Шпаргалки по "Микробиологии"

1) Микробиология как наука.  Медицинская микробиология как  научная дисциплина, задачи. Практическое  применение в стоматологии

Микробиология  – наука о мельчайших организмах, которые по предложению итальянского ученого Седильо принято называть микроорганизмами. Среди микроорганизмов различают: 1) эукариоты – грибы и простейшие; 2) прокариоты – бактерии, риккетсии, микоплазмы и 3) вирусы.

Предмет: изуч. морфологию, физиологию (питание, рост, размножение), иммунологию, генетику и экологию мкÒ, имеющих мед. значение.

Задачи медицинской  микробиологии. Медицинская микробиология разрабатывает методы диагностики, способы специфической профилактики и терапии инфекционных болезней. Она тесно связана с клиникой инфекционных болезней, эпидемиологией, гигиеной и рядом других смежных дисциплин.

Задачи МБ:

- Установление этиологической  роли различных микроорганизмов  в патологии человека. На этом  строится диагностика инфекционных  заболеваний.

- Разработка методов диагностики  и профилактики инфекционных  заболеваний.

- Изучение болезнетворных  свойств патогенных микроорганизмов  с целью определения клинической  и эпидемиологической значимости  того или иного микроорганизма.

- Контроль за эффективностью лечебных и профилактических мероприятий.

- Изучение асептики, антисептики,  дезинфекции, стерилизации.

- Изучение механизмов  распространения микроорганизмов  во внешней среде, в основном  в питьевой воде, пище, воздухе.

- Изучение вопросов охраны  внешней среды.

Главная задача медицинской  микробиологии – ликвидация инфекционных болезней.

ИСТОРИЯ РАЗВИТИЯ МИКРОБИОЛОГИИ

Становление микробиологии  как науки происходило в три  этапа. На первом этапе было установлено  существование микробов в природе; на втором – дифференцированы виды микробов, на третьем – началось изучение иммунитета и профилактики инфекционных болезней, вызванных патогенными  микробами.

 

2) Научно-теоритическая, практическая  и производственно-техническая база  МБ и иммунологии

 

3) Таксономические царства  микробов, характеристика

Основной  таксономической единицей систематики  бактерий является вид.

Вид – это эволюционно сложившаяся  совокупность особей, имеющая единый генотип, который в стандартных  условиях проявляется сходными морфологическими, физиологическими, биохимическими и  другими признаками.

Вид не является конечной единицей систематики. Внутри вида выделяют варианты микроорганизмов, отличающиеся отдельными признаками:

1) серовары (по антигенной структуре);

2) хемовары (по чувствительности к химическим веществам);

3) фаговары (по чувствительности к фагам);

4) ферментовары;

5) бактериоциновары;

6) бактериоциногеновары.

Бактериоцины  – вещества, продуцируемые бактериями и губительно действующие на другие бактерии. По типу продуцируемого бактериоцина различают бактериоциновары, а по чувствительности – бактерициногеновары.

Свойства  бактерий:

1) морфологические;

2) тинкториальные;

3) культуральные;

4) биохимические;

5) антигенные.

Виды  объединяют в роды, роды – в семейства, семейства – в порядки. Более  высокими таксономическими категориями  являются классы, отделы, подцарства и  царства.

Патогенные  микроорганизмы относятся к царству  прокариот, патогенные простейшие и  грибы – к царству эукариот, вирусы объединяются в отдельное  царство – Vira.

Все прокариоты, имеющие единый тип организации  клеток, объединены в один отдел  – Bacteria, в котором выделяют:

1) собственно бактерии;

2) актиномицеты;

3) спирохеты;

4) риккетсии;

5) хламидии;

6) микоплазмы.

Для систематики микроорганизмов используются:

1) нумерическая таксономия. Признает равноценность всех признаков. Видовая принадлежность устанавливается по числу совпадающих признаков;

2) серотаксономия. Изучает антигены бактерий с помощью реакций с иммунными сыворотками;

3) хемотакcономия. Применяются физико-химические методы, с помощью которых исследуется липидный, аминокислотный состав микробной клетки и определенных ее компонентов;

4) генная систематика. Основана на способности бактерий с гомологичными ДНК к трансформации, трансдукции и конъюгации, на анализе внехромосомных факторов наследственности – плазмид, транспозонов, фагов.

Чистая  культура – это бактерии одного вида, выращенные на питательной среде.

 

4) Условные классы патогенных  прокариотов, характеристика

 

 

 

5) Условные классы патогенных эукариот, характеристика

 

 

 

 

6) Условные классы вирусов,  характеристика 

Вирусы  – микроорганизмы, составляющие царство Vira.

