Автор работы: Пользователь скрыл имя, 01 Мая 2013 в 18:33, курсовая работа
Цель курсовой работы – закрепление, расширение и углубление знаний, полученных при изучении теоретических курсов по методам контроля продовольственных товаров, приобретение практических навыков и опыта работы с научной и патентной литературой, нормативной и технической документацией. Приобретение навыков критического осмысления, анализа и обобщения литературных источников, а также овладение научной методикой исследования при решении конкретных задач.
Введение …………………………………………………………………………………….5
1 Аналитический обзор литературы……………………………………………………….6
1.1 Характеристика мочевой кислоты………………………………………………6
1.2 Методы определения мочевой кислоты в крови…………………………………8
1.3 Характеристика выбранного метода определения……………………………12
2 Разработка проекта МВИ……………………………………………………………….16
3 Экспериментальная часть……………………………………………………………….19
3.1 Объекты и методы исследований………………………………………………..19
3.2 Результаты исследований ………………………………………………………..19
Выводы ……………………………………………………………………………………...20
Заключение………………………………………………………………………………...21
Список использованных источников…………………………………………………….22
Приложения………………………………………………………………………………..25
2 Биохимия / под ред. Е.С. Северина. – М.,2003. – 779 с.
3 Основы биохимии / А. Лининджер. – М., 1985. – 1-3 т.
4 Брокгауза, Ф.А. Энциклопедический словарь / Ф.А. Брокгауза, И.А. Ефрона. – С.-Пб: Брокгауза – Ефрона,1890-1907.
5 Биохимия / Л. Страйлер. – М.,1985. – 1-3 т.
6 Price, C. P. Analytical reviews in clinical biochemistry: The measurement of urate / C. P. Price, D. R. James // Ann. Clin. Biochem. – 1988. – Vol. 25. – P. 484-498.
7 Folin, О. A new (colorimetric) method for the determination of uric acid in blood / О. Folin, W. Denis // J. Biol. Chem. – 1912–1913. – Vol. 13. – P. 469-475.
8 Benedict, S. R. On the colorimetric estimation of uric acid in urine / S. R. Benedict, E. H. Hitchcock // J. Biol. Chem. – 1915. – Vol. 20. – P. 619-627.
9 Sainbhi M. P. Simplified procedure of uric acid / M. P. Sainbhi, Grollman A. // Сlin. Chem. – 1959. – Vol. 5. – P. 623-633.
10 Standard methods of clinical chemistry / Natelson S. // Academic Press. – 1964. – Vol. 4. – P. 123-135.
11 Standard methods of clinical chemistry / W. T. Caraway // Academic Press. – 1964. – Vol. 1. – P. 239–247.
12 Price, C. P. Analytical reviews in clinical biochemistry: The measurement of urate / C. P. Price, D. R. James // Ann. Clin. Biochem. – 1988. – Vol. 25. – P. 484-498.
13 Differential spectrophotometry of purine compounds by means of specific enzymes. I. Determination of hydroxypurine compounds / H. M. Kalckar // J. Biol. Chem. – 1947. – Vol. 167. – P. 429-443.
14 A direct colorimetric determination of uric acid in serum and urine with uricase-catalase system / Kageyama N // Clin. Chim. Acta. – 1971. – Vol. 31. – P. 421-426.
15 Gochman, N., Schmitz J. M. /Automated determination of uric acid, with use of a uricase-peroxidase system // Clin. Chem. – 1971. – Vol. 77. – P. 1154-1159.
16 Marymount J. H. Jr., London M. Analyses performed with heat-coagulated blood and serum. VI. Direct determination of urates by means of o-dianisidine oxidation // Am. J. Clin. Pathol. – 1964. – Vol. 42. – P. 630-633.
17 Gochman N., Schmitz J. M. Automated determination of uric acid, with use of a uricase-peroxidase system // Clin. Chem. – 1971. – Vol. 17. – P. 1154-1159.
18 Fossati P., Prencipe L., Berti G. Use of 3,5-dichloro-2-
19 Trinder P.Determination of glucose in blood using glucose oxidase with an alternative oxygen acceptor // Ann. Clin. Biochem. – 1969. – Vol. 6. – P. 24–27.
20 Долгов, В. В. Лабораторная энзимология / В.В. Долгов. [и др.]. – М., 2002. – 159 с.
21 The use of aldehyde dehydrogenase to determine H2O2 producing reactions. 1 . The determination of the uric acid concentration / Haeckel R. // J. Clin. Chem. Clin. Biochem. – 1976. – Vol. 14. – P. 101-107.
22 Simultaneous determination of allopurinol, oxipurinol, and uric acid in human plasma by high performance liquid chromatography / Nissen P // J. Chromatogr. – 1982. – Vol. 225. – P. 382-386.
23 Ellerbe, P. Determination of serum uric acid by isotope dilution mass spectrometry as a new candidate reference method / P.Ellerbe [et al.] // Anal. Chem. – 1990. – Vol. 62. – P. 2173-2177.
