Трихинеллёз свиней

Симптомы болезни.

Клиника трихинеллёза у животных.

При сильной степени инвазии симптомы болезни проявляются на 3-5 сутки после заражения. Повышается температура тела, отмечаются понос, резкое снижение аппетита и исхудание. Регистрируют болезненность мышц, животные подолгу лежат. У больных учащенное и поверхностное дыхание, отёки век и конечностей. Иногда отмечается дрожь мышц, нарушение координации движений, слезотечение. Симптомы болезни более или менее проявляются в течение 1-1,5 месяцев, а затем указанные признаки сглаживаются до бессимптомного течения.

Различают кишечный трихинеллез, вызываемый трихинеллами в предмагинальной и имагинальной стадиях, и мышечный трихинеллез, возникший в результате паразитирования личинок в скелетной мускулатуре.

Патологоанатомические изменения. При интенсивной инвазии кишечный трихинеллез характеризуется острым воспалительным процессом: набуханием слизистой кишечника, расширением кровеносный и лимфатических сосудов, мелкими кровоизлияниями, выделением слизи и серозного экссудата. Развивается геморрагический или десквамативный энтерит. Мышечные волокна становятся набухшими, теряют поперечную исчерченность. Через 3-4 месяца после заражения капсула вокруг личинки расслаивается в результате иммунной реакции: внутренний слой гиалиновый, являющийся преципитатом, и наружный соединительнотканный. При хроническом течении болезни, через несколько месяцев стенка капсулы начинает обызвествляться.

Трихинеллёз человека.

Инкубационный период при трихинеллезе человека чаще продолжается от 10 до 25 дней. Короткий 5-8 дней и длительный 28-30 дней инкубационный период встречается редко. В некоторых случаях очень легкого течения инвазии инкубация затягивается до 42-45 дней. Как правило, длительная инкубация наблюдается при легком течении трихинеллеза и, наоборот, в тяжелых случаях бывает короткой.

Острый трихинеллез. Уже с первых дней болезни отмечается плохое самочувствие, головная боль, повышение температуры, иногда до 39-40*, отеки век и лица. Вскоре возникают мышечные боли. Часто появляются кожные полиморфные сыпи, конъюнктивиты, кровоизлияния в конъюнктиву. В остром периоде бывают бессонница, головные боли, галлюцинация, иногда депрессия. В осложненных случаях развиваются более стойкие неврологические и психологические синдромы. Боли в животе и диспепсические расстройства наблюдаются не более чем у четверти больных, поносы редко. В начале болезни могут отсутствовать некоторые из отмеченных признаков. Полная клиническая картина развертывается на протяжении 2-4 дней. Легкие заболевания часто протекают без подъема температуры. Лихорадка ремитирующего типа бывает у большинства больных. При легких заболеваниях и средней тяжести она нарастает обычно в течение 1-4 дней, а у тяжелых больных в более длительный период (13-20 дней). Отеки век и всего лица в сочетании с конъюнктивитом являются одним из постоянных признаков трихинеллеза. При легком и среднем  клиническом течении болезни отеки быстро возникают и держатся 1-2 недели. При осложненном трихинеллезе отеки, как и лихорадка, развиваются медленнее и достигают максимума в более поздние сроки. Мышечные боли встречаются у подавляющего числа больных и появляются спустя 1-3 и больше дней от начала болезни. Чем тяжелее протекает заболевание, тем раньше они возникают. При тяжелом течении трихинеллеза могут появляться тяжелейшие миальгии с контрактурами.