Вирусы  могут существовать в двух формах: внеклеточной (вириона) и внутриклеточной (вируса).

По  форме вирионы могут быть: округлыми, палочковидными, в виде правильных многоугольников, нитевидными и  др.

Размеры их колеблются от 15–18 до 300–400 нм.

В центре вириона – вирусная нуклеиновая  кислота, покрытая белковой оболочкой  – капсидом, который имеет строго упорядоченную структуру. Капсидная  оболочка построена из капсомеров.

Нуклеиновая кислота и капсидная оболочка составляют нуклеокапсид.

Нуклеокапсид  сложноорганизованных вирионов покрыт внешней оболочкой – суперкапсидом.

ДНК может быть:

1) двухцепочечной;

2) одноцепочечной;

3) кольцевой;

4) двухцепочечной, но с одной более короткой цепью;

5) двухцепочечной, но с одной непрерывной, а с другой фрагментированной цепями.

РНК может быть:

1) однонитевой;

2) линейной двухнитевой;

3) линейной фрагментированной;

4) кольцевой;

5) содержащей две одинаковые однонитевые РНК.

Вирусные  белки подразделяют на:

1) геномные – нуклеопротеиды. Обеспечивают репликацию вирусных нуклеиновых кислот и процессы репродукции вируса;

2) белки капсидной оболочки – простые белки, обладающие способностью к самосборке. Они складываются в геометрические структуры, в которых различают несколько типов симметрии: спиральный, кубический или смешанный;

3) белки суперкапсидной оболочки – это сложные белки. Выполняют защитную и рецепторную функции.

Среди белков суперкапсидной оболочки выделяют:

а) якорные белки (обеспечивают контакт вириона с клеткой);

б) ферменты (могут разрушать мембраны);

в) гемагглютинины (вызывают гемагглютинацию);

г) элементы клетки хозяина.

Взаимодействие  вирусов с клеткой хозяина

Существует  четыре типа взаимодействия:

1) продуктивная вирусная инфекция (происходит репродукция вируса, а клетки погибают);

2) абортивная вирусная инфекция (репродукции вируса не происходит, а клетка восстанавливает нарушенную функцию);

3) латентная вирусная инфекция (идет репродукция вируса, а клетка сохраняет свою функциональную активность);

4) вирус-индуцированная трансформация (клетка, инфицированная вирусом, приобретает новые, свойства).

 

7) Биноминальная номенклатура М, Род, вид, вариант, штамм, клон микробов

Используется  биноминальная система Линнея, первое слово означает род. Род основан на морфологии или фамилии автора открывшего. Второе слово означает вид. Вид связан с заболеванием или источником происхождения.

Вид. Одной из основных таксономических  категорий является вид (species). Вид  — это совокупность особей, объединенных по близким свойствам, но отличающихся от других представителей рода

Чистая  культура. Совокупность однородных микроорганизмов, выделенных на питательной среде, характеризующихся  сходными морфологическими, тинкториальными (отношение к кра­сителям), культуральными, биохимическими и антигенными свойствами, называется чистой культурой.

Штамм. Чистая культура микроорганизмов, выделенных из определенного источника и  отличающихся от других представителей вида, называется штаммом. Штамм —  более узкое понятие, чем вид  или подвид.

Клон. Близким к понятию штамма является понятие клона. Клон представляет собой  совокупность потомков, выращенных из единственной микробной клетки.

Для обозначения некоторых совокупностей  микроорганизмов, отличающихся по тем  или иным свойствам, употребляется  суффикс var (разновидность) вместо ранее применявшегося type.

Поэтому микроорганизмы в зависимости от характера различий обозначают как  морфовары (отличие по морфологии), резистентовары (отличие по устойчивости к антибиотикам), серовары (отличие по антигенам), фаговары (отличие по чувствительности к бактериофагам), биовары (отличие по биологическим свойствам), хемовары (отличие по биохимическим свойствам) и т. д.

 

 

8) морф.признаки прокариотов и эукариотов, используемые при микроскопическом определении

 

 

9) микроскопические методы  изучения морфологии микробов.

--световая  микроскопия используется только для определения поля зрения

---иммерсионная  микроскопия (в 600-1000 раз). Препарат  обязательно должен быть окрашен,  иммерсионныц объектив 90, препарат  готовим на предметных стеклах,  иммерсионное масло с показателем преломления = показателю преломления предметного стекла, т.о. луч выпрямляется, конденсер который стоит под предметным столиком. Изучение морфологии микробов ( НЕ вирусов).

