Шпаргалка по "Медицине"

IFN-α- явная антипролиферативная акт-ть. Обладает иммуномодулир-ей активность,оказ-ет стимулир-ее д-ие на NK-клетки.

IFN-γ- антипролиферативная акт-ть, т.к стимулирует их к диффер-ке, повышает экспрессии. HLA-антигенов 1,2 класса на клетках опухоли- повыш-ся возможность распознания их Т-лимфоцитами.

TNF-α- вызывает апоптоз опух клеток и развитие геморрагич-го некроза в ткани опухоли. Оказ-ет иммуномодулир-ее д-ие: стимулирует выработку макрофагами  ИЛ-1, способствует активации Т-киллеров и секреции ими IFN-γ, активации Тх1, а также активации NK-клетки.

Билет15

Иммунная система  новорожд и детей первыхУ новорожд низка цитотоксич активность Т-лимфоцитов и естеств киллеров, огранич продукция интерлейкин и интерферон, физиол дефицит интерферонов опред недост противовирус Имун. в ранние периоды жизни. ослаб процессы активации системы комплемента, особен альтернатив пути. Спонтанная миграция и хемотаксис фагоцитов проявл слабо. Низка продукц фактора, тормозящ миграцию макрофагов. Фагоцитоз часто оказ незавершен. Воздейсв разл антигенов на первом году жизни вызыв первич иммунный ответ, проявляющ повышен синтеза антител класса lgM. Постепенно происходит переключение гумор реакций иммун ответа на синтез антител класса lgG. Лимфоидные органы ребенка раннего возраста отвечают на инфекц агенты значит гиперплазией,. В процессе роста критич периоды когда  на антиген воздействия иммун система дает неадекв ответ: 1-первые 29 дней нейтрофилез сменяется относ и абсол лимфоцитозом.    2- (3—6 мес.), хар ослаб пассивного гумор И. в связи с элиминацией материнск антител.    3- на второй год жизни, когда расширяются контакты ребенка с внешним миром.    4 — 4—6-й годы жизни второй перекрест в сод форм элементов кро

Цитокины. Определение, основные характеристики. Цитокины(Ц)-общее название медиаторов, являющихся белковыми или полипептидными продуктами активированных клеток иммунной системы, опосредующих широкое и сложное взаимодействие м/у клетками иммунной системы и другими клетками организма в процессах иммунного ответа и неспецифической защиты от антигенов самой разной природы. Ц являются гуморальной составляющей межклеточных взаимодействий в иммунной системе. Сущ. Более 40 видов. Они регулир. Продолжительность и силу иммунных реакций и воспаления, также уч-ют в кроветворении, развитии патологии и т.д. Ц начинают продуцироваться в ответ на различные стимулы и действуют системно (эндокринно) в циркулирующей крови, паракринно(от клетки к соседней клетке) и аутокринно(действие клетки на саму себя). Группы: ИЛ-ф-ры взаимодействия м/у лейкоцитами; интерфероны-Ц с пртивовирусной активностью; факторы некроза опухолей (ФНО)-Ц с цитотоксической активностью; колониестимулирующие факторы-гемопоэтические Ц; хемокины-медиаторы, вызывающие хемотаксис. Особенности: 1 Ц может продуцироваться несколькими типами клеток, 1 клетка может продуцировать неск-ко Ц, 1 Ц может действовать на неск-ко типов клеток, неск-ко Ц могут индуцировать одинаковую ф-ю у конкретно взятого типа клеток. Клетки-продуценты: стромальные клетки (фибробласты, эндотелиальные клетки), моноциты/макрофаги, Т-хелперы 1,2.

Условия, определяющие успешную трансплантацию в клинике. Материальным субстратом несовместимости считают внутривидовые различия тканевых или гистолейкоцитарных антигенов (антигенов системы НLА). Таким образом, важнейшим в определении судьбы трансплантата фактором является подбор совместимой по НLА пары донор — реципиент. При пересадке трупного материала подбор совместимого по антигену НLА-А и В донора улучшает выживаемость трансплантата на 10—15 %. При этом большее значение имеет совместимость по НLА-В локусу, чем по НLА-А локусу. Подбор по НLА-С локусу несуществен для трансплантации. Показано, что НLА-011-совместимость увеличивает одногодичную выживаемость трансплантата на 15—20 % по сравнению с несовместимостью по двум ОЯ-антигенам. Наилучший эффект трансплантации наблюдается при отсутствии несовместимости по НLА-А, -В, -ОЯ или только по НLА-В и -ЭЯ. Иммунологическое обеспечение реципиента и донора подразумевает выполнение обязательных иммунологических исследований. 1. Тканевое типирование при аллогенной трансплантации как донора, так и реципиента, включающее серологическое типирование и постановку смешанной культуры лимфоцитов (для определения антигенов II класса).

2. Исследование иммунного статуса проводят как у донора, так и у реципиента. Обязательным для донора является контроль на носительство вируса СПИД или антител к нему, выявление антител к цитомегаловирусу и вирусу Эпстайна—Барра.