Клиническое проявления достигают максимума к концу первой недели болезни и держатся в течение 1-2 недель, после чего состояние больного резко улучшается. Мышечные боли и отек лица могут периодически возобновляться. При интенсивной инвазии трихинеллез может осложняться органными и системными поражениями. Чаще развивается миокардит и пневмония, реже менингоэнцефалит, абдоминальный синдром, а также поражение печени, почек, флебиты, тромбозы крупных сосудов. Осложнения развиваются на 3-4, реже 5 неделях заболевания. При трихинеллезом миокардите может возникнуть острая сердечная недостаточность, но чаще она нарастает постепенно. Для пневмонии характерны диффузное усиление сосудистого рисунка, мигрирующие лимфадениты; часто поражается плевра.

Абдоминальный синдром встречается обычно при интенсивном поражении. Затяжной абдоминальный синдром в сочетании с кожными высыпаниями возникает на 3-4 неделях болезни. Он характеризуется приступообразными сильными болями. Этот синдром не связан с паразитированием трихинелл кишечнике, а зависит от сосудистых поражений. Парезы и параличи при трихинеллезе также связаны с неспецифическими васкулитами диффузноочаговым гранулематозом в головном и спином мозге, реже с тромбозами крупных сосудов.

В зависимости от выраженности признаков болезни: лихорадки, отеков лица, мышечных болей, эозинофилии крови и наличии осложнений (миокардит, пневмония, менингоэнцефалит, флебиты) различает следующие клинические формы: легкую, средней тяжести (неосложненный трихинеллез), тяжелую и очень тяжелую (осложненный трихинеллез, иногда с летальным исходом).

Диагноз трихинеллеза устанавливается на основании типичной клинической картины, эпидемиологических предпосылок и исследования мяса, которое могло служить причиной заражения, на личинки трихинелл. Серологические реакции становятся положительными лишь на 3-4 неделе инвазии. Эти реакции могут быть отрицательными при очень тяжелом течении болезни и при лечении стероидными гормонами. В редких случаях для подтверждения диагноза прибегают к биопсии. В кале половозрелые трихинеллы не обнаруживаются. В венозной крови также практически нельзя обнаружить мигрирующих личинок ввиду кратковременного их пребывания в кровотоке.

Трихинеллез, особенно где он редок, не всегда распознается сразу, и его часто принимают за брюшной или сыпной тиф, пневмонию, грипп, отек Квинке.

Хронический трихинеллез.

После того как стали широко применять стероидную десенсибилизирующую терапию в острой фазе трихинеллеза, у части больных инвазия принимала хроническое течение. Хроническая фаза трихинеллеза может продолжаться несколько месяцев, и даже лет. Основные изменения в этих случаях наблюдаются в скелетных мышцах и мышце сердца. Больные жалуются на боли в области сердца, на непроходящие миальгии разной интенсивности, общую слабость. Отмечаются приглушенность тонов сердца и отклонения в электрокардиограмме. В биопсированных мышцах больных находят хроническое воспаление и дегенеративные мышечные изменения.

Улучшение общего состояния больных в хронической фазе трихинеллеза при назначении стероидов позволяет считать, что аллергические явления сохраняются и в этой фазе болезни. Возможно, что подавление реактивности хозяина стероидными гормонами приводит к нарушению капсулообразования личинок, появлению воспалительных инфильтратов в мышцах и гибели личинок. Высвободившиеся при этом антигены, возможно, продолжают сенсибилизировать организм.

- 7 -

Диагностика.

Методика прижизненного диагноза разработана не достаточно. Некоторое практическое значение имеют биопсия ушных мышц и иммунологические реакции (микропреципитация м внутрикожная проба).

Реакция микропреципитации на живых личинках. В лунку предметного стерильного стекла вносят 0,5мл испытуемой сыворотки крови и с каплей изотонического раствора хлорида натрия 15-25 трихинелл. Лунку накрывают покровным стеклом и помещают препарат в термостат при 37*С на 18-24 часа. При положительной реакции на переднем конце у живых личинок формируются мелкозернистые преципитаты в виде шапочки.