--темнопольная  микроскопия - Микроскопия в темном поле зрения основана на явлении дифракции света при сильном боковом освещении взвешенных в жидкости мельчайших частиц (эффект Тиндаля). Используется темнопольный микроскоп. Метод основан на способности микробов преломлять световой луч. Используют параболоид-конденсер, который имеет вид трапеции, верхняя и нижняя границы окрашены в черный цвет. Живые неокрашенные объекты (подвижность МО)

--фазово-контрастная  микроскопия. Основан на переводе фазовых изменений светового луча не регистрируемых нашим глазом в амплитудные. Не окрашенные, особенно грибы.

Фазово-контрастное  приспособление дает возможность увидеть  в микроскоп прозрачные объекты. Они приобретают высокую контрастность  изображения, которая может быть позитивной или негативной. Позитивным фазовым контрастом называют темное изображение объекта в светлом  поле зрения, негативным — светлое  изображение объекта на темном фоне. Для фазово-контрастной микроскопии используют обычный микроскоп и дополнительное фазово-контрастное устройство, а также специальные осветители.

---люминесцентная  (или флюоресцентная) микроскопия. Используют красители флюорохромы. Основана на явлении фотолюминесценции.

Люминесценция — свечение веществ, возникающее  после воздействия на них каких-либо источников энергии: световых, электронных  лучей, ионизирующего излучения. Фотолюминесценция  — люминесценция объекта под  влиянием света. Если освещать люминесцирующий  объект синим светом, то он испускает  лучи красного, оранжевого, желтого  или зеленого цвета. В результате возникает цветное изображение  объекта. Окрашенные объекты по Гр.

 

--электронная  микроскопия. Позволяет наблюдать объекты, размеры которых лежат за пределами разрешающей способности светового микроскопа (0,2 мкм). Электронный микроскоп применяется для изучения вирусов, тонкого строения различных микроорганизмов, макромолекулярных структур и других субмикроскопических объектов. Чем выше плотность потока и чем меньше длина пробега, тем выше разрешающая способность. Ультраструктура бактерий и вирусов.

10) Дифференциальные методы  окраски микробов 

Окраска простая (фуксин, щелочной метиленовый-синий и тд)

Сложные

---Грамм, предназначен для определения видовой принадлежности бактерий. Гр+ фиолетовый, Гр- розовый, красный. Зависит от толщины стенки. В цитоплазме Гр+ есть рибонуклеад магния, который окрашивается генцианвиолетом в фиолетовый.

На  фиксированный мазок генцианвиолет  на 2 минуты, р-р Люголя на 2 минуты, р-р  спирта 20 сек, промываем, фуксин Пфайфера на 3 мин.

--Циль-Нильсон. Для обнаружения микобактерий. Их особенность – кислотоупорность, которая обусловлена большим количеством жиров и жирных кислот.

Наносится фуксин Циля, смачивается водой, мазок  с краской подогревается спиртовкой до появления паров 3 раза. Обработка 3-5% серной кислотой. Промыть водой. Щелочной синькой 3 мин. Микобактерии красные, сопутствующая флора синяя.

--Романовский-Гимза

---Леффлера  и Нейссера для определения  родовой принадлежности коринебактерий. Они содержат зерна волютина.

Основан на метахромазии зерен волютина, т.е. на способности последних изменять цвет красителя. На фиксированный мазок  щелочную синьку на 3 мин., зерна фиолетов, цитоплазма синяя.

---нейссера. Для определения коринебактерий. Основан на хроматофильности зерен волютина, т.е. на сродстве к основным красителям.  На фиксированный мазок уксуснокислая синька на 3 мин., р-р Люголя на 2 минуты, краску смываем, наносим хризоидин на 3 мин., цитоплазма желтая, зерна темно-синие.

---Метод  Ожешко, для бацилл и клостридий (Гр+, спорообразующие), для выявления  спор

Негативный  метод. Щелочная синька или фуксин на 3 мин., промываем, просушиваем, цитоплазма в цвет красителя, споры неокрашенные

Позитивный, 5% соляная кислота для разрыхления  спор, а затем красить по Циль-Нильсону. Спора красные, цитоплазма синяя.

--- Романовский-Гимза. Мазки, фиксированные в метиловом спирте, окрашивают раствором  в течение 40—120 мин (продолжительность окрашивания подбирают эмпирически). Пользуются фосфатным буфером, но рН буфера зависит от вида мазка: для выявления простейших — 6,8, малярийного плазмодия — 7,0 — 7,2. Ополаскивают в дистиллированной воде, высушивают и исследуют при иммерсии. Бактерии окрашиваются в фиолетово-красный цвет, цитоплазма клеток — в голубой, ядра — в красный. При окрашивании простейших их цитоплазма приобретает голубой цвет, а ядра — красно-фиолетовый.