Шпаргалки по "Микробиологии"

3) ПЦР соскобов со слизистой

Гонорея может переходить в хроническую форму. В этих случаях  используют серодиагностику – РСК или РНГА, ИФА

Клинические формы гонококковой инфекции:

1) гонорея (урогенитальная, экстрагенитальная);

2) гонококковая септикопиемия;

3) специфический конъюнктивит новорожденных.

Различают:

1) свежую гонорею (длительность течения не более 2 месяцев):

а) острую;

б) подострую;

в) торпидную;

2) хроническую гонорею (вялотекущее заболевание продолжительностью более 2 месяцев или с неустановленным сроком).

По  клиническому течению различают:

1) неосложненную гонорею;

2) осложненную гонорею.

Профилактика и  лечение. Вакцинопрофилактика гонореи разрабатывается. Для предупреждения бленнореи всем только что родившимся детям на конъюнктиву глаза закапывают раствор пенициллина или другой АБ, к которому чувствительны гонококки. Лечение гонореи проводят антибиотиками.

 

Коринебактерия дифтерии – дифтерия

Род Corynebarteriurn (от лат. Сoryne - булава) – Гр+ палочковидные бактерии, не образующие спор, не имеющие жгутиков. Содержат зерна волютина, расположенные чаще всего на концах палочек, они часто превышают размеры поперечника бактерии и придают вид булавы. Зерна волютина выявляют при окраске по Нейссеру и Леффлеру. Также имеются включения липидов и крахмала, который откладывается при недостатке кислорода.

В состав клеточной стенки входят специфические  только для бактерий рода Corynebacterium липиды: эфиры коринемиколовой и коринемиколиновой  кислот, димикола, фосфатиды маннозы  и инозита.

В организме  человека обитают условно-патогенные: С.diphtheriae, С.pseudodiphtheriticiim (hofmanii), С.xerosis, С.ulcerans. Разновидности патогенных(гравис, митис, интермедиус, бельфанти).

Аэробы  или Факультативные анаэробы, хорошо размножаются при доступе кислорода. Температура 37 градусов, рН=7,4-8. Хемогетеротроф. Каталазоположителен. К питательным средам требовательны: не способны утилизировать азот из аммонийных соединений, требуют наличия почти всех АК, пуриновые и пиримидиновые основания, солей Mg, Zn, Cu, Fe

Используют  кровяной агар, сывороточный агар, среды с добавлением теллаурита калия (кровяно-теллуритовый агар, среда клауберга 2, среда тинсдаля-садыковой), хинозольная среда Бучина, Сывороточный агар Леффлера

На  поверхностях плотных сред дифтерийные  палочки образуют темно-серые или  черные колонии (биовары гравис, способны расщеплять крахмал, или миттис). Рост на скошенном сывороточном агаре сравнивают с шагреневой кожей, колонии не сливаются.

Расщепляют  глюкозу и мальтозу с образованием кислоты без газа, восстанавливают нитраты(кроме бельфанти), расщепляют цистеин на питательной среде Пизу (сывороточный агар, содержащий цистин и уксуснокислый свинец). Облачко потемнения по ходу укола.

Лизируются  специфичны для отдельных видов вирулентными фагами, что позволяет устанавливать фаговары исследуемых культур.

АГ. Имеют белковую капсулу, которая содержит К-АГ. Определение этого АГа позволяет установить серовар (их более 10). Группоспецифический полисахарид АГ клеточной стенки дает перекрестные реакции с микобактериями, нокардиями.

Экология и распространение. Передается аэрозольным (воздушно-капельным) путем. В настоящее время часто регистрируется у взрослых (тяжелая формы). Токсигенность связана лизогенизацией специфическим профагом. Выделяясь в окружающую среду со слюной, пленками, дифтерийные палочки сохраняют жизнеспособность в течение нескольких дней. Хорошо переносят высыхание. Чувствительны к дезинфицирующим растворам, антибиоткам.

Факторы патогенности.

--Дифтерийный  токсин, белок из А и Б фрагмента. А энзиматическая активность, токсин, Б отвечает за рецепторная. Блокирует синтез белка, клетка погибает.

--некротоксин  – вызывает некроз клеток в  месте проникновения

--нейраминидаза  – фермент способствует отщеплению  от ГП гликолипидов и олигасахаров  сиаловых кислот, модифицирует поверхность  для прикрепления дифтерийного  токсина

--гилауронидаза  – расщепляет гилауроновую кислоту,  повышает проницаемость сосудов,  отек тканей

--корд-фактор. Находится на поверхности клеточной  стенки, фактор распространения,  прикрепления и колонизации

--антифагоцитарный  фактор – стимулирует образование  каталазы и супероксиддисмутазы

Патогенность и патогенез. Заболевание развивается у лиц, не имеющих антитоксического иммунитета. На месте внедрения (зев, гортань, трахея, реже – нос, ухо) развивается местный воспалительный процесс. Бактерия размножается в месте входных ворот, продуцирует токсин. В зеве образуются  дифтерийные пленки которые спаяны, а в гортани пленки не спаяны и попадают в место голосовой щели. Пути передачи – воздушно-капельный, контактно-бытовой.