Внутрикожная проба. Стандартный антиген в дозе 0,1мл вводят внутрикожно в складку уха. При положительной реакции на месте инъекции антигена через 30-40 минут появляется розовое или красное пятно и припухлость диаметром до 1,5см. одновременно кожная складка утолщается на 5-8мм (по сравнению с нормой). В практических условиях применяют редко.

Основной метод посмертной диагностики трихинеллеза –трихинеллоскопия кусочков мышц (от свиных туш), реже –ускоренный метод переваривания мышц в искусственном желудочном соке. Для исследования на трихинеллез материал следует брать из ножек диафрагмы каждой туши две пробы по 50г.

Трихинеллоскопия. Из проб мяса изогнутыми ножницами вдоль мышечных волокон, ближе к их сухожильной части, нарезают по 12 кусочков величиной с овсяное зерно. Срезы помещают на компрессорий и раздавливают до такой степени, чтобы сквозь них можно было читать газетный шрифт. Приготовленные 24 среза мышц тщательно исследуют под трихинеллоскопом, под малым увеличением микроскопа, с помощью проекционной камеры КТ-3 либо экранного трихинллоскопа.

Ускоренный метод переваривания мышц в искусственном желудочном соке (по Владимировой). Пробу мышц массой 10г измельчают в мясорубке, помещают в колбу или банку и добавляют 250мл искусственного желудочного сока (медицинский пепсин -3г, соляная кислота -1г, вода -100г), тщательно перемешивают и ставят в термостат                                            при температуре 42-47*С. Через 4-5 часов верхний слой жидкости осторожно сливают, а осадок наносят на предметное стекло тонким слоем и исследуют под микроскопом. Этот метод наиболее эффективен. В настоящее время на мясокомбинатах используют новый аппарат АВТ. для группового переваривания мышц, который в 2-3 раза эффективнее и намного производительнее обычного метода трихинеллоскопии свиней.

Методы окраски мышечных срезов при диагностике трихинеллеза.

В лабораториях ветеринарной - санитарной экспертизы на рынках  для диагностики трихинеллез применяют компрессорную трихинеллоскопию. Однако в замороженном мясе свиньи и диких животных (медведь, кабан, барсук) обнаружить трихинелл трудно, так как при его консервировании низкими температурами вода из капсул паразита вымораживается, а после дефростации они заполняются мясным соком. Мясной сок имеет цвет мяса, поэтому трихинеллы становятся незаметными.

Учитывая вышеизложенное, возникла задача – выявление эффективности различных методов окраски мышечных срезов, поступающих на рынки при диагностике трихинеллеза.

Для просветления мышечных срезов применяли 50% раствор глицерина в воде, 5% молочную и уксусную кислоты, 10% гидроксид натрия, а для повышения контрастности – метод Ямщикова (1% раствор риванола в 5% растворе едкого натрия и насыщенный раствор метиленового синего в 80% уксусной кислоте), 1% раствор метиленового синего, насыщенный раствор метиленового синего в 80% уксусной кислоте, 1% водный раствор риванола.

Рассмотрим эффективность различных методов окраски мышечных волокон на примере опыта Ивановской ГСХА.

Материал подготовляли по общепринятой методике. Мороженое мясо оттаивали и делали тонкие срезы толщиной 1-2мм. Для каждого опыта  нарезали по 28 срезов.

При окраске по Ямщикову мышечные срезы вначале на 2 минуты заливают 1% раствором риванола, приготовленным на 5% растворе едкого натра, а затем на 1 минуту насыщенным раствором метиленового синего (15г на 100мл 80% уксусной кислоты). При этом мышечные волокна окрашиваются в желтый цвет, капсулы трихинеллы в ярко-зеленый и трихинеллы – в синий.

Однако риванол не растворяется в щелочной среде, поэтому вместо 1% раствора риванола, приготовленного на 5% растворе едкого натра, взяли 1% водный раствор риванола. Для окраски срезы раздавливали между стеклами компрессория, препаровальной иглой снимали их в чашку Петри и на 2 минуты заливали 1% водным раствором риванола. Потом риванол сливали, срезы придерживали иглой и заливали насыщенным раствором метиленового синего. Через 1 минуту краску сливали, срезы тщательно промывали в горячей воде (80*С), раскладывали на стекле компрессория и исследовали обычным метолом.

