Шпаргалки по "Микробиологии"

4. их свойства должны  быть типичными и легко выявляемыми  для их дифференциации;

5. методы их обнаружения  и идентификации должны быть  простыми, методически и экономически  доступными;

6. должны встречаться в  окружающей среде в значительно больших количествах, чем патогенные микроорганизмы;

7. в окружающей среде  не должно быть близко сходных  обитателей — микроорганизмов.

Микрофлора воздуха и  методы ее исследования.

Микробиологический контроль воздуха проводится с помощью  методов естественной или принудительной седиментации микробов. Естественная седиментация (по методу Коха) проводится в течение 5—10 мин путем осаждения  микробов на поверхность твердой  питательной среды в чашке  Петри. Принудительная   седиментация   микробов осуществляется путем «посева» проб воздуха на питательные среды  с помощью специальных приборов (импакторов, импинджеров, фильтров). Импакторы  — приборы для принудительного  осаждения микробов из воздуха на поверхность питательной среды (прибор Кротова, пробоотборник аэрозоля бактериологический и др.). Импинджеры — приборы, с  помощью которых воздух проходит через жидкую питательную среду  или изотонический раствор хлорида  натрия.

Санитарно-гигиеническое  состояние воздуха определяется по следующим микробиологическим показателям:

1. Общее количество микроорганизмов  в 1 м3 воздуха (так называемое  общее микробное число, или  обсемененность воздуха) — количество  колоний микроорганизмов, выросших  при посеве воздуха на питательном  агаре в чашке Петри в течение  24 ч при 37 °С, выраженное в КОЕ;

2. Индекс санитарно-показательных  микробов— количество золотистого стафилококка и гемолитических стрептококков в 1 м3 воздуха. Эти бактерии являются представителями микрофлоры верхних дыхательных путей и имеют общий путь выделения с патогенными микроорганизмами, передающимися воздушно-капельным путем. Появление в воздухе спорообразующих бактерий — показатель загрязненности воздуха микроорганизмами почвы, а появление грамотрицательных бактерий — показатель возможного антисанитарного состояния.

Патогенные микробы в  воздухе, механизм распространения  и пути передачи инфекции.

 

В воздух попадают микроорганизмы из дыхательных путей и с каплями  слюны человека и животных. Здесь  обнаруживаются кокковидные и палочковидные  бактерии, бациллы, клостридии, актиномицеты, грибы и вирусы.

 

Золотистый стафилококк  и гемолитические стрептококки являются представителями микрофлоры верхних  дыхательных путей и имеют  общий путь выделения с патогенными  микроор­ганизмами, передающимися воздушно-капельным путем. Появление в воздухе спорообразующих бактерий — показатель загрязненности воздуха микроорганизмами почвы, а появление грамотрицательных бактерий — показатель возможного антисанитарного состояния.

По эпидемиологическим показаниям в воздухе определяют наличие  сальмонелл, микобактерий, вирусов.

Санитарно-бактериологическое исследование воздуха. Методы, аппаратура.

С целью снижения микробной  обсемененности воздуха проводят влажную  уборку помещения, очистку поступающего воздуха. Применяют также аэрозольную  дезинфекцию и обработку помещений  лампами ультрафиолетового излучения.

САН-ПОКАЗАТЕЛЬНЫЕ  мкÒ В РАЗЛ ОБЛАСТЯХ СРЕДЫ

ВОДА – кишечные палочки  и энтерококки.

ПОЧВА – кишечные палочки, энтерококки, Clostridium perfringens, термофилы.

ВОЗДУХ– стрепто- (зеленящие и гемолитические), патогенные стафилококки.

ПИЩЕВЫЕ ПРОДУКТЫ – кишечные палочки, энтерококки, патогенные стафилококки, протей.

ПРЕДМЕТЫ обихода –  киш палочки, энтерококки, патогенные стафилококки.

ЗНАЧЕНИЕ мкÒ ДЛЯ ОКР СРЕДЫ

Участвуют в круговороте  веществ, нитрифицирующие Б!! разлагают  аммиак, соли аммония и азотистой  кислоты, фиксируют N (важно для растений), разлагают орг в-ва, образуют гумус (↑ плодородие почв), участвуют в круговороте C, S, P и др элементов, разрушают попадающие в воду и почву ксенобиотики (обычно не встречаются в природе, появляются в результате деятельности человека).

С развитием молекулярной генетики возникла проблема защиты природы  от искусственных мутантов, а с  выходом человека в космос – предупреждение заноса на нашу планету внеземных  и попадания в космос земных микроорганизмов.