Возбудитель проникает через слизистые оболочки ротоглотки, реже – глаз, половых  органов, кожу, раневую поверхность.

Сам возбудитель остается на месте входных  ворот инфекции, а патогенез и  клиническая картина определены действием экзотоксина, который  оказывает общее и местное  действие.

Патоморфологическим проявлением взаимодействия макро– и микроорганизма при дифтерии является фибринозное воспаление. В выходящем  из сосудов экссудате обнаруживается фибриноген, при свертывании которого на поверхности слизистой оболочки образуются серовато-белого цвета пленчатые налеты, плотно спаянные с окружающей тканью. Они тяжело снимаются, при их отрыве обнажается эрозийная поверхность. Разрастание этих пленок приводят к развитию истинного крупа.

Затем в воспалительный процесс вовлекаются:

1) регионарные лимфатические узлы (лимфадениты);

2) сосуды;

3) сердце (параличу сердечной мышцы);

4) кора надпочечников;

5) почки (нефрит);

6) периферическая нервная система – полиневриты, парезы;

7) иммунная система (на 5—7-й дни антитела отсутствуют).

Иммунитет. Наиболее восприимчивы дети 1–4 лет. Вырабатывается не очень прочный антитоксический иммунитет, возможны повторные заболевания дифтерией. Невосприимчивость зависит главным образом от содержания в крови антитоксина и АТ (опс онины, преципитины, комплементсвязывающие). Уровень антитоксического иммунитета устанавливают, определяя в крови антитела в РНГА с эритроцитарным диагностикумом (эритроциты нагружены дифтерийным анатоксином). Титр 1:20 и выше Þ иммунность обследуемого. Такжеже применяется реакция Шика (внутрикожно вводят дифтерийный токсин, у неимунных людей – местная воспалительная реакция, при наличии антитоксина реакции нет).

Антибактериальный иммунитет препятствует адгезии  возбудителя

Лабораторная диагностика.

1. Основной метод – бактериологическое исследование.

2. Определение токсигенности видовой культуры (реакция преципитации Вагая).

Способы определения токсигенности:

1) биологическая проба;

2) постановка ИФА;

3) использование ДНК-зондов;

4) реакция преципитации Вагая.

Исследованию  подлежат:

1) лица с подозрением на дифтерию;

2) больные с различными заболеваниями лор-органов.

Особенности бактериологического исследования при дифтерии:

1) посев материала на элективные питательные среды;

2) слизистые оболочки носа, зева, половых органов, кожа в составе нормальной микрофлоры содержат различных представителей рода Carinobakterium. Они условно-патогенны, объединены понятием дифтероиды. У ослабленных больных, с вторичным иммунодефицитом, у онкологических больных могут вызывать различные гнойно-воспалительные процессы. В ходе бактериологического исследования надо дифференцировать каринобактерии дифтерии от дифтероидов.

Отличия дифтероидов от возбудителей дифтерии:

1) различия по морфологическим свойствам. Дифтероиды в мазках располагаются беспорядочно или в виде палисада. В цитоплазме зерна волютина отсутствуют;

2) различия в биохимической активности;

3) для выявления различий в антигенных свойствах используют реакцию агглютинации по идентификации с видовой дифференцированной сывороткой;

4) чувствительность к бактериофагу.

Культуральные свойства не отличаются)

микроскопический  метод. Мазки из налетов зева и  носа окрашивают метиленовым синим, по Нейссеру и Граму. Одновременно материал засевают на элективную и дифференциально–диагностическую среды. Выделив культуру, ее идентифицируют по культурально–биохимическим признакам. Затем определяют токсигенность, испытывая культуру на морских свинках или в реакции преципитации на пластинчатом фосфатно–пептонном агаре, подсевая ее бляшками к расположенной вдоль чашки полоске фильтровальной бумаги, смоченной антидифтерийной сывороткой.

Токсигенные штаммы коринебактерии дифтерии при  внутрикожном введении вызывают местный  некроз, а при подкожном – гибель животных с экссудацией в серозные полости и резкое увеличение надпочечников. Положительная реакция преципитации в агаре проявляется образованием на границе взаимодействия антитоксина  и продуцируемого экзотоксина равномерно сливающихся полос преципитации или «стрел–усиков».

2) ПЦР. Экспресс–диагностика. Если прямой микроскопией мазков, окрашенных обычными способами, выявить коринебактерии дифтерии в материале не удается, то его берут тампоном со свернутой сывороткой (метод Фольгера). Тампон помещают в термостат для подращивания культуры и через 3–5 ч им делают мазки.

3) серологическая  диагностика, количественное определение  антитоксина в крови по Йенсену.  Низкий уровень – болезнь.  Высокий уровень – носительство.