Второй метод окраски использовали для обработки мышечных срезов. С этой целью не каждый срез на 1 минуту наносили по 1 капле 1% водного раствора этакридина лактата, приготовленного на дистиллированной воде, а затем исследовали компрессорным методом.

Третий и четвертый способы окраски состояли в обработке мышечных срезов 1% раствором метиленового синего и насыщенным раствором метиленового синего в течение 1 минуты.

В следующих четырех опытах занимались просветлением срезов. Для этого их слегка раздавливали между стеклами компрессория, снимали верхнее стекло и на каждых срез наносили по 1 капле соответственно 50% раствора глицерина в воде, 5% молочной кислоты, 5% уксусной кислоты, 10% гидроксида натрия  (только на 30сек.). через 1минуту накладывали верхнее стекло, завинчивали зажимы и проводили микроскопию.

Исследования показали, что окраска срезов по П.Я. Ямщикову химически невозможна, так как риванол не растворяется в щелочной среде. При использовании 1% водного раствора риванола и насыщенного раствора метиленового синего капсула трихинеллы была интенсивно зеленого цвета, мышечные волокна светло-зеленого и трихинеллы - бледно-зеленого цвета или вообще не окрашивались, поэтому последние хорошо видны в поле зрений микроскопа.

При окраске срезов 1% водным раствором этакридина лактата мышцы приобретали светло - желтый цвет, капсула – оранжевый и хорошо просматривалась трихинелла. Данный метод позволит исключить пропуск слабо инвазированных туш.

Окрашивание срезов 1% раствором метиленового синего улучшает выявление трихинелл, при этом мышечные волокна имели голубоватый цвет, капсулы – синий, а личинка не окрашивалась, но становилась хорошо видимой.

Использование насыщенного раствора метиленового синего на 80% уксусной кислоте не дало желаемого результата. Мышечные волокна, капсула и трихинеллы окрашивались в темно- синий цвет. Причем личинки сильно перекрашивались и поэтому были плохо видны. Не рекомендуйся применять данный способ для выявления трихинелл.

Максимального просветления мышечных волокон мяса достигается с помощью 5% молочной кислоты или 50% раствора глицерина в воде. Через 1 минуту мышечные срезы приобретали сероватый цвет, становились прозрачными, более рыхлыми, капсула трихинелл набухала и хорошо просматривалась, а жидкость в полости капсулы просветлилась. В этом случае трихинелла легко обнаруживается.

Просветление мышечных срезов 5% уксусной кислотой было невыраженным, 10% гидроксид натрия разрушал ткань, она приобретала бесструктурный вид.

С экономической точки зрения наиболее эффективным препаратом для окраски мышечных срезов при компрессорной трихинеллоскопии консервированного мяча является 1% раствор метиленового синего, а для просветления – 5% уксусная кислота. К наиболее дорогостоящим способам окраски мышечных срезов можно отнести использование 1% водного раствора риванола и насыщенного раствора метиленового синего, просветления - 50% раствора глицерина в воде.     

Дифференциальная диагностика. Личинки трихинелл необходимо отличать от сходных с ними паразитарных или других образований: саркоспоридий, цистицеркусов, известковых конкрементов, кристаллов тирозина. Форма капсул трихинелл у свиней, человека и крыс яйцевидная или лимонообразная, у других плотоядных животных круглая. Живые личинки в капсуле спиралеобразно свернуты, погибшие набухают и распадаются на отдельные фрагменты. При сильной петрификации личинок трудно обнаружить, поэтому срезы мышц просветляются в 5-10% растворе соляной кислоты в течение 1-2 часов.