 

19) водная микрофлора. Микробное числов воды, методы учета. Коли-титр, коли-индекс. Нормативы питьевой воды

Загрязненность воды определяется по общей микробной обсемененности и обнаружению санитарно-показательных  микроорганизмов — индикаторов  наличия выделений человека или  животных. В воде регистрируют кишечную палочку, БГКП (колиформные палочки), энтерококк, стафилококки;

На основании количественного  выявления этих санитарно-показательных  бактерий вычисляются индекс БГКП (число  БГКП в 1 л воды), перфрингенс-титр, титр энтерококка и т.д. Так, например, титр энтерококка воды — это наименьшее количество воды, в котором определяется энтерококк.

К бактериям группы кишечной палочки относят грамотрицательные  палочки, сбраживающие с образованием кислоты и газа лактозу или  глюкозу при температуре 37°С в течение 24-48 ч и не обладающие оксидазной активностью. Наиболее часто этот показатель применяют как индикатор фекального загрязнения воды. Другой сходный показатель фекального загрязнения — общие колиформные бактерии: грамотрицательные, оксидаза-отрицательные палочки, ферментирующие лактозу или маннит (глюкозу) с образованием альдегида, кислоты и газа при температуре 37°С в течение 24 часов. Вместо последнего термина предлагается использовать термин «бактерии семейства Enterobacteriaceae», так как все бактерии этого семейства имеют индикаторное значение. К бактериям семейства Enterobacteriaceae относятся грамотрицательные, оксидазаотрицательные палочки, растущие на лактозосодержащих средах типа среды Эндо и ферментирующие глюкозу до кислоты и газа при температуре 37°С в течение 24 часов; колиформные бактерии (палочки).

При бактериальном загрязнении  воды свыше допустимых норм следует  провести дополнительное исследование на наличие бактерий — показателей  свежего фекального загрязнения. К  таким бактериям относят термотолерантные колиформные бактерии, фекальные  кишечные палочки, ферментирующие лактозу  до кислоты и газа при температуре 44 °С в течение 24 часов и не растущие на нитратной среде. О свежем фекальном загрязнении свидетельствует также выявление энтерококка. На давнее фекальное загрязнение указывают отсутствие БГКП и наличие определенного количества клостридий перфрингенс, т. е. наиболее устойчивых спорообразующих бактерий.

В соответствии с нормативными документами регламентируются следующие  нормативы микробиологических показателей  питьевой воды при централизованном водоснабжении:

1. Общее микробное число  воды не должно превышать 100 микробов в 1 мл исследуемой  воды;

2. Общие колиформные бактерии  должны отсутствовать в 100 мл исследуемой воды;

3. Термотолерантные колиформные  бактерии должны отсутствовать в 100 мл исследуемой воды;

4. Колифаги не должны  определяться в 100 мл исследуемой  воды (учет по бляшкообразующим единицам);

5. Споры сульфитредуцирующих  клостридий не должны определяться в 20 мл исследуемой воды;

6. Цисты лямблий не должны  определяться в 50 мл исследуемой  воды.

Кроме того, загрязненность воды оценивается по обнаружению  патогенных микробов с фекально-оральным механизмом передачи (энтеровирусы, энтеробактерии, холерные вибрионы и др.).

Исследование питьевой воды на присутствие возбудителей брюшного тифа, холеры и лептоспирозов.

В воде регистрируют кишечную палочку, БГКП (колиформные палочки).

 

Микрофлора воды. Факторы, влияющие на количество микробов в  воде.

 

Вместе с сточными водами попадают представители нормальной микрофлоры человека и животных (кишечная палочка, цитробактер, энтеробактер, энтерококки, клостридии) и возбудители кишечных инфекций (брюшного тифа, паратифов, дизентерии, холеры, лептоспироза, энтеровирусных инфекций). Таким образом, вода является фактором передачи возбудителей многих инфекционных заболеваний. Некоторые возбудители могут даже размножаться в воде (холерный вибрион, легионеллы).

Сан/МБ состояние  оценивается по:

микробному числу (кол-во хемоорганотрофных бактерий в 1 мл воды); ≤100

коли-титру (наименьший объем воды, в котором обнаруживается БГКП) ≥300

коли-индексу (кол-во БГКП в 1 л воды). ≤3

Т/ же определяют наличие  энтерококков, сальмонелл, холерного  вибриона, энтеровирусов.

