Автор работы: Пользователь скрыл имя, 08 Января 2014 в 22:06, лекция
Краткое описание
Ни один аналитический метод не может конкурировать с хроматографией по универсальности применения и эффективности разделения самых сложных многокомпонентных смесей. На современных газохроматографических капиллярных колонках в одном эксперименте могут быть разделены, количественно и качественно определены более 1000 индивидуальных компонентов, например, в бензиновых фракциях нефти; двумерный электрофорез позволяет увидеть до 2000 белков в биологических объектах или пептидов в гидролизатах белков. Только благодаря сочетанию разнообразных методов хроматографии и капиллярного электрофореза стала возможной расшифровка нуклеотидной последовательности ДНК и завершение работ по программе "Геном человека".
Необходимость более достоверного результата
количественного определения привела
к использованию инструментальных методов.
Метод элюирования. Этот метод заключается
в том, что разделенное вещество смывают
с сорбента растворителем и определяют
его концентрацию уже другими методами
- фотометрическими, полярографическими
и т.д. Это достаточно точный метод, но
только при условии количественного выделения
разделенного вещества. Из-за высокой
трудоемкости метод используется достаточно
редко и неприемлем при большом количестве
исследуемых образцов.
Фотографический
метод определения заключается
в фотографировании пластинок с
разделенным веществом и дальнейшим
определением степени почернения, с
использованием десинтометров.
Радиографический метод аналогичен фотометрическому,
только с той разницей, что определяется
почернение пластинки, вызванное излучением
разделенного вещества. Этот метод используется
только при определении веществ с мечеными
атомами.
Фотодесинтометрический метод может быть
использован без выделения вещества с
пластинки и основан на определении не
только площади пятна, но и его интенсивности.
Это наиболее
точный метод определения концентрации
веществ, так как позволяет при
использовании калибровочных графиков,
проводить достаточно точные количественные
определения всех разделенных веществ
(до 2-10%) непосредственно на пластинке
за короткий промежуток времени.
Неудивительно, что при развитии тонкослойной
хроматографии, применение десинтометров
увеличивается, чувствительность и, следовательно,
точность определения концентрации разделенных
веществ повышается и приближается к точности
высокоэффективной жидкостной хроматографии.