Билет 16

Иммунные регуляторные процессы в старческом возрасте.  На возраст ослаб функций иммун сист влияют экзоген и эндоген факторы: изменен клет окружения изменен самих клеток иммун сист. В старости Т-иммунодеф - обуслов возраст инволюц тимуса. Хар для старения явл умен кол Т-лимфоц. Однако иногда общее кол клеток может и не меняться, но увелич кол молчащих, клеток, что связано со сниж активности рецептор аппарата клетки. Однако влияние инволюц процессов в тимусе захват и В-клеточное звено - как путем взаимод клеток в иммун ответе, так и путем влияния на формир В-клеток из их предшествен в костном мозге, в отдел случаях В-клет иммунодеф зависит от внут дефектов самих В-клеток. Старение ассоциир с присутст разл антител, особенно антител против ядерных антигенов. С возрастом развив дисбаланс Ig . снижение в IgM, т.е. снижен первич гумор ответ. Сод IgG и IgA к увелич. При наличии инфекц процесса  возраст IgA. Дисбаланс Ig указ на сниж противомикроб защиты противовирус и противоопухол защиты, что связано непосред с реакциями клет иммун, в кот принимают участие естественные киллеры (ЕК-клетки). При старении меняется кол сод клеток киллеров, оно может как увел, так и сниж

Определение концентрации сывороточных и секреторных иммуноглобулинов; общего количества лимфоцитов, абсолютного  и относительного количества В-лимфоцитов. Определение количества Т-лимфоцитов

Тест розеткообразования — классический метод определения  количества Т-лимфоцитов в периферической крови — основан на наличии  на мембране Т-лимфоцитов всех субпопуляций рецепторов к эритроцитам барана и способности Т-лимфоцитов образовывать с ними прочные комплексы (так называемые розетки) Кровь обследуемого пациента в количестве 10 мл вносят в пробирку с раствором гепарина и осторожно наслаивают на смесь фиколл-гипака, который способствует выделению лимфоцитов, и центрифугируют. После центрифугирования эритроциты оседают на дно пробирки, а лимфоциты располагаются тонким слоем на границе раствора фиколл-гипака и плазмы. Взвесь лимфоцитов осторожно извлекают из этого слоя (интерфазы), доводят до концентрации 2–4x106/мл (2–4x109/л) и смешивают с взвесью эритроцитов барана в соотношении 1:1.

Полученную смесь инкубируют при 37°С в течении 10 минут и снова  центрифугируют, после чего выдерживают  в холодильнике при температуре 4 °С в течение нескольких часов. Подсчет клеток производят в камере Горяева при люминесцентной микроскопии. Подсчитывают число “розеток” на 100 лимфоцитов и определяют процентное содержание Т-лимфоцитов. Для определения абсолютного количества Т-лимфоцитов в день исследования производят общий клинический анализ крови.

В норме содержание Т-лимфоцитов в периферической крови колеблется от 50 до 70% от общего количества лимфоцитов (в среднем 54,3±1,0%).

Определение активных Т-лимфоцитов

Активные Т-лимфоциты  — это клетки, способные к спонтанному  розеткообразованию без предварительной инкубации. Ход исследования тот же, что и при определении общего числа Т-лимфоцитов, за исключением этапа инкубации. В норме в периферической крови содержится от 23 до 40% активных Т-лимфоцитов (в среднем 34,6±1,9%).

Определение субпопуляций Т-лимфоцитов

Определение субпопуляций Т-лимфоцитов основано на выявлении  так называемых теофиллинчувствительных  и теофиллинрезистентных лимфоцитов. Клеточные мембраны Т-супрессоров, как было сказано выше, имеют рецепторы  к теофиллину, который при взаимодействии с клеткой ингибирует реакцию спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана. Т-хелперы таких рецепторов не содержат, поэтому при взаимодействии с эритроцитами барана даже при добавлении теофиллина образуются “розетки”.

Методика количественного  определения Т-супрессоров и Т-хелперов мало отличается от описанного выше теста розеткообразования, за исключением добавления в инкубационную среду раствора теофиллина. При этом Т-супрессоры (теофиллинчувствительные клетки) теряют способность розеткообразования с эритроцитами барана, а Т-хелперы (теофиллинрезистентные клетки) такую способность сохраняют В последние годы для определения субпопуляций Т-лимфоцитов используют добавление к взвеси лимфоцитов моноклональных антител и комплемента, что приводит к лизису соответствующей фракции лимфоцитов. С помощью моноклональных антител можно выявить все известные субпопуляции Т-, В- и О-лимфоцитов, в том числе так называемые естественные клетки-киллеры.