 

20) микрофлора почвы. Микробное  число почвы, способы определения.  Санитарно-показательные микроорганизмы. Коли-титр, коли-индекс, перфрингенс-титр почвы

ПОЧВА. Плотность мкФ особенно высока в черноземных почвах, хорошо удобряемых сероземах. Максимальна на глубине 10-20 см, в верхнем слое и на глубине >1-2м мкÒ мало. МкÒ почвы осуществляют синтез биомассы и аккумуляцию энергии, фиксируют N, обеспечивают брожение, гниение, нитрификацию и денитрификацию, трансформацию S, P и других элементов. Почва содержит также мкÒ, поступающие из воды, воздуха и от животных. С водой в почву попадают патогенные и условно-патогенные мкÒ. В нормально функционирующей почве интенсивно протекает процесс самоочищения: органические вещества перерабатываются в гумус и почва освобождается от несвойственных ей грибов и бактерий.

Сроки выживания патогенных микробов в почве зависят от их вида и интенсивности процессов  самоочищения. Аспорогенные пат и  условно-пат Б!!, В!! выживают в течение нескольких дней – месяцев; споры возбудителей столбняка, сибирской язвы, анаэробной инфекции – много лет. Для возбудителей ботулизма, актиномикоза, глубоких микозов – естественная среда обитания.

Сан/МБ состояние  почвы оценивается по отношению  кол-ва термофильных Б!! и бактерий – показателей фекального загрязнения. Преобладание санитарно-показательных бактерий → санитарно неблагополучные почвы. Для определения давности фекального загрязнения почвы определяют несколько Ò. Присутствие в почве Е. coli и Streptococcus faecalis указывает на свежее; Citrobacter и Enterobacter – не свежее, a Clostridium perfringens – на давнее загрязнение.

Более точная оценка – с  помощью определения коли-индекса (кол-во БГКП в 1 г почвы), коли-титр - это наименьшее количество исследуемого материала, в к-ром обнаружена одна кишечная палочка. перфрингенс-титра (масса почвы, в которой обнаружена особь вида Cl.perfringens), общей численности сапрофитных, термофильных и нитрифицирующих бактерий в 1 г почвы.

Титр  БГКП и перфрингенс-титр для сильно загрязненных почв – 0,009; для чистых почв – коли-титр 1,0; перфрингенс-титр – 0,01. Коли-индекс — количество кишечных палочек, обнаруживаемое в 1 г почвы 1000/коли-титр.

 

21) Нормальная микрофлора  тела человека, полости рта.

Нормальная  микрофлора человека – это совокупность множества микробиоценозов, характеризующихся определенными взаимосвязями и местом обитания.

Виды  нормальной микрофлоры:

1) резидентная – постоянная, характерная для данного вида;

2) транзиторная – временно попавшая, нехарактерная для данного биотопа; она активно не размножается.

Факторы, влияющие на состояние нормальной микрофлоры.

1. Эндогенные:

1) секреторная функция организма;

2) гормональный фон;

3) кислотно-основное состояние.

2. Экзогенные условия жизни (климатические, бытовые, экологические).

В организме  человека стерильными являются кровь, ликвор, суставная жидкость, плевральная  жидкость, лимфа грудного протока, внутренние органы: сердце, мозг, паренхима печени, почек, селезенки, матка, мочевой пузырь, альвеолы легких.

Нормальная  микрофлора выстилает слизистые  оболочки в виде биопленки. Этот каркас состоит из полисахаридов микробных  клеток и муцина. Толщина биопленки  – 0,1–0,5 мм. В ней содержится от нескольких сотен до нескольких тысяч микроколоний.

Этапы формирования нормальной микрофлоры желудочно-кишечного  тракта (ЖКТ):

1) случайное обсеменение слизистой. В ЖКТ попадают лактобациллы, клостридии, бифидобактерии, микрококки, стафилококки, энтерококки, кишечная палочка и др.;

2) формирование сети из ленточных бактерий на поверхности ворсинок. На ней фиксируются в основном палочковидные бактерии, постоянно идет процесс формирования биопленки.

Нормальная  микрофлора рассматривается как  самостоятельный экстракорпоральный орган с определенной анатомической  структурой и функциями.

Функции нормальной микрофлоры:

1) Играет роль в пищеварении, в обмене веществ многие катаболические процессы, инактивация избытка ферментов в пищеварительном тракте, утилизация БАВ, которые могут вызвать воспалительный процесс, в условиях голодания микрофлора конкурент за питание, создают витаминный баланс, антагонистическая функция – комменсалы обладают высокой биоэнергетикой, быстро конкурируют с патогенными грибами, стимулируют защитную реакцию макрофагов. Резидентная микрофлора формирует специфический запах

Ротовая полость. До появления зубов аэробы, с первым зубом анаэроб, затем извитые. Актиномицеты, простейшие, грибы, вирусы, микоплазмы.