24 Bell, R. A. A rate-sensing approach to the measurement of uric acid in serum and urine / Bell R., Ray R. A. // Clin. Chem. – 1971. – Vol. 17. – P. 644-649.
25 Troy R. J. The coulometric determination of uric acid in serum and urine / Troy R. J., Purdy W. C // Clin. Chim. Acta. – 1970. – Vol. 27. – P. 401-408
26 Duncan, P. Development and evaluation of a candidate reference method for uric acid in serum / P.Duncan [et al.]. – 1979,
27 Heins, M. Storage of serum or whole blood samples. Effects of time and temperature on 22 serum analytes / Heins M., Heil W. // Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. – 1995. – Vol. 33. – P. 231-238.
28 Энциклопедия клинических лабораторных тестов / Под ред. Н.Тица (пер. с англ.). М.: Лабинформ, 1997.
29 Фотохимический анализ. Методы
определения органических
30 основы аналитической химии. Методы химического анализа / Под ред. Ю.А. Золотова. – 2-езд., перераб. и доп. – М.: Высш. Шк. – 2000. – 494 с.
31 Государственная система обеспечения единства измерений. Методика выполнения измерений. Основные положения: ГОСТ 8.010–99. – Введ. 01.06.2001. – М.: Межгос. совет по стандартизации, метрологии и сертификации: Белорус. гос. ин-т стандартизации и сертификации, 1999. – 23 с.
32 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Общие принципы и определения: СТБ ИСО 5725–1–2002. – Введ. 01.07.2003. – Минск: Госстандарт: Белорус. гос. ин-т стандартизации и сертификации, 2000. – 26 с.
33 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений: СТБ ИСО 5725–2–2002. – Введ. 01.07.2003. – Минск: Госстандарт: Белорус. гос. ин-т стандартизации и сертификации, 2000. – 54 с.
34 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений: СТБ ИСО 5725–3–2002. – Введ. 01.07.2003. – Минск: Госстандарт: Белорус. гос. ин-т стандартизации и сертификации, 2000. – 36 с.
35 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 4. Основные методы определения правильности стандартного метода измерений: СТБ ИСО 5725–4–2002. – Введ. 01.07.2003. – Минск: Госстандарт: Белорус. гос. ин-т стандартизации и сертификации, 2000. –31 с.
36 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 5. Альтернативные методы определения прецизионности стандартного метода измерений: СТБ ИСО 5725–5–2002. – Введ. 01.07.2003. – Минск: Госстандарт: Белорус. гос. ин-т стандартизации и сертификации, 2000. – 57 с.
37 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике: СТБ ИСО 5725–6–2002. – Введ. 01.07.2003. – Минск: Госстандарт: Белорус. гос. ин-т стандартизации и сертификации, 2000. – 50 с.
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
УО «БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ»
МЕТОДИКА
Методика выполнения измерений определения мочевой кислоты в крови
Минск 2011
1 Назначение МВИ
Настоящий документ устанавливает методику определения содержания мочевой кислоты в крови фотометрическим методом при длине волны 590-700 нм (красный светофильтр) и в кювете с толщиной слоя в 1 см. Интервал определяемых концентраций составляет от 0,15-1,50 ммоль/л.
2 Метод измерения
Для определения содержания мочевой кислоты в крови используется фотометрический метод, основанный на переведении определяемого компонента в поглощающее свет соединение с последующим определением количества этого компонента путём измерения светопоглощения раствора полученного соединения.
Сущность метода заключается в том, что мочевая кислота восстанавливает фосфорно-вольфрамовый реактив, давая синюю окраску, пропорциональную ее концентрации в анализируемом образце и определяем на фотоэлектроколориметре экстинкцию раствора (оптическая плотность, измеренная на определенной длине волны и в кювете толщиной слоя 1 см). Эта окраска сопоставляется с окраской стандартного раствора мочевой кислоты, обработанной в одинаковых условиях.
3 Показатели точности МВИ
Количественные значения показателей точности при доверительной вероятности р=0,95:
Таблица 1 – Показатели точности
Стандартное отклонение повторяемости (σr), 10-2 ммоль/л |
1,23 |
Стандартное отклонение воспроизводимости (σR), 10-2 ммоль/л |
1,47 |
4 Требования к средствам измерений, вспомогательным устройствам, материалам, растворам
4.1 Средства измерений
Колориметр фотоэлектрический лабораторный ФЭК-56М, КФК или другого типа, обеспечивающий заданную чувствительность и точность;
Весы лабораторные Adventure АV 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 210 г по ГОСТ 24104-2001;
Термометр с диапазоном измерения от 0ºС до 100ºС, с ценой деления 1ºС по ГОСТ 28498-90.
Пипетки вместимостью 2, 5 и 10 см3 исполнений 1, 1а, 2 и 2а, 2-го класса точности по ГОСТ 29228-91;
Цилиндр мерный лабораторный 3-100-1 с допускаемой погрешностью не более ±0,5 см3 по ГОСТ 1770-74.
