоглобина пропорционально концентрации глюкозы и длительности инкубации (контакта с эритроцитами). Измерение концентрации HbA1c позволяет ретроспективно оценивать уровень гипергликемии при сахарном диабете. По сути HbA1c состоит из трех компонентов: HbA1а, HbA1b и HbA1c. HbA1c дает более тесную корреляцию со степенью выраженности гипергликемии у больных сахарным диабетом42.

Определение глюкозы в моче. В норме глюкоза в моче отсутствует. При сахарном диабете повышение гликемии достигает значений позволяющих глюкозе проникать через почечный барьер. Определение глюкозы в крови является дополнительным методом диагностики диабета.

Глюкозурия наблюдается у пациентов при превышении уровня глюкозы в крови до 8,9-10 ммоль/л. Необходимо учитывать, что у отдельных здоровых индивидуумов с низким почечным порогом для глюкозы может наблюдаться глюкозурия без наличия сахарного диабета. С другой стороны, с возрастом характерно увеличение почечного порога для глюкозы и у многих пожилых больных диабетом глюкозурия отсутствует. Таким образом, при интрепретации данных всегда надо учитывать то, что уровень глюкозы в моче зачастую не является прямым отражением ее уровня в крови43.

Определение ацетона в моче (ацетонурия) – нередко диабет осложняется нарушением обмена веществ с развитие кетоацидоза (накопление в крови органических кислот промежуточных продуктов метаболизма жиров). Определение в моче кетоновых тел служит признаком тяжести состояния пациента с кетоацидозом.

В некоторых случаях для уточнения причины диабета проводят определение фракции инсулина и продуктов его метаболизма в крови. Для диабета 1-го типа характерно снижение или полное отсутствие фракции свободного инсулина или пептида С в крови44.

Для диагностики осложнений диабета и составления прогноза заболевания проводят дополнительные обследования: исследование глазного дна (ретинопатия), электрокардиограмма (ишемическая болезнь сердца), экскреторная урография (нефропатия, почечная недостаточность).

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2. Экспериментальная часть

1. Материал и методика проведения

 

Целью данной работы являлось выявление эффективных методов диагностики сахарного диабета.

Данное исследование проводилось в клинико-диагностической лаборатории поликлиники № 129 г. Москва.

Исследуемый материал: для работы были взяты образцы крови и мочи 10 пациентов в возрасте от 40 до 50 лет.

В работе мы использовали следующие методы исследования:

- для исследования глюкозы в  крови:

• количественное определение глюкозы в крови с помощью автоматического анализатора Biosen C line.
• экспресс-диагностика при помощи глюкометра.

- для исследования глюкозы в  моче:

• количественное определение глюкозы в моче с помощью полуавтоматического анализатора CL-50.
• полуколичественное определение глюкозы в моче с помощью тест-полосок Уриглюк-1.

Методики:

Определение глюкозы в крови.

Количественное определение глюкозы в крови с помощью автоматического анализатора Biosen C line.

Назначение прибора:

     Анализатор глюкозы и лактата BIOSEN C line - современный автоматический анализатор для профессионального применения в лабораториях клиник.

• Память на пятьсот результатов измерения;
• Сто проб в час;
• Встроенная программа контроля качества;
• Стоимость одного измерения снижается благодаря маленькому потреблению реагентов;
• Компактный, современный дизайн;
• Чип-сенсор без мембран, для быстрого и удобного применения.

Технические характеристики
Принцип измерения	Энзиматический, амперометрический
Электроды	Фермантативный чип-сенсор
Диапазон измерения	– Глюкоза: 0.5-50 ммоль/л (9-900 мг/дл)  – Лактат: 0.5-40 ммоль/л (5-360 мг/дл)
Коэффициент вариаций	Ј 1,5 % @ 12 ммоль/л
Стабильность / дрейф	Ј 3 % при 10 измерении, относительно 12 ммоль/л
Срок службы сенсоров	– Глюкоза: 60 дней или 7500 проб  – Лактат: 50 дней или 6000 проб
Тип пробы	Кровь, сыворотка, плазма
Объем пробы	20 µl (10 µl)
Объем пробирки	2,0 мл (1,5 мл)
Языки	Русский, Испанский, Немецкий, Английский и т.д. Другие языки по запросу.
Рабочий диапазон температур	От +15 до +35 °C
Влажность	20-85 %
Электропитание	100-250 В / 50-60 Гц
Потребляемая мощность	30 Вт
Размеры	280x280x95 мм
Вес	5 кг
Режимы калибровки	Экономичная, автоматическая, принудительная
Принтер	RS 232 (стандартный порт)
Дисплей	Сенсорный (320x240 точек)
Память	Пятьсот результатов измерения

             Автоматический анализатор BIOSEN C_line предназначен для количественного определения глюкозы и лактата в цельной крови, плазме и сыворотке человека. Проба отбирается в капилляр, который помещается в пробирку, заполненную гемолизирующим буфером, и затем измеряется прибором.