Разработка новой технологии получения и хранения сухих экстрактов

 

Полученную лёгкую рыхлую массу измельчали до размера крупного порошка. Далее экстракт стандартизовали  и упаковывали в тару тёмного стекла с пробкой и навинчивающейся крышкой. Затем производилась маркировка полученного сухого экстракта бессмертника.

 

 

 

 

 

 

 

 

2.6 Стандартизация сухого экстракта бессмертника.

 

2.6.1 Определение органолептических показателей.

Сухой экстракт бессмертника представляет собой крупный порошок буровато-жёлтого цвета, имеет слабый характерный запах, на вкус – горьковато-пряный. [17]

 

2.6.2 Определение физических показателей.

Полученный порошок  должен быть однороден, данный показатель определялся визуально. Степень измельчения порошка определяли с помощью сита с решётчатым полотном (размер отверстий – 0,5 +/- 0,05 мм, форма отверстий – круглая). Полученный порошок был расфасован по 5 г и упакован в тару тёмного стекла. Отклонение от средней массы одного порошка должно соответствовать требованиям нормативной документации, а именно, не превышать +/- 2 %. [35]

 

2.6.3 Качественное определение флаваноидов.

Наличие флавоноидов  определяли с помощью характерных  качественных реакций:

1. цианидиновой пробы (к исследуемым растворам прибавляли концентрированную кислоту хлористоводородную и магниевую стружку, наблюдается красное окрашивание);

2) цианидиновой по  Брианту; после проведения цианидиновой  реакции (восстановление исследуемого  вещества водородом) реакционную смесь разбавляли равным количеством дистиллированной воды, прибавляли 1 мл октанола и взбалтывали. Окрашивание октанольного слоя указывает на агликоновую природу исследуемого вещества; [30]

 3) с 2%-м раствором алюминия хлорида образуется желто-зеленое окрашивание;

   4) с 10%-м раствором  натрия гидроокиси образуется  желто-бурое окрашивание;

   5) со свинца  ацетатом флавоноиды, содержащие  О-диоксигруппу в кольце, образуют  желтый осадок; [34]

   6) с борно-цитратным  реактивом 5-оксифлавоны и 5-оксифлавонолы дают ярко-желтое окрашивание с желто-зеленой флуоресценцией;

   7) с жидкостью  Фелинга гидролизаты флавоноидных  гликозидов при нагревании образуют  кирпично-красные осадки. [28]

    Положительные  эффекты выше перечисленных реакций  свидетельствуют о наличии флавоноидов в цветках бессмертника песчаного.

    Для подтверждения  наличия флавоноидов в цветках  бессмертника песчаного использовали  метод хроматографии в тонких  слоях сорбента на пластинках  «Сорбфил» в системах растворителей: 15% кислота уксусная и 30% кислота уксусная. Хроматограммы рассматривали в УФ-свете. [8]

 

2.6.4 Количественное определение содержания действующих веществ.

Около 1 г (точная навеска) пробы помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл и доводят их объем 50% спиртом до метки (раствор А); 5 мл раствора А переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора 95% спиртом до метки (раствор Б). Оптическую плотность раствора Б измеряют на спектрофотометре при длине волны 315 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют 95% спирт. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца изосалипурпозида. [5,24]

Содержание  суммы флавоноидов в пересчете  на изосалипурпозид в экстракте в процентах (X) вычисляют по формуле:

          D х m₀ х 160 х 100

  Х = ----------------------------

           D₀ х m х (100 - W)

D - оптическая  плотность исследуемого раствора;

D₀ - оптическая плотность раствора стандарта изосалипурпозида;

m – масса экстракта в граммах;

m₀ - масса стандарта изосалипурпозида в граммах;

W - потеря в  массе при высушивании сырья  в процентах.

Допускается проводить  определение с использованием калибровочного графика. В этом случае содержание суммы  флавоноидов в пересчете на изосалипурпозид  и абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

                         500 х 50 х С х 100 х 100

                 Х = ----------------------------------

                              m х 5 х (100 - W)

С - количество суммы флавоноидов, найденное по калибровочному графику, в граммах на 1 мл.

Примечание. Приготовление  раствора Государственного стандартного образца (ГСО) изосалипурпозида: около 0,025 г (точная навеска) ГСО изосалипурпозида, высушенного до постоянной массы  при температуре 100-105 град. С, растворяют в мерной колбе вместимостью 250 мл в небольшом количестве 95% спирта и доводят объем раствора тем же спиртом до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2 мл приготовленного раствора и доводят объем 95% спиртом до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Построение  калибровочного графика. Около 0,025 г (точная навеска) ГСО изосалипурпозида, высушенного  до постоянной массы при температуре 100-105 град. С, помещают в мерную колбу  вместимостью 250 мл, растворяют в небольшом  количестве 95% спирта и доводят объем 95% спиртом до метки. Отбирают по 0,25; 0,50; 1,25; 2,50; 5,00; 6,25 мл раствора в мерные колбы вместимостью 25 мл и доводят объем растворов 95% спиртом до метки. Измеряют оптическую плотность растворов на спектрофотометре при длине волны 315 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют 95% спирт.