Микробные сообщества в полости  рта образуют аутохтонные и аллохтонные  микроорганизмы. Аутохтонную флору  полости рта образуют резидентные (постоянно обитающие) и транзиторные (временно присутствующие) микробы. Последние  наиболее часто включают условно-патогенные и патогенные виды и проникают  в полость рта прежде всего из окружающей среды; эти микроорганизмы не вегетируют в полости рта и быстро удаляются из неё. Аллохтонные микробы попадают в полость рта из других микробных биотопов (например, из кишечника или носоглотки).

Среди бактерий, обитающих  в полости рта, доминируют S. hominis и S. mitis обитают на слизистой оболочке, a S. sanguis и S. mutans колонизируют поверхность  зубов.

Среди аэробной флоры второе место занимают нейссерии, В частности, N. sicca выделяют у 45% лиц, Нейссерии обычно колонизируют носоглотку и поверхность языка. При воспалительных процессах и неудовлетворительной гигиене полости рта их количество увеличивается. Значительную группу составляют грамположительные палочки родов Corynebacterium и Lactobacillus. Коринебактерии в большом количестве выделяют у здоровых лиц, а содержание лактобацилл зависит от состояния полости рта. В состав микробных сообществ могут входить Lactobacillus casei, L. acidophilus, L. fermentum, L. salivarius и др. Лактобактерии способствуют развитию кариозного процесса, образуя большое количество молочной кислоты. Среди анаэробных грамположительных кокков из полости рта выделяют пептококки {P. niger) и пептострептококки (чаще P. prevotii). Бактерии не ферментируют углеводы, а для получения энергии разлагают пептоны и аминокислоты; часто выделяются в ассоциациях со спирохетами и фузобактериями при пульпитах, пародонтитах и абсцессах. Грам-отрицательные анаэробные бактерии представлены бактероидами, фузобактериями и лепто-трихиями. Они ферментируют углеводы до газа и разлагают пептоны до аминокислот, нередко имеющих гнилостный запах; чаще обитают в десневых карманах. До 1% анаэробной флоры составляют фузобактерии (F. plauti, F. nucleatum и др.). В ассоциациях со спирохетами они входят в состав аутохтонной флоры десневых карманов; при ферментации углеводов в большом количестве образуют молочную кислоту; вызывают ульцеромембранозный стоматит, корневые гранулёмы и воспаление тканей десны. Leptotrichia buccalis — строгий анаэроб, не проявляет тенденции к ветвлению и в качестве основного метаболита образует молочную кислоту. L. buccalis — центр осаждения зубного налёта и зубного камня. Доказано их участие в развитии кариеса за счёт значительного кис-лотообразования, причём L. buccalis является синергистом лактобацилл и участвует в процессах деминерализации тканей зуба. Ветвящиеся анаэробные грамположительные бактерии полости рта представлены актиноми-цетами и бифидобактериями. Актиномицеты ферментируют углеводы с образованием кислот, способствующих повреждению эмали зубов, и проявляют умеренную протеолитическую активность. За счёт выраженной способности к адгезии они быстро колонизируют слизистую оболочку, вытесняя другие бактерии. Актиномицеты — основная группа бактерий, выделяемых в налёте зубов и зубном камне. Актиномицеты нередко выделяют из кариозных полостей, поражений слюнных желёз и пародонта. Основные возбудители — A. israelii и A. viscosus. Спирохеты появляются в полости рта после прорезывания зубов, а у здоровых взрослых лиц встречаются лишь в редких случаях. При воспалительных процессах и, в особенности, при фузоспирохетозах, количество спирохет возрастает. Среди трепонем полости рта доминируют Т. macrodentium, Т. microdentium и Т. mucosum, среди лепто-спир — Leptospira dentium (L. buccalis). Среди микоплазм в полости рта присутствуют М. orale, М. hominis, M. pneumoniae и М. salivarium. У 60-70% лиц обнаруживают значительную грибковую колонизацию полости рта, особенно спинки языка. Наиболее часто выявляют Candida albicans. Другие виды (С. krusei, С. tropicalis, С. pseudotropicalis, С. quillermondii) выделяют лишь у 5% лиц. Реже выделяют Saccharomyces cerevisae, Torulopsis gtabrata, Cryptococcus neoformans, виды Aspergillus, Penicillium и Geotrichum. При поражениях дыхательного тракта и на фоне длительного приёма антибиотиков частота обнаружения грибов существенно возрастает. Среди простейших, обитающих в полости рта, доминируют Entamoeba gingivalis и Trichomonas tenax. Количество простейших возрастает при воспалении дёсен, но это увеличение не имеет патогенетического значения.