Профилактика и лечение. Для профилактики дифтерии используют адсорбированную коклюшно–дифтерийно–столбнячную вакцину (АКДС). АДС –адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин. АДС-М адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин с уменьшенным содержанием компонентов. Вакцинацию начинают с 5–6–месячного возраста. Курс иммунизации состоит из трех внутримышечных инъекций по 0,5 мл препарата с интервалом 30–40 дней. Ревакцинацию проводят в 3 года, 6 и 11 лет. По эпидемическим показаниям вакцинируют все население, даже людей старше 50 лет.

Специфическое лечение проводится лошадиной антитоксической  иммунной сывороткой, которую вводят дробно по методу Безредки , Антибиотики и сульфаниламиды сокращают сроки бактериовыделения у реконвалесцентов и санируют организм здоровых бактерионосителей. Для этих целей назначают пенициллины, тетрациклины, эритромицин.

Серотерапия эффективна в ранний период болезни, пока токсин не фиксирован клетками организма и ткани существенно не повреждены.

 

Микобактерия туберкулеза

МИКОБАКТЕРИИ Род Mycobacteriurn (сем. Mycobacteriaceae, порядок Actinomycetales) Большая часть – сапрофиты и условно-патогенные. У человека вызывают туберкулез (М.tuberculosis – в 92% случаев, М.bovis - 5%, М.africanus – в 3%) и лепру (М.lерrае).

М.tuberculosis – туберкулез – хроническое инфекционное заболевание. В зависимости от локализации выделяют туберкулез органов дыхания и внелегочные формы (кожи, костей и суставов, почек и др.). Локализация зависит от путей проникновения и вида возбудителя. Гетеротрофы, глицеринзависимы, аэробы.

Морфология. Частичные Гр+, прямые или слегка изогнутые палочки. Неподвижны, спор и капсул не образуют. Высокое содержание липидов (фосфолипиды, воск Д, корд-фактор, миколевая, туберкулостеариновая, фтионовая кислоты)придает ряд характерных свойств: устойчивость к кислотам, щелочам и спирту, трудное проинкновение АБ в клетку, трудное восприятие анилиновых красителей (для окраски применяют метод Циля–Нильсена), препятствуют фагоцитозу, нарушают проницаемость лизосом, вызывают развитие специфических гранулем, разрушают митохондрии клеток. Возможен переход в L-формы.

Требовательны к питательным средам, очень медленный  рост (2-3 недели).

Питательные среды: 1) среду Левенштейна–Йенсена (яичная среда с добавлением картофельной муки, глицерина и соли) и содержит еще малахитовый зеленый, который задерживает рост др бактерий

2) Среда  Сотона – синтетическая среда,  содержит аспарагин, глицерин, цитрат  железа, фосфат калия

Затем на плотных средах появляются морщинистые, сухие с неровными краями кремового цвета колонии. В жидких средах – сначала нежная сухая морщинистая пленка кремового цвета на поверхности, затем утолщается и падает на дно. Среда при этом остается прозрачной.

У вирулентных  штаммов через 48-72 часа выявляют корд-фактор (экспресс-способ по Прайсу) – образование  кос, жгутов при просмотре окрашенных препаратов под микроскопом.

АГ. АТ образуются на туберкулиновые протеиды, на полисахариды, фосфатиды, корд-фактор. (туберкулин) обладает выраженными аллергенными свойствами.

Экология и распространение. Путь заражения воздушно-капельный, возбудитель проникает через верхние дыхательные пути, иногда через слизистые оболочки ЖКТ или через поврежденную кожу.

В окружающей среде длительное время сохраняются (в высохшей мокроте – в течение  нескольких недель, в воде – более  года). Антибиотики изониазид, рифампицин.

К действию дезинфицирующих веществ более  устойчивы, чем другие бактерии Þ требуются более высокие концентрации и более длительное время воздействия. При кипячении погибают мгновенно, чувствительны к УФ.

Факторы патогенности

--корд-фактор (димиколат трегалозы) – антифагоцитарный, протекция от АБ, токсическое  действие на организм

--Жирные  кислоты – миколевые и фтионовые  кислоты – токсическое действие  на клетки организма

--туберкулопротеины  – аллергизирующее действие

Патогенез. Источник заражения – люди и животные с активно протекающим туберкулезом, с наличием воспалительных и деструктивных изменений, выделяющие микобактерии.

В зоне проникновения и размножения  возникает воспалительный очаг (первичный  эффект – инфекционная гранулема), наблюдаются сенсибилизация и специфический  воспалительный процесс в регионарных лимфоузлах – формируется первичный туберкулезный комплекс. При доброкачественном течении болезни первичный очаг может рассасываться, пораженный участок кальцинироваться и рубцеваться. Но этот процесс не завершается полным освобождением от возбудителя. В лимфоузлах и других органах туберкулезные бактерии сохраняются много лет, иногда в течение всей жизни. Такие люди, с одной стороны, обладают иммунитетом, а с другой – остаются инфицированными.

При сниженной сопротивляемости организма  первичный туберкулезный процесс  генерализуется. Диссеминация приводит к образованию в различных  органах туберкулезных очагов. Характерна интоксикация. При генерализации  – поражение органов мочеполовой  системы, костей и суставов, мозговых оболочек, глаз.