Для построения калибровочного графика по оси ординат  откладывают оптическую плотность, а по оси абсцисс - концентрацию стандартного образца изосалипурпозида в граммах в 1 мл раствора.

 Содержание флавоноидов в цветках бессмертника песчаного должно быть не менее 6%. [5, 43]

 

2.6.5 Определение влажности.

Под влажностью понимают потерю в массе за счет гигроскопической влаги и летучих  веществ, которую определяют при  высушивании до постоянной массы.

Около 0,5 г препарата (точная навеска) сушат в сушильном шкафу в течение 5 ч, затем охлаждают в эксикаторе 30 мин и взвешивают. Каждую навеску помещают в предварительно высушенную и взвешенную вместе с крышкой бюксу и ставят в нагретый до 102,5 +/-2,5 град. С сушильный шкаф. Время высушивания отсчитывают с того момента, когда температура в сушильном шкафу вновь достигнет 102,5 +/-2,5 град. С.

Высушивание проводят до постоянной массы. Постоянная масса  считается достигнутой, если разница между двумя последующими взвешиваниями после 30 мин высушивания и 30 мин охлаждения в эксикаторе не превышает 0,01 г.

Влажность пробы (X) в процентах вычисляют по формуле:

                               (m - m₁)100

                       Х = -----------------,

                                      m

 m - масса пробы до высушивания в граммах;

m₁ - масса сырья после высушивания в граммах.

За окончательный  результат определения принимают  среднее арифметическое двух параллельных определений, вычисленных до десятых долей процента. Допускаемое расхождение между результатами двух параллельных определений не должно превышать 0,5%.[4]

 

ГЛАВА 3. ИССЛЕДОВАНИЕ СУХОГО ЭКСТРАКТА БЕССМЕРТНИКА

1. Результаты определения органолептических свойств.

 

Таблица 2.

Результаты определения органолептических свойств

Описание

Экстракт (наименование образца)

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

Цвет  буровато-желтый

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

Запах слабый характерный

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

Вкус горьковатый

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

 

Полученные результаты указывают на соответствие параметров данных проб нормам органолептического контроля.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2. Результаты определения физических параметров.

Таблица 3.

Результаты  определения физических параметров

Описание	Экстракт (наименование образца)
	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14
однородность	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+	+
отклонение от средней  массы одного порошка, %	1,0	0,8	1,2	1,4	0,5	0,6	1,2	0,5	0,8	1,5	0,9	0,6	0,8	0,7

 

Физические параметры  данных проб соответствуют нормам.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3. Результаты качественного анализа.

Таблица 4.

Результаты качественного  анализа

Реактив / реакция

Экстракт (наименование образца)

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

Окрашивание

Цианидиновой пробы

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

красное

Цианидиновая по Брианту

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

Красное (октанольный  слой)

2% AlCl3

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

желто-зеленое

10% NaOH

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

желто-бурое

Ацетат свинца

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

желтый осадок

Борно-цитратный реактив

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

ярко-желтое окрашивание  с желто-зеленой флуоресценцией

Жидкость Фелинга

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

+

кирпично-красный осадок

 

Препарат выдержал все  качественные испытания, что позволяет говорить о наличии флавоноидов.

 

 

 

 

 

 

 

 

3.4 Результаты количественного анализа.

Таблица 5.

Содержание БАВ в  сухом экстракте (без наполнителя), полученным на экстрагенте этанол-вода

Концентрация экстрагента	Масса чистого экстракта	Количество действующих  веществ		Количество сопутствующих  веществ
		Масса, г	Процент, %	Масса, г	Процент, %
10 % этанол	5,97	1,050	17,59	4,920	82,41
20 % этанол	6,17	1,210	19,61	4,960	80,39
30 % этанол	6,43	2,585	40,20	3,845	59,80
40 % этанол	6,88	2,905	42,22	3,975	57,78
50 % этанол	7,05	3,375	47,87	3,675	52,13
60 % этанол	7,20	3,955	54,93	3,245	45,07
70 % этанол	7,03	3,145	44,74	3,885	55,26

 

Полученные данные указывают  на наибольшее содержание действующих  веществ (суммы флавоноидов) при минимуме сопутствующих в чистом сухом экстракте, полученном на 60% спирте в данной серии.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Таблица 6.

Содержание БАВ в  сухом экстракте (с наполнителем), полученным на экстрагенте этанол-вода

Концентрация экстрагента	Масса готового экстракта	Количество действующих  веществ		Количество наполнителя		Количество сопутствующих веществ
		Масса, г	Процент, %	Масса, г	Процент, %	Процент, %
10 % этанол	10	1,050	10,50	4,03	40,30	49,20
20 % этанол	10	1,210	12,10	3,83	38,30	49,60
30 % этанол	10	2,585	25,85	3,57	35,70	38,45
40 % этанол	10	2,905	29,05	3,12	31,20	39,75
50 % этанол	10	3,375	33,75	2,95	29,50	36,75
60 % этанол	10	3,955	39,55	2,80	28,00	32,45
70 % этанол	10	3,145	31,45	2,97	29,70	38,85