4.2 Материалы и реактивы
Мочевая кислота;
Формалин, не ниже 37,5%-ной концентрации по ГОСТ 1625-89;
Ортофосфорная кислота 85%-ная по ГОСТ 10678-76;
Литий сернокислый (сульфат лития) по ТУ 6-09-3358-84, ч;
Лития карбонат по ТУ 6-09-3728-83, ч (хч).
4.3 Растворы
4.3.1 Серная кислота, 0,35 моль/л;
4.3.2 Натрий вольфрамовокислый двухводный (Na2WO4∙2H2O), 100 г/л;
4.3.3 Натрия карбонат, 103 г/л;
4.3.4 Фосфорновольфрамовый раствор;
4.3.5 Основной калибровочный раствор мочевой кислоты, 6 ммоль/л;
4.3.6 Рабочий калибровочный раствор мочевой кислоты, 0,03 ммоль/л.
Указанные выше растворы (пп. 4.3.1-4.3.6) готовят при температуре 20±5 °С.
Сроки хранения растворов при температуре 20±5 °С следующие: серная кислота (п.4.3.1) – не более 2 недель; натрий вольфрамовокислый двухводный.4.3.2) – не более 5 суток; натрия карбонат (п.4.3.3) – не более 17 суток.
При хранении в холодильнике: раствор мочевой кислоты (пп.4.3.5-4.3.6) – в течение 2 недель; фосфорновольфрамовый реактив (п. 4.3.4) – в течении недели
5 Условия выполнения измерений
При выполнении измерений должны быть соблюдены следующие условия:
– температура воздуха 20±5 °С;
– атмосферное давление 84,0–106,7 кПА (630–800 мм рт.ст.);
– влажность воздуха не более 80 % при температуре 20 оС;
– напряжение питающей сети 230±23 В;
– частота переменного тока 50±0,5 Гц.
6 Требования к обеспечению безопасности выполняемых работ
6.1 Анализ по данной методике должен выполняться согласно инструкции «Основные правила безопасности работы в химических лабораториях» – М.: Химия, 1979 г. и инструкции по эксплуатации, используемых средств измерений.
6.2 Требования безопасности – по ГОСТ 12.1.019-79, ГОСТ 12.2.003-91, ГОСТ 12.2.007.0-75, ГОСТ 12.2.091-2002, ГОСТ 12.3.019-80 и ГОСТ МЭК 61010-2-051-2002.
6.3 Требования пожарной безопасности – по ГОСТ 12.1.004-91 и пожарной защиты по ГОСТ 12.4.009-83.
6.4 При выполнении работ должны быть соблюдены правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79.
6.5 При выполнении измерений на приборе соблюдают правила, указанные в "Руководстве по правилам эксплуатации фотоэлектроколориметра".
7 Требования к обеспечению экологической безопасности
7.1 В процессе выполнения анализа по данной методике не образуются выбросы и отходы опасные для окружающей среды. Приготавливаемые анализируемые растворы не являются токсичными и утилизируются в порядке, установленном действующими законодательными актами Республики Беларусь в данной области.
7.2 Отработанные химические реактивы и отходы перед сливом в канализацию необходимо нейтрализовать хромовой смесью.
8 Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений могут быть допущены лица, имеющие среднее профессиональное образование по специальности "лабораторная диагностика", сертификат специалиста по специальности "лабораторная диагностика", "гистология", "лабораторное дело", изучившие требования безопасности и настоящую методику и прошедшие подготовку для работы в качестве оператора фотоэлектроколориметра.
9 Операции при подготовке к выполнению измерений
9.1. Подготовка посуды.
Подготовка обеззараженной посуды
предполагает предварительное
9.2. Подготовка прибора к анализу.
Кюветы, в которых проводят измерение поглощения, должны быть тщательно очищены: их моют концентрированной соляной кислотой, водопроводной водой, несколько раз споласкивают дистиллированной водой и насухо вытирают снаружи. Во всех случаях кювету предварительно споласкивают небольшим количеством раствора, оптическую плотность которого собираются измерять.
Кювету заполняют до такого уровня, чтобы поток излучения проходил только через слой раствора. Толщину слоя кюветы выбирают таким образом, чтобы измеряемые величины D укладывались в оптимальном интервале 0,1-1,0. Кюветы устанавливают в кюветное отделение прибора всегда в строго определенное положение, чтобы избежать ошибок, связанных с отражением и рассеянием излучения.
Прибор включают за 25-30 мин до начала работы, так как первое время после включения показания не постоянны, система должна прогреться. При этом шторка должна быть закрыта.
Оба отсчетных барабана устанавливают на нуль по красной шкале (100% по шкале светопропускания), диафрагмы полностью раскрыты. После этого проверяют «электрический нуль» прибора: стрелка миллиамперметра должна стоять на нуле (при закрытых шторках). Если стрелка отклоняется, специальной рукояткой 7 подводят стрелку миллиамперметра к нулю.
Информация о работе Разработка методики выполнения измерений определения мочевой кислоты в крови