Определение количества В-лимфоцитов

Методы определения  количества В-лимфоцитов основаны на наличии на поверхности этих клеток специфических рецепторов к иммуноглобулинам и комплементу (С3). Наиболее простым способом количественной оценки В-лимфоцитов является модифицированный метод розеткообразования с эритроцитами барана (Е), нагруженными антителами (А) — иммуноглобулинами класса IgМ, в среде комплемента (С). Это так называемый тест ЕАС-розеткообразования. Для проведения теста, помимо реактивов, используемых для определения Т-лимфоцитов, необходима: 1) антисыворотка, содержащая антитела к эритроцитам барана (IgМ), которую получают путем иммунизации кролика эритроцитами барана, и 2) свежая сыворотка мышей, содержащая комплемент. К эритроцитам барана добавляют антисыворотку иммунизированного кролика, содержащую антитела к эритроцитам (IgМ). При этом подбирается такая концентрация IgМ, которая не приводит к агглютинации эритроцитов и их гемолизу. К образовавшемуся комплексу ЕА (эритроциты-антитела) добавляют мышиную сыворотку, содержащую комплемент (С3), получая таким образом ЕАС-комплекс (эритроциты- антитела-комплемент).

Последующий ход реакции  примерно тот же, что и при определении  Т-лимфоцитов: выделенную взвесь исследуемых  лимфоцитов смешивают с заранее  приготовленной ЕАС-системой. Эритроциты барана с фиксированными на них IgМ и комплементом присоединяются к В-лимфоцитам, в результате чего образуются “розетки”. Подсчет количества “розеток” проводят в камере Горяева. При оценке результатов теста следует иметь в виду, что рецепторы к комплементу имеются на некоторых субпопуляциях Т-лимфоцитов, поэтому описанный метод дает лишь приблизительное представление о количестве В-лимфоцитов.

Более точные результаты можно получить при использовании  метода иммунофлюоресценции с мембранными  иммуноглобулинами. К исследуемым  лимфоцитам добавляют антисыворотки против иммуноглобулинов человека, меченные флюорохромом. Лимфоциты, к рецепторам которых присоединяются соответствующие иммуноглобулины (IgM, IgG, IgА), можно легко обнаружить при микроскопии по характерной флюоресценции и провести подсчет как общего числа В-лимфоцитов, так и отдельных их субпопуляций.

В норме в периферической крови содержится 15–35% В-лимфоцитов (в среднем 25,0±1,2%).

Для характеристики состояния  клеточного иммунитета важно оценить  не только количество В- и Т-лимфоцитов и их субпопуляций, но и функциональное состояние иммунокомпетентных клеток. В клинической практике для этой цели используют в основном два теста: 1) реакцию торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) и 2) реакцию бластной трансформации лимфоцитов (БТЛ).

Реакция торможения миграции лейкоцитов

Реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) позволяет охарактеризовать функцию Т-лимфоцитов. Реакция основана на свойстве коммитированных Т-лимфоцитов при контакте со специфическим антигеном  выделять фактор, ингибирующий миграцию макрофагов (лимфокины). В среде, в которую добавлен антиген, сенсибилизированные к нему лимфоциты снижают подвижность лейкоцитов: чем выше активность Т-лимфоцитов, связывающих специфический антиген, тем в большей степени тормозится процесс передвижения лейкоцитов в сторону данного антигена. Наоборот, если Т-лимфоциты не сенсибилизированы к данному (известному) антигену, реакции торможения не происходит.

Таким образом, РТМЛ позволяет выявить  антиген (например специфический печеночный антиген и др.), к которому сенсибилизированы Т-лимфоциты и, следовательно, может быть использована в выявлении органоспецифической гиперчувствительности замедленного типа.

Лейкоциты крови, отмытые от сыворотки, смешивают с антигеном, к которому они сенсибилизированы. Лейкоцитарную взвесь набирают в капилляры, которые помещают в специальные камеры для инкубации (рис. 1.114). Контролем служат лейкоциты, не обработанные антигеном. В качестве антигена используют митогены растительного происхождения — фитогемагглютинин (ФГА) или конканавалин А (Кон А), а также органоспецифичные антигены (например специфический печеночный или почечный антиген, нативную ДНК и др.), аллергены, используемые для внутрикожных проб (туберкулин и др.). В процессе инкубации лейкоциты перемещаются из конца капилляра. Площадь, которую они занимают, отражает степень торможения миграции лейкоцитов. Отношение площади миграции лимфоцитов в присутствии антигена (опыт) и без него (контроль) представляет собой индекс миграции. В норме он составляет 0,8–1,2. Снижение индекса миграции меньше 0,8 является показателем активного торможения.

Если в качестве антигенов использовать специфические клеточные структуры  тех или иных внутренних органов (например мембраны кардиомиоцитов, печеночных липопротеидов, амилоидных фибрилл и т. п.), РТМЛ может оказаться полезной для подтверждения местной (органной) гиперчувствительности замедленного типа (например при неспецифическом миокардите, хроническом активном гепатите, амилоидозе почки и т. п.). При использовании бактериальных антигенов положительные результаты РТМЛ помогают решить вопрос об этиологии воспалительного инфекционного процесса. Наконец, результаты РТМЛ с неспецифическими ФГА и Кон А косвенно отражают общую функциональную активность Т-лимфоцитов.

В норме РТМЛ с ФГА составляют в среднем 40,5±1,8%, а с Кон А — 59,1±1,7%.